宋根苗， 蔣家珍， 邱立紅

（農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥化學(xué)與應(yīng)用技術(shù)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院，北京 100193）

噻霉酮（benziothiazolinone，BIT），化學(xué)名稱1，2苯并異噻唑啉－3－酮，屬于有機(jī)雜環(huán)類噻唑啉酮?dú)⒕鷦?］，為國(guó)內(nèi)創(chuàng)制品種。研究表明噻霉酮對(duì)蘋果腐 爛 病 ［Valsaceratosperma （Tode et Fr.）Maire］［2］、柑橘潰瘍?。踃anthomonascitri（Hasse）Dowson］［3］、炭疽?。跜olletotrichumgloeosprioides（Peng）］［4］、番茄細(xì)菌性病害［5］有良好的防治效果。苯醚甲環(huán)唑（difenoconazole）屬三唑類殺菌劑，是甾醇脫甲基化抑制劑，廣譜、高效、持效期長(zhǎng)，具有良好的內(nèi)吸、熏蒸和鏟除作用，葉面處理或種子處理均具有很強(qiáng)的預(yù)防和治療作用［6］。

初步研究發(fā)現(xiàn)，噻霉酮與苯醚甲環(huán)唑混用能明顯提高其對(duì)蔬菜葉斑病的防治效果。為了進(jìn)一步研究開發(fā)噻霉酮與苯醚甲環(huán)唑的應(yīng)用潛力，提高其對(duì)不同病原菌的防治效果，筆者測(cè)定了這兩種藥劑混配對(duì)黃瓜菌核病菌等4種重要農(nóng)業(yè)病原菌的聯(lián)合毒力，旨在明確兩者不同比例混配對(duì)4種病原菌的增效作用，篩選出最佳配比，為兩種藥劑的實(shí)際混配應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

96%苯醚甲環(huán)唑（A）原藥（difenoconazole，TC），由北京東旺農(nóng)藥廠生產(chǎn)；80%噻霉酮（B）原藥（benziothiazolinone，TC），由上海農(nóng)藥研究所提供。

1.2 供試菌株

棉花立枯病菌（Rhizoctoniasolani）、黃瓜菌核病菌（Sclerotiniasclerotiorum）為筆者所在實(shí)驗(yàn)室保存菌株，番茄早疫病菌（Alternariasolani）和辣椒炭疽病菌（Colletotrichumcapsici）為中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)植保系劉西莉教授惠贈(zèng)。試驗(yàn)前，菌種移入PDA平板培養(yǎng)基中，置于25℃條件下培養(yǎng)48h，活化待用。

1.3 供試培養(yǎng)基

PDA培養(yǎng)基，參照方中達(dá)的方法配制［7］。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 單劑抑制作用測(cè)定

采用生長(zhǎng)速率法進(jìn)行測(cè)定［8］。在預(yù)備試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，將苯醚甲環(huán)唑和噻霉酮分別配成5～8個(gè)濃度梯度，向直徑為9cm的培養(yǎng)皿內(nèi)注入1mL不同濃度梯度的待測(cè)藥液，然后注入5mL（55～65℃）PDA培養(yǎng)基并搖勻，鋪成一均勻平面，以不含藥培養(yǎng)基為對(duì)照。每個(gè)處理3次重復(fù)。于培養(yǎng)基平面接種直徑為0.7cm的菌餅（有菌絲一面朝下），置于28℃條件下恒溫培養(yǎng)。待菌絲長(zhǎng)至5cm以上，用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，并計(jì)算生長(zhǎng)抑制率［9］，并利用Excel求出毒力回歸曲線、EC50值及相關(guān)系數(shù)R。

