陳海龍，王金勝，陳思宇

（山西農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山西太谷 030801）

西瓜枯萎病是一種由尖孢鐮刀菌西瓜?；停‵usarium oxysporumf.sp.niveum）引起的維管束類土傳毀滅性病害，嚴(yán)重影響我國(guó)主要經(jīng)濟(jì)作物西瓜的種植[1-2]。目前，防治西瓜枯萎病的措施主要有輪作、嫁接、選育抗性品種以及近些年發(fā)展迅速的生物防治等；另外，還有農(nóng)藝措施：如結(jié)合地膜覆蓋，采用起壟栽培、淺水溝灌溉、土壤曝曬、太陽(yáng)能加熱、藥物熏蒸土壤等[3-5]。以上措施存在防治效果差、影響品質(zhì)和增加生產(chǎn)成本等諸多問題。而傳統(tǒng)的化學(xué)農(nóng)藥會(huì)給生態(tài)環(huán)境和人類健康帶來的危害越來越嚴(yán)重。因此，尋找有效的方法防治鐮刀菌引起的枯萎病是目前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)亟待解決的一個(gè)重要課題。

萬壽菊（Tagetes patula）屬菊科植物，作為觀賞植物在許多國(guó)家均有種植。萬壽菊花富含可食用黃色素，可用作食品和飼料添加劑[6]。山西農(nóng)業(yè)大學(xué)王金勝課題組曾報(bào)道過關(guān)于萬壽菊的根部提取物及其人工模擬合成的萬壽菊殺菌素制劑，其不但對(duì)西瓜枯萎病菌、黃瓜枯萎病菌、辣椒枯萎病菌、辣椒疫霉病菌、棉花炭疽病菌、小麥赤霉病菌、番茄早疫病菌等多種病菌有著非常明顯的抑制作用[7-9]，尤其對(duì)尖孢鐮刀菌屬效果更佳，還對(duì)西瓜幼苗有良好的誘導(dǎo)抗性提高的作用[10]。近期開發(fā)出萬壽菊殺菌素水乳劑，其抑菌試驗(yàn)表明，水乳劑劑型藥效良好。

本試驗(yàn)采用菌碟法抑菌和田間小區(qū)藥效統(tǒng)計(jì)，分別計(jì)算相對(duì)抑制率和防治效果，目的是為下一階段的大田推廣打好基礎(chǔ)，為西瓜枯萎病的防治提供新思路，而且對(duì)于生物源農(nóng)藥的實(shí)際應(yīng)用以及開發(fā)其他生物源農(nóng)藥的意義也非同一般。

1 材料和方法

1.1 供試材料

萬壽菊殺菌素水乳劑（山西農(nóng)業(yè)大學(xué)王金勝課題組研制）；多菌靈硫懸浮劑（山東省鄒平綠色農(nóng)藥研究所研制）；2%農(nóng)抗120水劑（廣東揭陽(yáng)化工有限公司生產(chǎn)）；西農(nóng)八號(hào)種子（楊凌農(nóng)科大農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司生產(chǎn)）；PDA固體培養(yǎng)基；106～107個(gè)/mL的尖孢鐮刀菌孢子懸浮液。

1.2 方法

1.2.1 抑菌試驗(yàn) 分別配置質(zhì)量濃度為0（CK），0.2（A），0.4（B），0.6（C），0.8（D），1.0（E）μg/mL 的含萬壽菊殺菌素的PDA培養(yǎng)基，接菌；于25℃恒溫培養(yǎng)；十字交叉法測(cè)量菌落直徑，重復(fù)3次，計(jì)算相對(duì)抑制率。

相對(duì)抑制率＝（對(duì)照菌落直徑－處理菌落直徑）/對(duì)照菌落直徑×100%。1.2.2 田間小區(qū)試驗(yàn)

1.2.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 無菌土室內(nèi)育苗，選取四葉期長(zhǎng)勢(shì)均勻幼苗，用106～107個(gè)/mL的尖孢鐮刀菌孢子懸浮液蘸根接菌移栽。試驗(yàn)施藥[11-12]處理分別為：對(duì)照組.無其他任何處理；處理1.2%農(nóng)抗120的水劑600倍液灌根；處理2.50%多菌靈硫懸浮劑按照1 200 g/hm2灌根；處理3.0.2 μg/mL萬壽菊殺菌素水乳劑灌根。每個(gè)處理3次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30株，4個(gè)處理共360株西瓜幼苗。接菌后10，20 d時(shí)施藥，共施藥2次。

