安東建 柴 琴 湯 效 譚小浪 王偉明
長(zhǎng)沙市中心醫(yī)院腫瘤科,湖南長(zhǎng)沙 410004
癌癥是中國(guó)成年人死亡的主要原因[1]。目前,手術(shù)、化療、放療等抗癌手段未在療效和生存獲益方面取得突破性進(jìn)展。然而,隨著對(duì)腫瘤發(fā)生機(jī)制的深入了解和現(xiàn)代生物技術(shù)的飛速發(fā)展,自體細(xì)胞免疫治療已成為癌癥治療的第4種重要手段,在腫瘤多學(xué)科綜合治療中起著不可或缺的作用[2]。DC/CIK細(xì)胞是與DC(Dendritic Cell,DC)共培養(yǎng)的 CIK細(xì)胞 (Cytokine Induced Killer cell,CIK)。DC/CIK細(xì)胞治療是目前臨床應(yīng)用較多的自體細(xì)胞免疫療法。作為一種新的治療手段,對(duì)其不良反應(yīng)的研究較少,特別對(duì)腎功能的影響罕有報(bào)道。該文總結(jié)該科2010年1月—2012年5月收集152例接受DC/CIK細(xì)胞治療的癌癥患者的腎功能資料,探討DC/CIK細(xì)胞治療對(duì)腎功能的影響,為臨床安全使用提供依據(jù)。
經(jīng)病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)確診的晚期癌癥152例,男97例,女55例。年齡21~83歲,中位年齡60歲。肺癌63例,肝癌14例,結(jié)腸癌12例,直腸癌8例,乳腺癌9例,胰腺癌5例,卵巢癌5例,鼻咽癌5例,宮頸癌4例,胃癌4例,食管癌3例,腎癌3例,淋巴瘤3例,喉癌2例,惡性黑色素瘤2例,胸腺癌2例,膽囊癌2例,輸卵管癌1例,腹膜間皮瘤1例,腦膠質(zhì)瘤1例,上頜竇癌1例,外耳道癌1例,膀胱癌1例。
1.2.1 DC/CIK細(xì)胞培養(yǎng)與回輸 抽取患者外周靜脈血100 mL。隨后,經(jīng)淋巴細(xì)胞分離液進(jìn)一步分離單個(gè)核細(xì)胞,用生理鹽水洗滌3次,再將細(xì)胞分別進(jìn)行DC及CIK細(xì)胞的培養(yǎng)。DC細(xì)胞在d 0天用含IL-4、TNF等細(xì)胞因子的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),隔天需半量換液,培養(yǎng)至第9天細(xì)胞成熟,再混入CIK細(xì)胞培養(yǎng)中,共同培養(yǎng)。
CIK細(xì)胞第0 d加入含IFN-γ、抗CD3單抗等的無(wú)血清生長(zhǎng)培養(yǎng)基。24 h后加入含人重組IL-1、人重組IL-2等無(wú)血清生長(zhǎng)培養(yǎng)基。 每2~3 d更換培養(yǎng)基1次,補(bǔ)加IL-2。培養(yǎng)至第9天時(shí)加入DC細(xì)胞共同培養(yǎng)。第11天時(shí)進(jìn)行細(xì)菌、霉菌等微生物培養(yǎng)檢測(cè)。第14天時(shí)收集DC/CIK細(xì)胞,將收集培養(yǎng)的細(xì)胞用無(wú)菌生理鹽水洗滌3次,細(xì)胞分成6袋,每袋分別加入5%人血白蛋白配成150 mL含細(xì)胞的懸液進(jìn)行靜脈回輸。每天回輸1次,每次回輸細(xì)胞數(shù)量在1.5~2×109,連輸6次為1個(gè)療程,細(xì)胞總數(shù)在9~12×109之間。每個(gè)病人完成2個(gè)療程。
1.2.2 腎功能檢查 第1個(gè)療程DC/CIK細(xì)胞回輸之前,常規(guī)抽血做腎功能檢查。第2個(gè)療程DC/CIK細(xì)胞回輸之后,再抽血做腎功能檢查。依據(jù)前后2次腎功能檢查結(jié)果,進(jìn)行對(duì)比分析和評(píng)估。腎功能檢查項(xiàng)目為:尿素(正常值1.7~8.3 mmol/L)、肌酐(正常值 44~97 μmol/L)、尿酸(正常值 142~420 μmol/L)。
