郭慶梅，周鳳琴，郭偉，邢玉娜，張永清（.山東中醫(yī)藥大學藥學院，濟南5055；.山東省千佛山醫(yī)院，濟南 5004；.魯南制藥股份有限公司厚普公司，山東臨沂 76000）

金銀花為忍冬科植物忍冬Lonicera japonicaThunb.的干燥花蕾或初開的花，具有清熱解毒、涼散風寒的功效。山東金銀花的栽培歷史長達數百年[1]，長期的自然選擇和人工選擇，使其形態(tài)發(fā)生了明顯的變異和分化，形成了很多農家品種或品系，藥材產量與質量均呈現(xiàn)差異[2～5]。但有關忍冬花蕾的形態(tài)學研究較少，主要集中于忍冬屬花粉形態(tài)的研究[6～9]。有研究者對不同產地金銀花的花瓣、花冠管及柱頭進行了觀察和比較，表明不同種間花部形態(tài)有明顯區(qū)別[9]。金銀花從花蕾到全開放這一過程大體分為7個階段，即幼蕾（綠色小花蕾，長約1 cm）、三青期（綠色花蕾，僅上端膨大，長約2.2～2.4 cm）、二白期（呈淡黃綠色，中部以上略膨大，長約3～3.9 cm，一般為大白期前一天）、大白期（類白色花蕾，中部以上充分膨大，長約3.8～4.6 cm，一般為花蕾開放的前一天）、金花（花冠變黃色，長約4～4.5 cm）、凋花（棕黃色）等不同發(fā)育階段[10]。山東產區(qū)金銀花的采收期以二白期花蕾為主。筆者對忍冬不同栽培類型二白期花蕾進行了形態(tài)學的觀察和比較，包括花蕾長度、最粗處直徑、外表面非腺毛和腺毛密度等，旨在為忍冬栽培品種的劃分和優(yōu)選積累資料。

1 儀器與材料

PM-10AP實體顯微鏡（日本Olympus公司）；DMWB1-C生物顯微鏡（廈門市麥克奧迪實業(yè)集團有限公司）。

水合氯醛、甘油為分析純，水為蒸餾水。

材料為山東省平邑縣鄭城鎮(zhèn)種植的9個傳統(tǒng)栽培類型的于二白期采摘忍冬頭茬花的花蕾，鮮用或曬干后備用，干燥花蕾均為黃白色。樣品經山東中醫(yī)藥大學藥學院周鳳琴教授鑒定來源均為忍冬科植物忍冬L.japonicaThunb.，憑證標本存放于山東中醫(yī)藥大學藥用植物標本室。9個不同栽培類型忍冬花蕾外觀形態(tài)比較見表1。

2 方法與結果

2.1 方法

取忍冬不同栽培類型的新鮮花蕾，進行形態(tài)學觀察、描述。隨機取不同栽培類型忍冬二白期鮮花蕾10個，分別測量其長度和最粗處的直徑，計算平均值與標準偏差。

另取花蕾用水浸透，置水合氯醛中冷浸至半透明，然后貯藏于稀甘油中。每個栽培類型取花蕾10個，平均分為上、中、下三段，分別制作外表面裝片[8]。在10×10光學顯微鏡下，每段隨機觀察3個視野，對腺毛、非腺毛分別計數，計算其分布密度。所得數據使用SAS軟件進行統(tǒng)計分析及顯著性檢驗（P＜0.05）。

2.2 結果

忍冬不同栽培類型花蕾長度等指標測量、統(tǒng)計結果見表2。

由表2可見，2號小雞爪最長，8號大麻葉最短；2號小雞爪與3號細毛針、4號紅褲腿、5號麻針、7號大毛花、8號大麻葉、9號牻牛兒腿之間有顯著性差異；與其他類型之間無顯著性差異?；ɡ僮畲痔幹睆?號小毛花最粗，與其他類型之間有顯著性差異；8號大麻葉最小，與4號紅褲腿、5號麻針之間無差異，但與其他類型之間有顯著性差異。

忍冬花蕾外表面均有非腺毛分布，但不同栽培類型、不同部位上的分布密度均有差異。忍冬花蕾上段9號牻牛兒腿非腺毛密度最大，1號小毛花最小，但與8號大麻葉之間無顯著性差異。中段6號大雞爪最大，與其他類型間有顯著性差異；8號大麻葉最小，與1號小毛花無顯著性差異，但與其他類型間有顯著性差異。下段2號小雞爪最大，與其他類型間有顯著性差異；1號小毛花最小，與除8號大麻葉外的其他類型間有顯著性差異；除6號大雞爪外，7號大毛花與其他類型間均有顯著性差異。

