趙時(shí)梅，羅 宇，任傳偉，史 琳

(柳州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校病理教研室，廣西柳州545006)

跨膜型黏蛋白1(MUC1)是一種人類腫瘤相關(guān)蛋白，定位于1q21［1］，除了肝細(xì)胞癌和腎上腺皮質(zhì)癌外，在很多腫瘤中均有表達(dá)［2］。MUC1表達(dá)水平的上調(diào)同部分腫瘤如乳腺癌［3］的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，但MUC1蛋白表達(dá)與Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系報(bào)道不多。2008年1月～2011年5月，我們采用免疫組化法檢測(cè)了子宮內(nèi)膜癌MUC1蛋白表達(dá)模式，并分析其表達(dá)與內(nèi)膜癌臨床病理參數(shù)的相關(guān)性，旨在為Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌的臨床診斷和治療在某些方面提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 選取柳州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校附屬醫(yī)院病理科2005年～2010年臨床資料完整的子宮內(nèi)膜病變標(biāo)本141份，其中Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌55份(內(nèi)膜癌組)，患者年齡29～67歲，中位年齡51歲;手術(shù)病理分期［國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)2000年標(biāo)準(zhǔn)］:Ⅰ期53例，Ⅱ期1例，Ⅲ期1例;病理分級(jí)G1級(jí)43例，G2級(jí)9例，G3級(jí)3例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移2例;肌層浸潤(rùn)≤1/2者51例，＞1/2者4例。單純性增生子宮內(nèi)膜標(biāo)本36份(單純組)、不典型增生內(nèi)膜組織50份(不典型組)，另選30份增生期子宮內(nèi)膜組織(增生組)作為對(duì)照。一抗MUC1(Ma695，1∶200)購自英國(guó)Novocastra公司，二抗及DAB試劑盒購自上?；蚩萍脊?。

1.2 檢測(cè)方法 所有標(biāo)本均經(jīng)10%甲醛固定、常規(guī)取材、脫水、石蠟包埋，制片、HE染色和免疫組化標(biāo)記(EnVision二步法)。按試劑盒說明進(jìn)行操作，采用pH 6.0檸檬酸鹽緩沖液高溫高壓修復(fù)抗原，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，蘇木精復(fù)染及中性樹膠封固。PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，用已知陽性片作為陽性對(duì)照。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn):參照文獻(xiàn)［4］顯微鏡下觀察，在良好的組織結(jié)構(gòu)及清晰的背景下細(xì)胞膜和(或)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色細(xì)顆粒為陽性細(xì)胞，陽性細(xì)胞數(shù)＜5%計(jì)為陰性(－)，5% ～20%計(jì)為低表達(dá)(+)，≥20%計(jì)為高表達(dá)(++)。表達(dá)于上皮細(xì)胞膜頂點(diǎn)和腺體腔源面為A模式，表達(dá)于整個(gè)細(xì)胞膜表面或細(xì)胞質(zhì)為A/C模式。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，進(jìn)行Kruskal wallis χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn) α =0.05。

2 結(jié)果

2.1 MUC1表達(dá) 各組MUC1蛋白表達(dá)及其表達(dá)模式見表1。MUC1蛋白在增生組和單純組主要表現(xiàn)為A模式，在不典型組和內(nèi)膜癌組表現(xiàn)為A/C模式，P 均 ＜0.01。見圖1～4。

表1 各組MUC1蛋白表達(dá)比較

2.2 相關(guān)性分析 與≥50歲者比較，年齡＜50歲者M(jìn)UC1蛋白主要表達(dá)為A模式(P=0.044)，與組織學(xué)分級(jí)無關(guān)(P=0.678)。隨肌層浸潤(rùn)深度增加、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移出現(xiàn)、病理分期提高，MUC1蛋白更多表達(dá)為A/C模式，但因?yàn)楸窘M樣本資料分布不均，未進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。詳見表2。