1.4.2 混劑聯(lián)合毒力測(cè)定

根據(jù)單劑毒力測(cè)定結(jié)果，以單劑苯醚甲環(huán)唑（A）和噻霉酮（B）的有效中濃度為基礎(chǔ)，按質(zhì)量配比1∶1，1∶2，1∶3，1∶4，1∶5，5∶1，1∶10，10∶1進(jìn)行藥劑配制，對(duì)各個(gè)配比的藥劑設(shè)定5～8個(gè)濃度梯度，按生長(zhǎng)速率法進(jìn)行測(cè)定［8］并求出毒力回歸曲線、EC50值及相關(guān)系數(shù)R。根據(jù)單劑和混劑的EC50值計(jì)算共毒系數(shù)（CTC），共毒系數(shù)明顯大于120表示增效作用；大于80但是小于120為相加作用；小于等于80為拮抗作用［10－13］。

2 結(jié)果與分析

2.1 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)S瓜菌核病菌的增效作用

由表1可知，苯醚甲環(huán)唑（A）和噻霉酮（B）對(duì)黃瓜菌核病菌的EC50分別是1.035 6mg／L和30.227 3mg／L。在藥劑混配中，當(dāng)A∶B＝1∶1時(shí)，共毒系數(shù)是89.29，表明兩種藥劑以1∶1混用時(shí)，對(duì)黃瓜菌核病菌為相加作用；但當(dāng)苯醚甲環(huán)唑和噻霉酮混配比例為1∶2，1∶3，1∶4，1∶5，5∶1，1∶10，10∶1時(shí)，共毒系數(shù)均大于120，表現(xiàn)出增效作用。尤其當(dāng)A∶B＝1∶10時(shí)，共毒系數(shù)最大，為519.11，表明苯醚甲環(huán)唑和噻霉酮以1∶10的比例混合使用時(shí)對(duì)黃瓜菌核病菌的增效作用最明顯。

表1 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)S瓜菌核病菌的增效作用測(cè)定結(jié)果

2.2 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)γ藁⒖莶【脑鲂ё饔?/h3>

由表2可知，苯醚甲環(huán)唑（A）和噻霉酮（B）對(duì)棉花立 枯 病 菌 的 EC50分 別 是1.211 2mg／L 和30.626 7mg／L。在藥劑混配中，當(dāng) A∶B＝1∶1時(shí)，共毒系數(shù)為109.37，表明兩種藥劑以1：1混用時(shí)，對(duì)棉花立枯病菌為相加作用；但當(dāng)苯醚甲環(huán)唑和噻霉酮混配比例為1∶2，1∶3，1∶4，1∶5，5∶1，1∶10，10∶1時(shí)，共毒系數(shù)均大于120，表現(xiàn)出增效作用。而當(dāng)A∶B＝1∶5時(shí)，共毒系數(shù)最大，為219.42，表明增效作用最明顯。

表2 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)γ藁⒖莶【脑鲂ё饔脺y(cè)定結(jié)果

2.3 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)Ψ言缫卟【脑鲂ё饔?/h3>

表3數(shù)據(jù)顯示，苯醚甲環(huán)唑（A）和噻霉酮（B）對(duì)番茄早疫病菌的EC50分別是0.650 9mg／L和20.887 0mg／L。在藥劑混配中，當(dāng) A∶B＝1∶3時(shí)，共毒系數(shù)為107.63，表明兩種藥劑以1∶3混用時(shí)，對(duì)番茄早疫病菌為相加作用；但當(dāng)苯醚甲環(huán)唑和噻霉酮配比為1∶1，1∶2，1∶4，1∶5，5∶1，1∶10時(shí)，共毒系數(shù)均大于120，均表現(xiàn)出增效作用。當(dāng)A∶B＝1∶5時(shí)，共毒系數(shù)最大，為190.71，表明增效作用明顯。