忍冬不同栽培類型花蕾腺毛分布密度結果見表3。

由表3可見，忍冬花蕾上段9號牻牛兒腿腺毛分布密度最大，1號小毛花最小；其中3號細毛針與其他類型之間均有顯著性差異；1號小毛花、8號大麻葉之間無差異，而與其他類型之間均有顯著性差異；5號麻針、7號大毛花之間無差異，但與其他類型之間均有顯著性差異；2號小雞爪、4號紅褲腿、6號大雞爪、9號牻牛兒腿之間無差異，但與其他類型之間均有顯著性差異。中段6號大雞爪最大且與其他類型之間均有顯著性差異，8號大麻葉最?。黄渲?號麻針與其他類型之間均有顯著性差異；1號小毛花、8號大麻葉、9號牻牛兒腿之間無差異，但與其他類型之間有顯著性差異；2號、3號、4號、7號之間無差異，但與其他類型之間均有顯著性差異。下段6號最大，與其他類型之間均有顯著性差異；1號最小，與除2號以外的其他類型之間有顯著性差異。

表1 忍冬不同栽培類型花蕾外觀形態(tài)比較Tab 1 Comparison of shapes of flower buds of different cultivated types of L.japonica

表2 忍冬不同栽培類型花蕾長度、最大直徑和非腺毛密度（個/視野）比較（±s）Tab 2 Comparison of the length，maximum diameter and the density of non-glandular hair（piece/visual field）of flower bud in different cultivated types of L.japonica（±s）

表2 忍冬不同栽培類型花蕾長度、最大直徑和非腺毛密度（個/視野）比較（±s）Tab 2 Comparison of the length，maximum diameter and the density of non-glandular hair（piece/visual field）of flower bud in different cultivated types of L.japonica（±s）

＊同一列不同字母表示差異顯著，P＜0.05＊Same column with different lefters indicate significant difference，P＜0.05

編號±s花蕾長度/cm 花蕾最大直徑/cm 花蕾上段非腺毛密度 花蕾中段非腺毛密度 花蕾下段非腺毛密度±s ±s＊±s ±s 1 2 3 4 5 6 7 8 9 3.59±0.27 4.00±1.90 2.90±0.09 2.75±0.11 2.82±0.09 3.13±0.16 2.74±0.07 2.65±0.16 2.80±0.09名稱小毛花小雞爪細毛針紅褲腿麻針大雞爪大毛花大麻葉牻牛兒腿AB＊ A B＊C A B CBC ABBBA 0.33±0.03 0.30±0.01 0.28±0.01 0.26±0.01 0.26±0.02 0.29±0.01 0.29±0.02 0.25±0.04 0.30±0.02 CCDDB C 82.8±11.2 122.4±25.5 120.6±16.4 122.7±14.5 126.3±9.9 128.8±12.3 125.8±24.3 88.0±22.2 130.6±15.4 93.9±16.0 122.4±12.2 125.8±19.8 112.1±13.4 131.0±15.1 140.0±21.4 129.2±26.1 87.5±15.9 112.5±7.8＊ E B＊ F A C D BBBB AB AB BC CD C BC B EF CDE DB AAACA DBABEC D 120.2±22.8 185.4±30.7 146.2±21.2 144.8±29.3 152.6±10.7 156.1±13.3 166.3±22.3 129.9±26.8 142.7±9.3

表3 忍冬不同栽培類型花蕾各段的腺毛分布密度（個/視野）比較（±s）Tab 3 Comparison of the density of glandular hair in different cultivated types of L.japonica（piece/visual field）（±s）

表3 忍冬不同栽培類型花蕾各段的腺毛分布密度（個/視野）比較（±s）Tab 3 Comparison of the density of glandular hair in different cultivated types of L.japonica（piece/visual field）（±s）

＊同一列不同字母表示差異顯著，P＜0.05＊Same column with different lefters indicate significant difference，P＜0.05

編號 花蕾上段 花蕾中段 花蕾下段±s 10.5±2.1 23.5±3.0 20.2±4.1 24.8±4.8 17.9±3.6 24.4±4.4 17.1±4.9 12.0±5.2 25.4±4.1 CABC D 1 2 3 4 5 6 7 8 9±s＊DBBBCABDD名稱小毛花小雞爪細毛針紅褲腿麻針大雞爪大毛花大麻葉牻牛兒腿＊EABACACEA±s 13.4±4.0 20.9±3.6 21.8±5.9 20.7±4.4 17.5±4.0 25.9±5.1 20.4±5.2 12.4±5.0 14.1±2.9 12.7±3.2 14.6±3.1 22.2±4.6 15.9±2.6 21.3±5.6 28.9±3.5 22.6±5.9 19.0±6.5 21.1±2.7 F B E B＊ F E BC

