梁 彬，郭政東，解 芳

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)高等職業(yè)技術(shù)學(xué)院檢驗(yàn)教研室，遼寧沈陽(yáng)110001

C型利鈉肽(CNP)是1990年Sudoh等在豬腦中發(fā)現(xiàn)的利鈉肽家族的第3個(gè)成員，其與心房利鈉肽(ANP)、B型利鈉肽(BNP)共同構(gòu)成利鈉肽家族的主要成員。CNP主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌并在局部發(fā)揮血管擴(kuò)張和抗增殖作用［1］。C型利鈉肽前體氨基末端肽(NT-proCNP)是CNP前體(proCNP)的裂解產(chǎn)物，與CNP等摩爾產(chǎn)生，在血漿中比CNP穩(wěn)定，能更好地反映CNP的合成狀態(tài)［2］。有研究報(bào)道CNP在肝硬化發(fā)展中可調(diào)節(jié)血管舒張和水鈉平衡［3］。本研究以肝硬化患者為研究對(duì)象，探討血清NT-proCNP水平在肝硬化及其不同分級(jí)中的變化，為臨床治療和預(yù)后提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2009年10月－2011年6月來(lái)沈陽(yáng)軍區(qū)202醫(yī)院就診的肝臟疾病患者121例，肝硬化患者65例，其中男46例，女19例，年齡為43～77歲。按臨床 Child-Pugh’s分級(jí):A級(jí)13例，B級(jí)37例，C級(jí)15例。肝纖維化(無(wú)肝硬化)患者56例，其中男41例，女15例，年齡為45～74歲。所有患者均經(jīng)肝臟穿刺、影像學(xué)和臨床癥狀確診。所有患者排除心臟、胃腸道、胰腺及內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病。對(duì)照組45例，來(lái)自于健康體檢人群，男28例，女17例，年齡為33～67歲。排除各型肝炎，且肝腎功能試驗(yàn)正常。肝硬化組、肝纖維化組和正常對(duì)照組的年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 血清NT-proCNP水平的檢測(cè) 抽取空腹靜脈血5 mL，留取血清，－80℃儲(chǔ)存?zhèn)溆?。血清NT-proCNP測(cè)定采用ELISA方法(Immundiagnostik公司)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 所有數(shù)值的表示方式:中位數(shù)(最小值～最大值)。采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，分析各組指標(biāo)的差異性，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清NT-proCNP水平比較 肝硬化組血清中NT-proCNP水平［1.4(0～45.8)pmol/L］顯著高于肝纖維化組［0.3(0 ～25.0)pmol/L］和正常對(duì)照組［0.3(0 ～6.3)pmol/L］(P ＜0.01);肝纖維化組血清NT-proCNP水平與正常對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05)。

2.2 肝硬化患者血清 NT-proCNP水平與 Child-Pugh’s分級(jí)的關(guān)系 按照Child-Pugh’s分級(jí)，肝硬化患者血清 NT-proCNP水平:A級(jí)為 1.2(0～33.2)pmol/L，B 級(jí)為 1.4(0.1 ～ 38.1)pmol/L，C 級(jí)為 1.4(0.3 ～45.8)pmol/L，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05)。

2.3 肝硬化患者血清NT-proCNP水平與臨床并發(fā)癥的關(guān)系 肝硬化患者血清NT-proCNP水平與肝腹水、靜脈曲張出血和肝性腦病相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05，見(jiàn)表1)。

表1 肝硬化患者血清NT-proCNP水平與臨床并發(fā)癥的關(guān)系Tab 1 Relationship between serum levels of NT-proCNP in patients with liver cirrhosis and clinical complication

3 討論

CNP屬于利鈉肽家族成員。由于CNP易被中性肽鏈內(nèi)切酶(NEP)和利鈉肽受體-C(NPR-C)降解，因此正常機(jī)體的血液循環(huán)中CNP的水平很低，處于檢測(cè)下限并且在病理狀態(tài)下的變化很小。NT-proCNP較少被NPR-C和NEP降解，且NT-proCNP水平高，較為穩(wěn)定，易于檢測(cè)［4］，因此，我們可以檢測(cè)血清中 NT-proCNP水平來(lái)反映機(jī)體合成CNP的情況。CNP主要在血管內(nèi)皮細(xì)胞生成，細(xì)胞炎性因子，如白介素-1、腫瘤壞死因子和內(nèi)毒素可促進(jìn)CNP從內(nèi)皮細(xì)胞釋放［5］，因此血漿中NT-proCNP作為一種新的炎癥標(biāo)志物而被廣大學(xué)者關(guān)注。

