段正贏,郭 銳,楊克禮,劉澤文,周丹娜,袁芳艷,梁望旺,田永祥*
(1.湖北省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所,湖北 武漢 430064;2.動物胚胎工程及分子育種湖北省重點實驗室,湖北 武漢 430064)
豬衣原體?。⊿wine chlamydiosis)主要是由豬衣原體(Chlamydia suis)感染豬引起的一種慢性接觸性傳染病,臨床表現(xiàn)妊娠母豬流產(chǎn)、早產(chǎn)和產(chǎn)弱仔;新生仔豬肺炎、腸炎、胸膜炎、心包炎、腦膜腦炎、多關(guān)節(jié)炎和結(jié)膜炎;種公豬睪丸炎等癥狀。常因菌株毒力,豬性別、年齡、生理狀況和環(huán)境的變化而出現(xiàn)不同的征候群。豬群一旦感染本病,要清除十分困難,康復豬群可長期帶菌,成為幼齡豬群的主要傳染源,豬場內(nèi)活動的野鼠和禽鳥可能是本病的自然散毒者。該病部分病例與豬偽狂犬病、豬乙型腦炎、豬瘟等病有相似癥狀,給診斷和防治增加了難度。豬衣原體引起的流產(chǎn)和仔豬衣原體性肺炎-腸炎對集約化養(yǎng)豬業(yè)危害相當嚴重[1]。衣原體病也是一種人畜共患傳染病,該病原體可以感染190多種鳥、幾十種哺乳動物及人,具有重要的公共衛(wèi)生學意義[2]。
2011年,湖北省A、B兩個豬場發(fā)生了以懷孕母豬流產(chǎn)、適繁母豬返情為特點的疾病,兩個豬場母豬群的數(shù)量分別為210頭 和80頭,均按本場的免疫程序?qū)δ肛i群接種過乙腦疫苗、豬瘟疫苗及豬偽狂犬病疫苗,未注射豬藍耳病疫苗、豬圓環(huán)病毒疫苗及衣原體疫苗。具體的發(fā)病情況見表1。經(jīng)臨床癥狀結(jié)合實驗室檢驗,診斷為衣原體病。
表1 豬場發(fā)病情況Table1 The incidence of pig fields
1.1.1 供試樣品 A場采集了21頭母豬的血樣及5頭流產(chǎn)胎兒,B場采集了5頭發(fā)病豬的血樣。
1.1.2 主要試劑 衣原體間接血凝試驗(IHA)[3]和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)為本單位自制;JEV ELISA抗體檢測試劑盒購自武漢科前公司;CSF ELISA抗體檢測試劑盒、PRVgB/gE鑒別ELISA抗體檢測試劑盒購自美國IDEXX公司;DNA、RNA提取試劑盒、Taq DNA聚合酶,均購自TAKARA公司;RNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒,購自Fermantas公司;引物均由上海生工生物工程技術(shù)服務有限公司合成。
衣原體、日本腦炎病毒(JEV)、豬瘟病毒(CSFV)、豬細小病毒(PRV)及豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)抗體及病原檢測根據(jù)目的不同分別應用IHA、ELISA、PCR及RT-PCR方法(表2),試驗方法均按試劑盒說明書及分子克隆實驗指南(第三版)[4]操作。
表2 抗體及病原檢測方法Table2 Detection methods of antibody and pathogen
由表3可知,CSFV 抗體、PRV-gB抗體、PRV-gE抗體、衣原體IHA抗體、衣原體ELISA抗體、JEV抗體陽性率分別為 88.5%(23/26)、80.8%(21/26)、0(0/26)、84.6%(22/26)、88.5%(23/26)、80.8%(21/26)。結(jié)果表明,豬群未免疫接種衣原體疫苗,檢測到抗體陽性樣品存在,說明豬群感染過衣原體。
由表4可知,CSFV、衣原體、PRRSV病原檢測陽性率分別為0(0/26)、69.2%(18/26)、0(0/26)。結(jié)果表明,衣原體PCR檢測有18份陽性,說明豬群存在衣原體病原。