表3 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)Ψ言缫卟【脑鲂ё饔脺y(cè)定結(jié)果

2.4 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)苯诽烤也【脑鲂ё饔?/h3>

由表4可知，苯醚甲環(huán)唑（A）和噻霉酮（B）對(duì)辣椒炭 疽 病 菌 的 EC50分 別 是0.742 3mg／L 和43.514 6mg／L。在藥劑混配中，A∶B＝1∶3時(shí)共毒系數(shù)為91.39，表明兩種藥劑以1∶3混用時(shí)，對(duì)辣椒炭疽病菌為相加作用；但當(dāng)苯醚甲環(huán)唑和噻霉酮混配比例為1∶1，1∶2，1∶4，1∶5，5∶1，1∶10，10∶1時(shí)，共毒系數(shù)均大于120，表現(xiàn)出明顯的增效作用。當(dāng)A∶B＝1∶2時(shí)，共毒系數(shù)最大，為230.66，表明苯醚甲環(huán)唑和噻霉酮以1∶2混用時(shí)對(duì)辣椒炭疽病菌的增效作用最明顯。

表4 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)苯诽烤也【脑鲂ё饔脺y(cè)定結(jié)果

續(xù)表4

3 討論

大量研究表明，使用復(fù)配殺菌劑可以達(dá)到比殺菌劑單用更好的防治效果，可減少病原菌產(chǎn)生抗藥性的風(fēng)險(xiǎn)，還可以大大降低開發(fā)新型殺菌劑的難度［14－18］。目前有關(guān)苯醚甲環(huán)唑與其他殺菌劑的復(fù)配已有不少報(bào)道，如苯醚甲環(huán)唑和丙環(huán)唑復(fù)配對(duì)水稻紋枯?。≧hizoctoniasolaniKühn）增效［16］、苯醚甲環(huán)唑與嘧菌酯聯(lián)合使用可顯著提高其對(duì)馬鈴薯早疫病菌［Alternariasolani（Ellis et Martin）Jones et Grout］的防治效果［17］，多菌靈與苯醚甲環(huán)唑混用對(duì)葡萄褐斑?。≒seudocercosporavitis）［18］有明顯增效作用。但噻霉酮與其他殺菌劑聯(lián)合使用的研究報(bào)道則很少。

本研究結(jié)果表明，噻霉酮單獨(dú)使用對(duì)黃瓜菌核病菌、棉花立枯病菌、番茄早疫病菌和辣椒炭疽病菌的毒力比較低，但當(dāng)噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑按適當(dāng)比例混合使用后，毒力明顯增加，對(duì)上述4種不同病原菌均表現(xiàn)很好的增效作用。針對(duì)不同病原菌，藥劑混用的最佳配比不同。當(dāng)苯醚甲環(huán)唑∶噻霉酮＝1∶2時(shí)，兩者混用對(duì)辣椒炭疽病菌的增效作用最好；當(dāng)苯醚甲環(huán)唑∶噻霉酮＝1∶5時(shí)，兩者混用對(duì)棉花立枯病菌和番茄早疫病菌的增效作用最好；當(dāng)苯醚甲環(huán)唑∶噻霉酮＝1∶10時(shí)，兩者混用對(duì)黃瓜菌核病菌的增效作用最好。噻霉酮與苯醚甲環(huán)唑之間的增效作用，可能與兩者作用機(jī)理密切相關(guān)。據(jù)報(bào)道，噻霉酮主要破壞病菌細(xì)胞核結(jié)構(gòu)，干擾病菌細(xì)胞的新陳代謝，使其生理紊亂，最終導(dǎo)致死亡［19］。苯醚甲環(huán)唑則通過抑制病菌細(xì)胞麥角甾醇的生物合成而破壞細(xì)胞膜的正常功能，使病菌死亡［6］。兩者混合使用，可能增加了藥劑對(duì)病菌的作用位點(diǎn)和作用途徑，從而提高了對(duì)病菌的毒力。劉學(xué)敏和李立軍曾指出，不同殺菌劑混合后能否產(chǎn)生增效作用，取決于混劑中各個(gè)成分的比例及其作用方式和機(jī)制［20］，本研究進(jìn)一步證實(shí)了這一觀點(diǎn)。

噻霉酮與苯醚甲環(huán)唑復(fù)配使用，可明顯提高藥劑的毒力，從而可降低噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑的應(yīng)用成本，并有可能延緩病原菌抗藥性的發(fā)生，延長(zhǎng)噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑的使用壽命。但兩者復(fù)配后在田間對(duì)不同病害的實(shí)際防治效果如何，還有待進(jìn)一步深入研究。

［1］王鵬，宋迪生，梁永貞，等.噻霉酮水懸浮劑及其制備方法：中國(guó)，CN101695297A［P］.2010－04－21.

