黎璐平，楊 微，夏旭英，陳雅芬，劉永瓊

(武漢工程大學(xué)環(huán)境與化工清潔生產(chǎn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，綠色化工過(guò)程省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430074)

0 引 言

維生素E(Vitamin E, 簡(jiǎn)稱(chēng)VE)，又稱(chēng)生育酚，可增加細(xì)胞的抗氧化作用，維持和促進(jìn)生殖機(jī)能.其具有一定的抗老化作用，還能改善脂質(zhì)代謝，防止動(dòng)脈硬化，降低血脂.臨床用于預(yù)防習(xí)慣性流產(chǎn)和先兆性流產(chǎn)，以及更年期綜合癥的治療[1].中國(guó)藥典2010版二部收錄的VE制劑品種有片劑、軟膠囊劑、粉劑和注射劑.

VE難溶于水，制成口服油溶液制劑，易被氧化而失效；制備成固體制劑(片劑、粉劑)，生物利用度低.近年來(lái)，相繼有學(xué)者將脂溶性VE藥物制成納米乳劑和脂質(zhì)體新的給藥載體[2-3].納米乳劑一般是液體制劑形式，或通過(guò)封裝在軟膠囊成固體制劑，但前者不穩(wěn)定，后者生產(chǎn)過(guò)程復(fù)雜、制劑成分與膠囊殼的相容性、長(zhǎng)期儲(chǔ)存中可能發(fā)生膠囊泄露等缺點(diǎn)[4-5]；脂質(zhì)體穩(wěn)定性差、輔料成本高[6].為克服這些缺點(diǎn)，國(guó)內(nèi)外有文獻(xiàn)報(bào)道：將某些自乳化輔料成分用到固體分散體載體材料中,以增強(qiáng)固體分散體載體對(duì)難溶性藥物的增溶能力,提高自乳化制劑的穩(wěn)定性，所制成的制劑被稱(chēng)為自乳化固體分散體 (SESD)[7-9].本研究擬以VE為模型藥物，將自乳化技術(shù)和固體分散體技術(shù)聯(lián)用，制備維生素E自乳化固體分散體(VE-SEDS)，以提高維生素E的溶出度,改善其生物利用度.

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 藥品與儀器

維生素E(含量99.10%,HPLC，威仕生物科技有限公司)；吐溫80(分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；油酸乙酯(分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；丙三醇(分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；載體A (分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；無(wú)水乙醇(分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)，正己烷(分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；正三十二烷(色譜純，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98%，GC，百靈威科技有限公司).

AB204-N型電子分析天平(Mettler-Toledo公司)；UV-VIS8500型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海天美科學(xué)儀器有限公司); 9700氣相色譜儀(浙江溫嶺福立分析儀器有限公司)；Nicomp380動(dòng)態(tài)光散射儀/電位儀(Partical Sizing System公司)； RCZ-6B1型藥物溶出儀(上海黃海藥檢儀器有限公司); SZ-93自動(dòng)雙重純水蒸餾器(上海亞榮生化儀器廠) .

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 維生素E自乳化固體分散體(VE-SEDS)的制備 通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇吐溫80，油酸乙酯和丙三醇為自乳化輔料，并得到VE自乳化制劑的比例是VE：油酸乙酯：吐溫80：丙三醇=3.5∶1∶6.2∶1(w/w/w/w).

按處方(表1)準(zhǔn)確稱(chēng)取VE自乳化制劑和水溶性載體A，先將相應(yīng)量的載體A在(72±0)℃水浴中加熱熔融，再加入VE自乳化劑，攪拌使其充分分散在載體中，迅速放入冰水中，攪拌至固化，低溫干燥，粉碎，過(guò)孔徑為0.250 mm篩，得VE-SEDS保存?zhèn)溆?

1.2.2 維生素E含量測(cè)定 色譜條件：色譜柱為SGE-AC1柱(100 %二甲基聚硅氧烷)；柱溫為280 ℃；FID檢測(cè)器溫度為300 ℃，進(jìn)樣溫度為290 ℃，進(jìn)樣量為1 μL.理論塔板數(shù)按維生素E峰計(jì)算不低于5 000(毛細(xì)管柱)，維生素E峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)(正三十二烷)峰的分離度符合要求[10].

含量測(cè)定[10]：取“1.2.1”項(xiàng)下制備的VE-SEDS適量(相當(dāng)于VE20 mg)，置棕色具塞錐形瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)液10 mL，震搖使溶解，取上清液1 μL注入氣相色譜儀分析，記錄色譜圖.

干擾實(shí)驗(yàn)：稱(chēng)取自乳化輔料和載體A，按“1.2.1”項(xiàng)下制備不含VE的陰性樣品，按“1.2.2” 項(xiàng)下VE含量測(cè)定的方法，用氣相色譜儀分析，記錄色譜圖.

1.2.3 溶出度 按《中國(guó)藥典》2010版附錄XC中籃法規(guī)定進(jìn)行，轉(zhuǎn)速100 r/min，水浴溫度(37±0.5) ℃ ，溶出介質(zhì)1 000 mL人工腸液.精密稱(chēng)取“1.2.1”項(xiàng)下制備的VE-SEDS (3號(hào)樣品)適量(相當(dāng)于VE20 mg)，分別于5，10，15，20，25，35，45 min取樣5 mL，0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾，同時(shí)補(bǔ)充同溫度5 mL的溶出介質(zhì)，取續(xù)濾液按“1.2.2”項(xiàng)方法進(jìn)行測(cè)定.結(jié)果代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度，并換算成累積溶出百分率，并以累積溶出百分率(%)為縱軸，溶出時(shí)間(t)為橫軸，繪圖.

