羅冠群 白哲永 宋永臣 孫 硼 尤永君
瑞普(保定)生物藥業(yè)有限公司,河北 保定 071000
消毒是控制畜禽舍內(nèi)環(huán)境污染和疫病傳播的有效手段之一。消毒劑能有效地凈化空氣、殺滅畜禽舍內(nèi)空氣及生活環(huán)境中的微生物,消除疾病隱患,已成為當(dāng)代集約化養(yǎng)殖集團(tuán)綜合防疫的重要工具。本試驗(yàn)采用懸液定量殺菌法對(duì)歐福、百毒殺、康瑞金碘、德梵氏、黑盾和藍(lán)盾6種不同消毒劑的消毒效果進(jìn)行比較,以評(píng)定其殺菌作用,為養(yǎng)殖生產(chǎn)提供一定的參考依據(jù)。
1)儀器。超凈工作臺(tái)由蘇州凈化有限公司生產(chǎn),恒溫培養(yǎng)箱由湖南湘儀有限公司生產(chǎn),高壓滅菌鍋和水浴鍋由海爾集團(tuán)生產(chǎn),微量移液器、試管、平皿、培養(yǎng)基、小牛血清白蛋白和硫代硫酸鈉由國(guó)藥集團(tuán)北京化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)。
2)病原菌。試驗(yàn)用大腸桿菌由瑞普(保定)生物藥業(yè)有限公司動(dòng)物疫病診斷中心實(shí)驗(yàn)室保存。
3)消毒劑。歐福由瑞普(保定)生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn),百毒殺由中國(guó)派斯德股份有限公司生產(chǎn),康瑞金碘由東北某藥廠生產(chǎn),德梵氏由大連某動(dòng)物藥品有限公司生產(chǎn),黑盾由河南某藥業(yè)有限公司生產(chǎn),藍(lán)盾由河南某藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。
1)菌懸液制備。將大腸桿菌瓊脂斜面24h新鮮培養(yǎng)物用5mL稀釋液沖洗,混合后稀釋配制成菌懸液,并用細(xì)菌比濁濃度測(cè)定法測(cè)定菌液濃度,然后用稀釋液稀釋至1×108~5×108CFU/mL,備用。
2)消毒劑的稀釋。用無(wú)菌蒸餾水按照產(chǎn)品說(shuō)明配制消毒劑,每種消毒劑選取標(biāo)簽上說(shuō)明的圈舍消毒和飲水消毒2種濃度配制。具體見(jiàn)表1。
表1 6種消毒劑的稀釋倍數(shù)
3)懸液定量殺菌試驗(yàn)。取無(wú)菌試管,先加入0.5 mL制備好的菌懸液,再加入0.5mL有機(jī)干擾物質(zhì)(30g/L小牛血清白蛋白),混勻,置(20±1)℃水浴中,5min后,用微量移液器吸取上述12種濃度的消毒液4.0mL注入其中,迅速混勻并立即計(jì)時(shí)。待試驗(yàn)菌與消毒劑相互作用1h,分別吸取1.0mL樣液,按活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)方法測(cè)定存活菌數(shù),每管樣液接種2個(gè)平皿即可。如平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)較多,可進(jìn)行10倍遞增稀釋后,再進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)。同時(shí)用無(wú)菌蒸餾水代替消毒液,進(jìn)行平行試驗(yàn),作為陽(yáng)性對(duì)照。所有試驗(yàn)樣本均在恒溫箱中37℃培養(yǎng)24h。試驗(yàn)重復(fù)3次,計(jì)算各組的活菌濃度,并換算為對(duì)數(shù)值。
歐福、百毒殺、康瑞金碘、德梵氏、黑盾和藍(lán)盾6種消毒劑的懸液定量殺菌試驗(yàn)結(jié)果,如表2所示。
表2 6種消毒劑的懸液定量殺菌試驗(yàn)結(jié)果
由表2可知,歐福、百毒殺和藍(lán)盾3種消毒劑在圈舍消毒濃度和飲水消毒濃度下對(duì)大腸桿菌的殺滅對(duì)數(shù)值均>5.00;黑盾在圈舍消毒濃度下對(duì)大腸桿菌殺滅對(duì)數(shù)值>5.00,在飲水消毒濃度下對(duì)大腸桿菌殺滅對(duì)數(shù)值為4.11;康瑞金碘和德梵氏在圈舍消毒濃度和飲水消毒濃度下對(duì)大腸桿菌的殺滅對(duì)數(shù)值均<5.00。
試驗(yàn)結(jié)果表明,6種消毒劑對(duì)大腸桿菌均有不同程度的殺滅作用,其中以歐福、百毒殺和藍(lán)盾效果最好。季銨鹽類消毒劑歐福及百毒殺的消毒效果明顯優(yōu)于碘類消毒劑康瑞金碘、德梵氏和黑盾,這與碘制劑易揮發(fā)有一定關(guān)系。在同一條件下,歐福和百毒殺的消毒效果無(wú)明顯差異,但歐福作為季銨鹽和戊二醛混合制劑,能有效避免因長(zhǎng)期使用季銨鹽類消毒劑而使病原菌產(chǎn)生耐藥性,達(dá)到更佳的使用效果。