表3 豬場抗體檢測結(jié)果Table3 Antibody test results in pig fields
表4 豬場病原檢測結(jié)果Table4 Pathogen test results in pig fields
實驗室檢測結(jié)果顯示,衣原體IHA抗體和ELISA抗體陽性份數(shù)為22份和23份,經(jīng)PCR檢測衣原體陽性份數(shù)為18份,A場的JEV抗體陽性率為33.3%,其他疾病經(jīng)抗體和病原檢測未見異常,結(jié)合臨床癥狀,診斷為豬衣原體感染。
針對兩個豬場的實際感染情況,經(jīng)采取綜合防控措施,疫情得到了有效控制。
加強消毒,隔離病豬,切斷傳播媒介。對發(fā)病豬做好隔離工作,避免病原傳染給健康豬只。做好豬場衛(wèi)生清潔工作,全場實行帶豬消毒。欄舍徹底清洗,用20g/L氫氧化鈉浸泡消毒。加強產(chǎn)房、場區(qū)環(huán)境消毒,以有效控制發(fā)生衣原體接觸傳染的機會。將流產(chǎn)胎兒及分娩排泄物集中無害化處理,保證產(chǎn)房衛(wèi)生,以防新生仔豬感染本病。做好滅鼠工作,同時要防止其他動物如貓、野狗、野鳥等攜帶衣原體病原侵入和感染豬群,達到切斷各種傳播媒介的目的。
建立衣原體疫苗免疫計劃,實施緊急免疫接種。全場緊急接種衣原體滅活苗。以后的衣原體滅活苗免疫接種計劃里,應對種公豬每年免疫接種2次,繁殖母豬群在每次配種前1個月或配種后1個月免疫接種一次。
加強藥物防治,細心護理病豬。選用四環(huán)素、強力霉素、土霉素等藥物對病豬進行治療,連用5d~7 d,要加強對病豬的護理。同時選用四環(huán)素、強力霉素、土霉素、紅霉素、金霉素等藥物混入飼料中,對豬群進行群體性防治。為防止出現(xiàn)抗藥性,要合理交替使用敏感藥物。對無治療價值的病豬應及時淘汰。
豬衣原體病引起的流產(chǎn),臨床上某些癥狀與豬偽狂犬病、豬藍耳病、豬乙型腦炎等相似,因此給臨床診斷增加了難度,只有結(jié)合實驗室檢驗方能確診。與以上幾種病毒病相比較,目前養(yǎng)豬生產(chǎn)上對衣原體病沒有足夠的認識和重視,疾病有可能得不到及時診斷和防治。
湖北省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所從20世紀80年代開始關(guān)注和研究豬衣原體病,楊宜生等[5]在國內(nèi)首先報道豬衣原體病,并研制豬衣原體疫苗。近些年來,從各省衣原體病的調(diào)查情況表明,豬衣原體病在我國的規(guī)模化豬場流行比較普遍,不同年齡、不同品種的豬群均可感染本病,尤其懷孕母豬和新生仔豬更為敏感。由于衣原體很難清除,感染場應將豬衣原體病納入常年免疫計劃,實施抗體監(jiān)測,這是預防本病的主要措施。但豬衣原體疫苗目前尚未廣泛應用,一方面可能因為該病未引起豬場足夠重視,認為危害不是很大;另一方面,從疫苗的研究現(xiàn)狀來看,衣原體需在雞胚卵黃囊或細胞上培養(yǎng),疫苗存在生產(chǎn)周期相對較長、大批量生產(chǎn)困難等等因素。由于衣原體所引起的傳染病是一種人畜共患病,因此豬場員工在免疫、消毒等具體操作時要做好個人防護工作,尤其是衣原體感染場應更加重視。
[1]邱昌慶,高雙娣,周繼章,等.豬衣原體病的調(diào)查[J].動物醫(yī)學進展,2003,24(2):88-91.
[2]謝 彬,馬 玲,黃紅梅,等.種豬衣原體與偽狂犬混合感染的診斷與防治[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2011(4):96-97.
[3]楊宜生,姜天童,孟慶友,等.間接血凝試驗檢測衣原體抗體的研究[J].畜牧獸醫(yī)學報,1984,15(3):181-187.
[4]趙德明,張中秋,沈建中,等.豬病學[M].9版.北京:中國農(nóng)業(yè)大學出版社,2008:332-333.
[5]楊宜生,姜天童,孟慶友,等.豬衣原體病的病原分離和鑒定[J].中國獸醫(yī)雜志,1984(9):4-6.