3 討論

MUC1是一類具有復(fù)雜糖基結(jié)構(gòu)的大分子糖蛋白，屬于Ⅰ型跨膜蛋白，由核心肽和糖鏈組成。核心肽由胞內(nèi)段、跨膜段和胞外段組成，胞內(nèi)段和跨膜段在不同種屬間的結(jié)構(gòu)高度保守;胞外段含有以20個(gè)氨基酸為單位的串聯(lián)重復(fù)序列，決定著MUC1的空間結(jié)構(gòu)特異性和免疫原性。MUC1在人體主要存在于上皮組織，除在細(xì)胞表面產(chǎn)生潤(rùn)滑作用、保護(hù)上皮細(xì)胞免受外界侵襲外，還具有調(diào)節(jié)細(xì)胞間相互作用、介導(dǎo)細(xì)胞間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)并參與機(jī)體免疫調(diào)節(jié)等功能。正常情況下，MUC1在多種組織、器官上皮細(xì)胞近管腔或腺腔面，呈頂端表達(dá)，極性分布;但病理狀態(tài)下，黏液素在正常組織中的表達(dá)模式會(huì)改變，包括表達(dá)量增加、減少及蛋白定位改變等。MUC1的改變與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，包括:①可誘導(dǎo)活化T細(xì)胞的凋亡，削弱宿主對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫抑制;②MUC1胞質(zhì)尾恒定序列發(fā)生磷酸化改變，可通過影響信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)而影響腫瘤的發(fā)生、發(fā)展;③充當(dāng)一種抗黏附分子，促進(jìn)腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移。本研究發(fā)現(xiàn)，MUC1在增生組主要表達(dá)在腺上皮的腔源面或表面，而在不典型組和內(nèi)膜癌組中MUC1主要表達(dá)在瘤細(xì)胞膜和(或)細(xì)胞質(zhì)中，失去極性特點(diǎn)。從增生期子宮內(nèi)膜→單純性增生宮內(nèi)膜→不典型增生宮內(nèi)膜→Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌，MUC1蛋白表達(dá)A/C模式逐漸增多，且表達(dá)信號(hào)增強(qiáng)。MUC1蛋白A/C模式在不典型組高于增生組、單純組;在內(nèi)膜癌組高于增生組及單純組，與不典型組相比無差異。表明Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌病變?cè)缙诩创嬖贛UC1蛋白表達(dá)，在促進(jìn)Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展過程中可能起一定作用，MUC1蛋白表達(dá)增強(qiáng)并呈現(xiàn)A/C模式可能是內(nèi)膜組織癌變進(jìn)程中的早期事件。

圖1 MUC1在增生組中的表達(dá)

圖2 MUC1在單純組中的表達(dá)

圖3 MUC1在不典型組中的表達(dá)

表2 MUC1表達(dá)與Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

圖4 MUC1在內(nèi)膜癌中的表達(dá)

腫瘤細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移是一個(gè)極其復(fù)雜的過程，涉及腫瘤細(xì)胞、宿主細(xì)胞及基質(zhì)間的相互作用。MUC1在腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移過程中充當(dāng)了一種抗腫瘤細(xì)胞黏附分子的作用。癌細(xì)胞表面高密度表達(dá)的MUC1絲狀分子，可阻礙膜表面固定配體與其受體的相互作用，降低胞外基質(zhì)內(nèi)整合素介導(dǎo)的細(xì)胞間相互作用，使腫瘤細(xì)胞易于侵襲和轉(zhuǎn)移［5］。然而在不同的腫瘤類型中，其作用不一。有報(bào)道，MUC1高表達(dá)與腎細(xì)胞癌分級(jí)、分期有關(guān)［6］。卵巢癌組織中MUC1表達(dá)隨組織惡性程度升高而升高，并與臨床分期及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)［7］;MUC1在胰腺癌、膽囊癌中MUC1 高表達(dá)［8，9］，與腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移呈正相關(guān);而在乳腺癌組織中，表達(dá)與其轉(zhuǎn)移及預(yù)后無關(guān)［3］。Sivridis等［10］研究發(fā)現(xiàn)，在子宮內(nèi)膜癌組織中MUC1胞質(zhì)表達(dá)者預(yù)后差，但也有學(xué)者認(rèn)為MUC1的表達(dá)與子宮內(nèi)膜樣腺癌分級(jí)、分期及患者預(yù)后無關(guān)［11］。分析本組資料，隨患者年齡增長(zhǎng)內(nèi)膜癌組織中MUC1蛋白更多地呈現(xiàn)A/C表達(dá)模式，提示MUC1蛋白表達(dá)可能與女性體內(nèi)激素變化存在一定關(guān)系;MUC1蛋白變化與組織學(xué)分級(jí)無關(guān)，提示MUC1蛋白的變化可能未參與內(nèi)膜癌的演進(jìn)。我們認(rèn)為，腫瘤的分化受多種基因的影響，而MUC1僅是其中一個(gè)因素，其異常表達(dá)不足以對(duì)腫瘤的分化程度產(chǎn)生決定性影響。

總之，在Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌中，MUC1表達(dá)狀況可反映腫瘤的某些生物學(xué)特性，可作為評(píng)價(jià)腫瘤病情發(fā)展的一個(gè)參考指標(biāo)。

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