1.2.4 維生素E自乳化固體分散體的驗(yàn)證 稱(chēng)取“1.2.1”項(xiàng)下制備的VE-SEDS (3號(hào)樣品)和維生素E適量，分別溶于100 mL無(wú)水乙醇中，采用紫外分光光度法進(jìn)行紫外全波長(zhǎng)掃描，檢驗(yàn)所制備的固體分散體.

1.2.5 維生素E自乳化固體分散體的質(zhì)量考察 取“1.2.1”項(xiàng)下制備的VE-SEDS(3號(hào)樣品)0.1 g，加入到25 ℃90 mL的蒸餾水中，輕輕振搖下自乳化，采用動(dòng)態(tài)光散射儀測(cè)定自乳化后溶液的粒徑.

2 結(jié)果與討論

2.1 維生素E自乳化固體分散體的制備

VE自乳化固體分散體(VE-SEDS)的不同處方見(jiàn)表1所示.

稱(chēng)取“1.2.1”項(xiàng)下制備的VE-SEDS適量，以外觀和在水中的乳化情況為指標(biāo)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，其結(jié)果如表1所示.

由表1可知，當(dāng)VE自乳化制劑∶載體A(w/w)=1∶8時(shí)，所制備的VE固體制劑的外觀較好，且有較好的乳化效果.

表1 VE自乳化固體分散體制備的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

注：A 優(yōu)，澄清透明無(wú)色無(wú)油狀物;B良，澄清透明略微戴白色無(wú)油狀物；C中，半澄清透明白色；D差，不澄清透明乳白色.

2.2 維生素E含量測(cè)定

通過(guò)氣相色譜儀分析，得到VE在1～5 mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，日內(nèi)精密度 RSD(n=7)=1.35%.

VE，輔料和自乳化固體分散體的氣相色譜圖分別見(jiàn)圖1、圖2和圖3(1-VE，2-正三十二烷(內(nèi)標(biāo)物)).由圖可知，VE的保留時(shí)間8.57 min，由干擾實(shí)驗(yàn)知，其他所有輔料對(duì)藥物無(wú)干擾.

圖1 維生素E氣相色譜圖Fig.1 Gas chromatogram of VE

圖2 輔料氣相色譜圖Fig.2 Gas chromatogram of auxiliary

圖3 維生素E自乳化固體分散體Fig.3 Gas chromatogram of VE-SEDS

2.3 溶出度

VE自乳化固體分散體與VE平均累積溶出率與時(shí)間的關(guān)系如圖4所示，由圖可知，VE在人工腸液中幾乎不溶，制成自乳化固體分散體后，其溶解性顯著提高，累計(jì)溶出百分率在5 min時(shí)達(dá)64.7%、20 min達(dá)91.1 %，溶出明顯優(yōu)于VE.

圖4 平均累積溶出率與時(shí)間的關(guān)系(1- VE-SEDS 2-VE)Fig.4 The relationship of average-accumulated dissolution rate and time(1-VE-SEDS 2-VE )

2.4 維生素E自乳化固體分散體的驗(yàn)證

VE和VE自乳化固體分散體的紫外吸收?qǐng)D譜分別見(jiàn)圖5和圖6所示.由圖可知，兩者均在215和276 nm處有最大吸收，且二者的紫外吸收曲線的形狀沒(méi)有發(fā)生變化，說(shuō)明制備的VE自乳化固體分散體并未改變VE的性質(zhì).

圖5 維生素E紫外吸收光譜圖Fig.5 UV absorption spectra of VE

2.5 維生素E自乳化固體分散體的質(zhì)量考察

制得的VE自乳化固體分散體的粒徑分布圖見(jiàn)圖7所示.由圖可知，制得的VE自乳化固體分散體的粒徑在21.4～54.5 nm之間，平均粒徑為44.9 nm，完全符合自微乳的要求，說(shuō)明制成固體分散體并未改變其自微乳的特質(zhì).

圖6 維生素E自乳化固體分散體紫外吸收光譜圖Fig.6 UV absorption spectra of VE-SEDS

圖7 維生素E自乳化固體分散體nicomp粒徑分布圖Fig.7 Distribution of nicomp particle size of VE-SEDS

3 結(jié) 語(yǔ)

a． 選用水溶性載體A為固體載體，以熔融法制備VE自乳化固體分散體.當(dāng)VE自乳化制劑∶載體A(w/w)=1∶8時(shí)，制備的固體分散體外觀較好，且有較好的乳化效果.

b． 用氣相色譜儀進(jìn)行分析，VE在1～5 mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，日內(nèi)精密度RSD=1.35%(n=7).

c． 維生素E在人工腸液中幾乎不溶，制成自乳化固體分散體后，其溶解性顯著提高，累計(jì)溶出百分率在5 min時(shí)達(dá)64.7% 、20 min達(dá)91.1 %，溶出明顯優(yōu)于VE.

d． 制得的VE自乳化固體分散體，平均粒徑為44.9 nm，粒徑符合自微乳的要求.

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