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        芪珠升白口服液藥效學(xué)研究*

        2012-07-09 07:06:40范少敏宋小妹陜西中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院咸陽712000
        陜西中醫(yī) 2012年12期
        關(guān)鍵詞:環(huán)磷酰胺口服液小劑量

        郭 琳 張 旋 范少敏 王 薇 宋小妹▲ 陜西中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院(咸陽712000)

        芪珠升白口服液是陜西中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院多年臨床經(jīng)驗方,由珠子參、黃芪兩味中藥組成。芪珠升白口服液具有提高機體免疫力、升高白細胞數(shù)等作用,臨床用于化療產(chǎn)生的白細胞減少癥。本文對其主要藥效進行了研究,以期為臨床應(yīng)用和進一步開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

        1 材料與儀器 1.1 藥物 芪珠升白口服液,由陜西中醫(yī)學(xué)院中藥化學(xué)研究室提供;環(huán)磷酰胺(上海華聯(lián)制藥有限公司,批號:090907);印度墨汁。

        1.2 實驗動物 昆明種小鼠,雌雄各半,18~22g,第四軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供。

        1.3 儀器設(shè)備 KDM型調(diào)溫電熱套,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52(上海亞榮生化儀器廠),紫外分光光度計UV1102(上海天美科學(xué)儀器有限公司),儀表恒溫水浴鍋,530離心機,電子天平GB-204(瑞士)等。

        2 方法及結(jié)果 2.1 芪珠升白口服液對白細胞數(shù)和免疫器官的影響[1]取小鼠50只,隨機分成5個組,每組10只。即正常對照組、環(huán)磷酰胺組和口服液大劑量組(4.8g/kg)、口服液中劑量組(2.4g/kg)和口服液小劑量組(1.2g/kg),適應(yīng)環(huán)境3d。灌胃給予正常組和環(huán)磷酰胺組小鼠生理鹽水20mL/kg,實驗開始前3d除正常對照組外其他各組腹腔注射100mg/kg環(huán)磷酰胺,制造免疫低下模型。給藥組給予相應(yīng)劑量藥物,連續(xù)給藥7d。末次用藥24h后,采用眼眶摘眼球取血法,用血細胞計數(shù)板計數(shù)白細胞數(shù)。然后處死動物,剖取胸腺及脾臟,濾紙吸去表面殘血,立即于精密天平上稱其濕重,計算臟器重量指數(shù)。組間進行t檢驗分析,結(jié)果見表1。

        表1 芪珠升白口服液對白細胞數(shù)的影響±s)

        表1 芪珠升白口服液對白細胞數(shù)的影響±s)

        注:與模型組比較,△P<0.05;▲P<0.01

        胸腺指數(shù) 脾臟指數(shù)正常對照組 3.852±0.252▲ 5.824±1.390▲ 3.168±0.996組 別 劑量(g/kg) 白細胞數(shù)(109/L)△模型對照組 0.1 1.445±0.322 1.892±0.345 2.321±0.688口服液大劑量 4.8 2.947±0.859▲ 1.544±0.264△ 3.053±1.039△口服液中劑量 2.4 2.884±1.124▲ 1.780±0.432 3.721±1.398△口服液小劑量 1.2 2.075±0.793△1.950±0.561 3.011±1.122

        2.1.1 對白細胞數(shù)的影響:由表1的實驗結(jié)果可以看出:與正常對照組比較,環(huán)磷酰胺組的白細胞數(shù)顯著降低(P<0.01),有顯著性差異,說明用環(huán)磷酰胺造模成立;與環(huán)磷酰胺組比較,芪珠升白口服液小劑量組白細胞數(shù)顯著增加(P<0.05),有顯著性差異,大、中劑量有較強的顯著性差異(P<0.01),實驗結(jié)果說明芪珠升白口服液有較強的升高白細胞數(shù)的作用。

        2.1.2 對免疫器官的影響:由表1的實驗結(jié)果可以看出:與正常對照組比較,環(huán)磷酰胺組的脾臟指數(shù)顯著降低(P<0.05),有顯著性差異,說明用環(huán)磷酰胺造模使脾臟指數(shù)降低,芪珠升白口服液大、中劑量組脾臟指數(shù)顯著增加(P <0.05),與環(huán)磷酰胺組比較,有顯著性差異??诜捍髣┝啃叵僦笖?shù)與模型組比較有顯著性差異(P<0.05),實驗結(jié)果說明芪珠升白口服液可以改善免疫器官的免疫力。