有研究顯示在外傷敗血癥患者的血清中可見(jiàn)NT-proCNP 水平升高［6］。Koch等［7］報(bào)道在臨床 ICU 病房的危重患者血清中，NT-proCNP水平升高，尤其是肝臟合成功能下降的患者。肝硬化主要臨床表現(xiàn)有肝功能減退和門(mén)靜脈高壓癥，并引起腹水、肝性腦病、靜脈曲張出血、側(cè)支循環(huán)建立、脾大、脾功能亢進(jìn)等多種較為嚴(yán)重的并發(fā)癥，較嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命。敗血癥和肝硬化都存在血流動(dòng)力學(xué)異常，血管阻力減弱以及前炎性因子釋放增加的體征，我們推測(cè)CNP和NT-proCNP是否參與肝臟疾病的發(fā)展過(guò)程和門(mén)脈高壓的形成。我們的研究結(jié)果顯示肝硬化患者血清NT-proCNP水平明顯高于正常對(duì)照組，在肝硬化腹水、靜脈曲張出血和肝性腦病發(fā)生時(shí)，血清NT-proCNP水平明顯升高，提示CNP參與了漸進(jìn)性的肝硬化過(guò)程。在動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)中，CNP表達(dá)上調(diào)與血管舒張有關(guān)，血管舒張促進(jìn)了硬化肝臟的再灌注，緩解了門(mén)動(dòng)脈高壓［8］。從以上的結(jié)果分析，我們推測(cè)在肝硬化患者，尤其肝硬化并發(fā)癥患者，NT-proCNP水平升高促進(jìn)血管舒張，緩解血管阻力，減少心輸出量，NT-proCNP水平升高可能是機(jī)體的內(nèi)源性代償機(jī)制。人和動(dòng)物的研究結(jié)果都顯示，在青春發(fā)育期，NT-proCNP水平都會(huì)出現(xiàn)一個(gè)小高峰［9］。Prickett等［10］對(duì)15周齡的小羊進(jìn)行雌激素干預(yù)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)雌激素干預(yù)后的小羊血漿CNP和NT-proCNP的水平顯著升高，CNP和NT-proCNP的高峰出現(xiàn)在雌激素出現(xiàn)高峰的24 h之后，而在給予雄激素后，血漿CNP和NT-proCNP未見(jiàn)升高。肝硬化的病理機(jī)制中存在雌激素滅活障礙，是否肝硬化患者高濃度的雌激素造成NT-proCNP升高，具體的機(jī)制仍需要我們繼續(xù)研究。

綜上所述，臨床肝臟疾病的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程的影響因素較多，多器官受到累及，很難做出具體的分析。在今后的研究中，如果能同步進(jìn)行其他血管舒張影響因素的檢測(cè)及心臟和腎臟功能檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果則會(huì)更加具有說(shuō)服力。

［1］ Lumsden NG，Khambata RS，Hobbs AJ.C-type natriuretic peptide(CNP):cardiovascular roles and potential as a therapeutic target［J］.Curr Pharm Des，2010，16(37):4080-4088.

［2］ Del Ry S，Cabiati M，Stefano T，et al.Comparison of NT-proCNP and CNP plasma levels in heart failure，diabetes and cirrhosis patients［J］.Regul Pept，2011，166(1-3):15-20.

［3］ Gulberg V，Moller S，Henriksen JH，et al.Increased renal production of C-type natriuretic peptide(CNP)in patients with cirrhosis and functional renal failure［J］.Gut，2000，47(6):852-857.

［4］ Prickett TC，Yandle TG，Nicholls MG，et al.Identification of aminoterminal pro-C-type natriuretic peptide in human plasma［J］.Biochem Biophys Res Commun，2001，286(3):513-517.

［5］ Suga S，Itoh H，Komatsu Y，et al.Cytokine-induced C-type natriuretic peptide(CNP)secretion from vascular endothelial cells-evidence for CNP as a novel auto-crine/paracrine regulator from endothelial cells［J］.Endocrinology，1993，133(6):3038-3041.

［6］ Bahrami S，Pelinka L，Khadem A，et al.Circulating NT-proCNP predicts sepsis in multiple-traumatized patients without traumatic brain injury［J］.Crit Care Med，2010，38(1):161-166.

［7］ Koch A，Voigt S，Sanson E，et al.Prognostic value of circulating amino-terminal pro-C-type natriuretic peptide in critically ill patients［J］.Crit Care，2011，15(1):R45.

［8］ Gracia-Sancho J，Russo L，García-Calderó H，et al.Endothelial expression of transcription factor Kruppel-like factor 2 and its vasoprotective target genes in the normal and cirrhotic rat liver［J］.Gut，2011，60(4):517-524.

［9］ Prickett TCR，Lynn AM，Barrell GK，et al.Amino-terminal proCNP:A putative marker of cartilage activity in postnatal growth［J］.Pediatr Res，2005，58(1):34-40.

［10］ Prickett TCR，Barrell GK，Wellby M，et al.Effect of sex steroids on plasma C-type natriuretic peptide forms:stimulation by oestradiol in lambs and adult sheep［J］.J Endocrinol，2008，199(2):481-487.