1.2.2.2 調(diào)查方法 于接菌后30 d對(duì)藥效進(jìn)行調(diào)查。西瓜枯萎病嚴(yán)重度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如表1所示[11]。

病情指數(shù)=∑（各級(jí)發(fā)病數(shù)×各級(jí)代表值）/（調(diào)查總株數(shù)×最高級(jí)代表值）×100%；

防治效果=（對(duì)照病情指數(shù)－處理病情指數(shù)）/對(duì)照病情指數(shù)×100%。

表1 西瓜枯萎病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

2 結(jié)果與分析

2.1 抑菌試驗(yàn)結(jié)果

不同質(zhì)量濃度萬壽菊殺菌素水乳劑的抑菌試驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。

從圖1可以看出，萬壽菊殺菌素水乳劑對(duì)西瓜枯萎病具有很好的抑制作用。隨著PDA固體培養(yǎng)基中萬壽菊殺菌素水乳劑質(zhì)量濃度的增加，萬壽菊殺菌素水乳劑對(duì)尖孢鐮刀菌的抑制作用越來越強(qiáng)。當(dāng)萬壽菊殺菌素質(zhì)量濃度達(dá)到0.6 μg/mL時(shí)，菌落基本不長(zhǎng)；而達(dá)到0.8 μg/mL及更高質(zhì)量濃度時(shí)，菌落生長(zhǎng)完全得到抑制。

圖2為不同質(zhì)量濃度萬壽菊殺菌素240 h的抑菌效果。

從圖2的抑菌試驗(yàn)可以看出，萬壽菊殺菌素水乳劑的穩(wěn)定性非常好。

2.2 藥效試驗(yàn)結(jié)果

圖3為田間小區(qū)試驗(yàn)中第2次施藥30 d后的照片。從照片中可以直觀看到，萬壽菊殺菌素組（處理3）的長(zhǎng)勢(shì)明顯優(yōu)于其他2個(gè)傳統(tǒng)農(nóng)藥處理組。

接菌后30 d藥效調(diào)查的結(jié)果如表2所示。

表2 不同處理防治西瓜枯萎病的效果

從表2可以看出，與對(duì)照相比，處理1，2，3的病情指數(shù)都明顯降低，但防治效果卻逐漸增高，尤其是處理3，防治效果達(dá)79.5%，明顯高于處理1，2。田間小區(qū)藥效試驗(yàn)表明，萬壽菊殺菌素水乳劑對(duì)西瓜枯萎病的防治具有很好的藥效，優(yōu)于農(nóng)抗120、多菌靈等市售常用防治西瓜枯萎病的農(nóng)藥。

3 討論

生物農(nóng)藥包括生物體農(nóng)藥和生物化學(xué)農(nóng)藥[13]，因其高效、低毒、低殘留及與環(huán)境的和諧性受到社會(huì)的青睞[9]，近些年來也得到迅速發(fā)展。但是，大多數(shù)生物農(nóng)藥都存在活性成分含量和活性強(qiáng)度的不穩(wěn)定性、復(fù)雜性以及制劑加工的特殊性等缺點(diǎn)[14-15]。萬壽菊殺菌素屬于生物化學(xué)農(nóng)藥，它是在萬壽菊根粗提物的基礎(chǔ)上仿生合成。多年研究表明，萬壽菊殺菌素及其水乳劑能夠很好抑制西瓜枯萎病菌的生長(zhǎng)。另外，由于萬壽菊殺菌素制劑是人工模擬合成，其活性成分的穩(wěn)定性已經(jīng)得到很好的改良，再者其水乳劑劑型也開發(fā)成功，找到了良好的施藥劑型。適時(shí)、適量以及均勻周到地施藥，萬壽菊殺菌素水乳劑對(duì)西瓜“癌癥”——尖孢鐮刀菌引起的西瓜枯萎病具有比市售農(nóng)藥更明顯的藥效，這直接證實(shí)了萬壽菊殺菌素水乳劑的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，同時(shí)生物農(nóng)藥的發(fā)展也邁出了很好的一步。

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