1.2.3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 腎功能檢查結(jié)果按WHO抗癌藥物毒性反應(yīng)分度標(biāo)準(zhǔn),進(jìn)行分級(jí)和評(píng)估。
152 例患者在接受DC/CIK細(xì)胞治療前,腎功能正常。在完成2個(gè)療程的DC/CIK細(xì)胞治療后,有12例出現(xiàn)腎功能異常,發(fā)生率為7.9%,如表1所示。
表1 腎臟毒性反應(yīng)
DC細(xì)胞是目前已知的功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞,具有極強(qiáng)的刺激活化初始T淋巴細(xì)胞能力,介導(dǎo)Thl型細(xì)胞免疫,從而發(fā)揮對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用[3-4]。CIK細(xì)胞是將人外周血單個(gè)核細(xì)胞在體外用多種細(xì)胞因子共同培養(yǎng)一段時(shí)間后獲得的一群異質(zhì)細(xì)胞[5],具有T淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗瘤活性和非主要組織相容性復(fù)合體(MHC)限制性殺瘤的特點(diǎn)[6-7]。DC/CIK細(xì)胞是與DC共培養(yǎng)的CIK細(xì)胞,具有增殖速度快、抗腫瘤作用強(qiáng)大、殺瘤譜廣、安全性較高的特性[8-9]。
腎臟的基本功能是排泄體內(nèi)的代謝廢物。隨著人口老化的加劇,腎臟急性損害的發(fā)生逐漸增多[10]。腎小球是腎臟的基本功能單位,具有濾過(guò)血漿形成原尿,輔助排泄代謝產(chǎn)物(例如含氮類廢物尿素、肌酸、肌酐、尿酸、各種胺類等)及維持體液酸堿平衡等作用,腎小球?yàn)V過(guò)功能是否正常對(duì)預(yù)防腎臟疾病至關(guān)重要[11]。
DC/CIK細(xì)胞治療腫瘤有一定療效,臨床應(yīng)用已有多年。然而,對(duì)其毒副作用的研究較少,如何確保臨床安全使用,還應(yīng)開展進(jìn)一步的研究工作。該研究發(fā)現(xiàn),單純使用DC/CIK細(xì)胞治療腫瘤,大約7.9%的患者發(fā)生急性腎功能損害,雖然絕大多數(shù)為I度損害,患者無(wú)明顯的臨床表現(xiàn),經(jīng)對(duì)癥處理后,本組也無(wú)一例發(fā)生腎功能衰竭。但是,如果不給予高度重視,不能早期發(fā)現(xiàn),早期處理,仍有可能導(dǎo)致嚴(yán)重后果。本組病例發(fā)生急性腎功能損害的原因比較復(fù)雜,可能與以下因素有關(guān):①本組病例均為晚期癌癥患者,一般狀況較差,每日進(jìn)食量和飲水相對(duì)較少。②年齡偏大,多數(shù)在60歲以上。③DC/CIK細(xì)胞輸入人體后,短時(shí)間內(nèi)大量殺傷腫瘤細(xì)胞,腫瘤細(xì)胞釋放大量核酸,導(dǎo)致高尿酸血癥。尿酸沉積于腎小管,引起急性腎功能損害[12]。④部分患者會(huì)出現(xiàn)癌性惡病質(zhì),其發(fā)生的重要機(jī)制之一就是蛋白質(zhì)代謝異常,主要表現(xiàn)為骨骼肌蛋白消耗增加、瘦組織群下降、內(nèi)臟蛋白消耗,導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成減少而分解增加,血清尿素、血肌酐升高,形成氮質(zhì)血癥,損害腎功能[13-14]。⑤DC/CIK細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí),需加入一定量的白細(xì)胞介素-2。文獻(xiàn)報(bào)道,白細(xì)胞介素-2可引起如少尿、低血壓、血肌酐升高等毒性反應(yīng)[15]。
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