        2.2 芪珠升白口服液碳粒廓清實驗的影響[2]取50只小鼠,隨機分成5組,即正常對照組、環(huán)磷酰胺組和口服液大劑量組(4.8g/kg)、口服液中劑量組(2.4g/kg)和口服液小劑量組(1.2g/kg),每組10只,適應(yīng)環(huán)境3d。灌胃給予正常組和環(huán)磷酰胺組小鼠生理鹽水20mL/kg,實驗開始前3d除正常對照組外,其他各組腹腔注射環(huán)磷酰胺100mg/kg,以制造免疫低下模型。給藥組給予相應(yīng)劑量藥物,連續(xù)給藥7d。末次給藥后,各鼠尾靜脈注入印度墨汁(以10倍生理鹽水稀釋)10mL/kg,于注射后1min和6min小鼠眼眶采血25μL,加入到2mL 0.1%Na2CO3溶液中搖勻,于分光光度計上600nm吸收波長處比色,計算吞噬指數(shù)和吞噬系數(shù)校正吞噬指數(shù)。測光密度值(OD);K=logOD1-logOD2/t2-t1;a=K1/3×體重/(肝重+脾重)。組間進行t檢驗分析,結(jié)果見表2。

        由表2的實驗結(jié)果可以看出:與正常對照組比較,環(huán)磷酰胺組的K、a顯著降低(P<0.05)有顯著性差異,說明用環(huán)磷酰胺造模成立;與環(huán)磷酰胺組比較,芪珠升白口服液中劑量組K、a的值顯著增加(P<0.05),實驗結(jié)果說明口服液中劑量組可以增加吞噬指數(shù)和吞噬系數(shù)校正吞噬指數(shù)。

        2.3 2,4-二硝基氟苯(DNFB)誘導(dǎo)遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)(DTH)[3]:取50只小鼠,隨即分成5組,即正常對照組、環(huán)磷酰胺組和口服液大劑量組(4.8g/kg)、口服液中劑量組(2.4g/kg)和口服液小劑量組(1.2g/kg),每組10只。適應(yīng)環(huán)境3d。灌胃給藥,正常組和環(huán)磷酰胺組給予生理鹽水20mL/kg,實驗開始前3d除正常對照組外其他各組腹腔注射100mg/kg環(huán)磷酰胺,制造免疫低下模型。給藥組給予相應(yīng)劑量藥物,連續(xù)給藥7d。給藥后第3d每鼠腹部剪毛(3cm×3cm),均勻涂抹1%DNFB 50μL致敏,藥后第5天再用1%DNFB 10μL攻擊右耳,24h后處死動物,用打孔器取下直徑8mm的耳片,稱重,以左右耳的重量之差(腫脹度)來表示DTH的程度。腫脹度=右耳片重量-左耳片重量。組間進行t檢驗分析,結(jié)果見表3。

        表3 2,4-二硝基氟苯誘導(dǎo)遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)±s)

        表3 2,4-二硝基氟苯誘導(dǎo)遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)±s)

        注:與模型組比較:△P<0.05;▲P<0.01。

        1.2 16.87±5.718組 別 劑量(g/kg)15.5±2.563模型對照組 0.1 22.37±7.269△口服液大劑量 4.8 14±3.380△口服液中劑量 2.4 15.62±4.373△口服液小劑量腫脹度正常對照組

        由表3的實驗結(jié)果可以看出:與正常對照組比較,環(huán)磷酰胺組的小鼠腫脹度顯著升高(P<0.05)有顯著性差異,說明用環(huán)磷酰胺造模成立;與環(huán)磷酰胺組比較,芪珠升白口服液中、大劑量組能顯著降低小鼠腫脹度,實驗結(jié)果說明口服液可改善DNFB誘導(dǎo)遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)。

        3 討 論 綜上實驗結(jié)果表明,芪珠升白口服液能較強的升高白細胞數(shù)、改善免疫器官的免疫力、可以增加吞噬指數(shù)和吞噬系數(shù)校正吞噬指數(shù)、可改善DNFB誘導(dǎo)遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng),表明芪珠升白口服液具有升高白細胞、增強免疫力的作用。這為臨床中應(yīng)用芪珠升白口服液治療化療引起的白細胞減少提供了科學(xué)依據(jù),對進一步深入探討芪珠升白口服液的作用機制奠定了良好的基礎(chǔ)。

        表2 芪珠升白口服液碳粒廓清實驗的影響±s)

        表2 芪珠升白口服液碳粒廓清實驗的影響±s)

        注:與模型組比較,△P<0.05;▲P<0.01。

        K a空白對照組 0.0494±0.010△ 5.744±1.143組 別 劑量(g/kg)△1.2 0.031±0.016 4.101±0.918正常對照組 0.1 0.028±0.018 4.102±0.996口服液大劑量 4.8 0.039±0.015 4.440±0.757口服液中劑量 2.4 0.059±0.017△ 5.581±0.985△口服液小劑量

        [1]李儀奎.中藥藥理實驗方法學(xué)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1991:157.

        [2]陳 奇.中藥藥理實驗方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1993:317.

        [3]徐叔云,卞如濂,陳 修.藥理實驗方法學(xué)[M].第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:1420.

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