3 分析與討論

3.1 忍冬花蕾形態(tài)與大小對栽培類型劃分的意義

不同栽培類型忍冬二白期花蕾的形態(tài)不一。依據花蕾形態(tài)和色澤，可以很容易將紅褲腿與其他栽培類型分出；大毛花花蕾中部1/2處明顯內彎，可以與其他類型分開；麻針花蕾直立平直，與其他栽培類型差異顯著。不同栽培類型花蕾長度在2.65～4.00 cm之間，其中小雞爪最長，可以與其他栽培類型分開。花蕾最粗處的直徑在0.25～0.33 cm之間，小毛花最粗，可以與其他栽培類型分開。

3.2 忍冬花蕾外表面非腺毛對栽培類型劃分的意義

花蕾外表面非腺毛的分布密度在花蕾的上、中、下三段不完全一致，按在每個視野內非腺毛的密度，呈現(xiàn)上段＜中段＜下段的規(guī)律。不同栽培類型花蕾各段非腺毛的分布密度具有一定的差異。經統(tǒng)計，花蕾上段可以分出疏毛類的小毛花和大麻葉，非腺毛密度每視野內僅為83～88個；在花蕾的中段可以明顯地區(qū)分出大雞爪，非腺毛密度每視野內為140個，小毛花和大麻葉仍為非腺毛分布密度最小的類型；花蕾的下段，小雞爪非腺毛分布密度每視野內為185個，屬于密毛類種質。因此，以花蕾外表面非腺毛的密度為依據，可以將1、2、6、8號與其他栽培類型予以區(qū)分。

3.3 忍冬花蕾外表面腺毛對栽培類型劃分的意義

不同栽培類型忍冬花蕾各段，腺毛的分布密度也有一定的區(qū)別。在花蕾上、中段，小毛花與大麻葉為密度最小的類型，每視野內僅有11～13個，但二者在花蕾下段的密度上可以區(qū)分，前者的密度為13，后者為19?；ɡ俚闹卸魏拖露危箅u爪為腺毛分布密度最大的類型，分別為26（中段）和29（下段），易與其他栽培類型區(qū)分。統(tǒng)計學結果還可依據腺毛分布的密度將細毛針、麻針、大毛花與其他栽培類型明顯分開。

4 小結

將毛被作為忍冬栽培類型劃分依據的設想基于以下幾個方面：金銀花藥材表面被毛；《藥用植物學》描述花冠“外被柔毛和腺毛”；《中國藥典》描述藥材表面“密被短柔毛”；《中藥鑒定學》描述為“粉末中有兩種腺毛；兩種非腺毛”；藥農以表面毛茸的多少劃分不同的栽培類型；毛茸是忍冬花蕾遺傳性特征，栽培類型不同，毛茸的形態(tài)、性狀應有差異。本研究僅初步比較了不同栽培類型忍冬花蕾間形態(tài)特征及其毛被的差異，結果證明了不同栽培類型之間有一定差異。

總之，忍冬花蕾的形態(tài)與顏色、花蕾外表面非腺毛的密度和長度、腺毛密度、腺柄細胞數等可以作為忍冬栽培類型區(qū)分的依據之一。

[1]張永清.山東金銀花生產情況調查[J].山東中醫(yī)雜志，2000，19（10）：621.

[2]周鳳琴，張永清，張 芳，等.山東金銀花種質資源的調查研究[J].山東中醫(yī)雜志，2006，25（4）：268.

[3]周鳳琴，李 佳，冉 蓉，等.我國金銀花主產區(qū)種質資源調查[J].現(xiàn)代中藥研究與實踐，2010，24（3）：21.

[4]周鳳琴，冉 蓉，李 佳，等.山東10個不同種質金銀花中綠原酸含量及其品質評價[J].山東中醫(yī)雜志，2007，26（7）：478.

[5]冉 蓉，孔慶悅，周鳳琴，等.山東10個不同種質金銀花中木犀草苷的含量測定[J].中華中醫(yī)藥學刊，2008，26（4）：753.

[6]徐炳生.中藥金銀花原植物的研究[J].藥學學報，1979，14（1）：23.

[7]徐國鈞，徐珞珊，牛燕珍，等.中藥金銀花的鑒定研究[J].南京藥學院院報，1979，5（1）：82.

[8]朱雅東，濮祖茂，徐國鈞，等.中藥金銀花花粉形態(tài)的研究[J].中國藥科大學學報，1987，18（2）：81.

[9]濮祖茂，邢俊波，李 萍，等.金銀花花部形態(tài)學研究[J].中藥材，2002，12（12）：854.

[10]靳光乾，郭慶梅，陳滬寧，等.金銀花、栝樓、北沙參栽培與加工利用[M].北京：中國農業(yè)出版社，2002：1-200.