［2］史懷寶.1.6%噻霉酮懸浮劑防治蘋果樹腐爛病田間藥效試驗(yàn)［J］.山西果樹，2010（1）：44.

［3］姚廷山，周常勇，胡軍華，等.3種殺菌劑對(duì)柑桔潰瘍病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定［J］.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，31（6）：1026－1029.

［4］高強(qiáng).防治炭疽病噻霉酮成市場(chǎng)新寵［J］.農(nóng)藥市場(chǎng)信息，2010（10）：31.

［5］黃江濤，翁曉梅.金霉唑噻霉酮防治番茄細(xì)菌性病害試驗(yàn)［J］.西北園藝，2009（11）：46－47.

［6］孫娟.苯醚甲環(huán)唑的市場(chǎng)現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì)［J］.今日農(nóng)藥，2010（2）：44－45.

［7］方中達(dá).植病研究方法［M］.第3版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1989：46－56.

［8］李喜書，王莎菲，韓新才，等.氯胺磷與井岡霉素對(duì)水稻紋枯病菌的混配增效作用研究［J］.植物保護(hù)，2009，35（2）：155－157.

［9］畢秋艷.二元?dú)⒕鷦?fù)配增效機(jī)理初探［D］.保定：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010.

［10］駱焱平，鄭服叢.農(nóng)藥學(xué)科群實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)［M］.?？冢汉Ｄ铣霭嫔纾?008.

［11］趙善歡.植物化學(xué)保護(hù)［M］.第3版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2005.

［12］彭好翌，高必達(dá).常用殺菌劑及其組合劑對(duì)辣椒炭疽病菌的抑制效果［J］.湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（9）：83－85.

［13］農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所.NY／T 1156.6－2006.殺菌劑室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則殺菌劑第6部分：混配的聯(lián)合作用測(cè)定［S］.北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2006.

［14］梁偉伶，臺(tái)蓮梅，靳學(xué)慧，等.馬鈴薯早疫病菌室內(nèi)殺菌劑篩選及配比試驗(yàn)［J］.植物保護(hù)，2009，35（4）：168－171.

［15］畢秋艷，馬志強(qiáng)，張小風(fēng)，等.多菌靈／戊唑醇復(fù)配對(duì)小麥赤霉病菌抗藥性菌株的活性增效作用［J］.植物保護(hù)，2010，36（2）：119－122.

［16］朱衛(wèi)剛，胡偉群，陳定花，等.丙環(huán)唑和苯醚甲環(huán)唑復(fù)配對(duì)水稻紋枯病的聯(lián)合毒力［J］.農(nóng)藥，2008，47（5）：365－366.

［17］范子耀，王文橋，孟潤(rùn)杰，等.7種殺菌劑對(duì)馬鈴薯早疫病菌室內(nèi)毒力及田間防效［J］.農(nóng)藥，2011，50（7）：531－533.

［18］梁春浩，劉長(zhǎng)遠(yuǎn)，苗則彥，等.幾種殺菌劑及混劑對(duì)葡萄褐斑病的生物活性測(cè)定［J］.農(nóng)藥，2009，48（1）：66－68.

［19］西大華特.噻霉酮介紹［EB／OL］http：∥www.htteam.com／smt.asp

［20］劉學(xué)敏，李立軍.殺菌劑混劑的增效作用［J］.農(nóng)藥科學(xué)與管理，2002，23（5）：12－15.