姜彥超，蘇建通，董 穎，胡紅霞

(1．大連海洋大學(xué)，遼寧 大連 116023;2．北京市水產(chǎn)科學(xué)研究所，北京 100086)

鱘形目Acipenseriformes是一種很古老的軟骨硬鱗魚類，在魚類乃至整個(gè)脊椎動(dòng)物進(jìn)化史上占有著很重要的地位，素有“活化石”之稱[1]。世界上現(xiàn)存的鱘形目魚類約27種，其中絕大部分為河海洄游性魚類[2]。鱘魚因其魚籽醬的高價(jià)值而成為一種重要的世界性經(jīng)濟(jì)魚類,由于過度捕撈、鱘魚產(chǎn)卵場(chǎng)所和棲息地的破壞以及環(huán)境污染等原因的影響，導(dǎo)致世界鱘魚資源總量急劇下降，許多種類瀕臨滅絕[3]。因此采用人工養(yǎng)殖和繁殖鱘魚的方法，可以大大減輕對(duì)野生資源依賴的壓力，非常有利于資源的恢復(fù)。隨著鱘魚養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，生產(chǎn)目標(biāo)已經(jīng)由鱘魚產(chǎn)量向鱘魚最有價(jià)值的產(chǎn)品——魚籽醬方向轉(zhuǎn)化，因此，生產(chǎn)和培育全雌化的苗種就成為鱘魚產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的研究重點(diǎn),全雌鱘魚的養(yǎng)殖也具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

人工誘導(dǎo)魚類雌核發(fā)育就是用遺傳失活的精子激活卵子后，再通過抑制受精卵的極體排出或第一次卵裂而發(fā)育成子代的一種特殊的有性生殖方式。雌核發(fā)育技術(shù)已被成功應(yīng)用于青鳉[4]、斑馬魚[5]、牙鲆[6]、鯉魚[7]等魚類的遺傳育種研究中。但是傳統(tǒng)的魚類雌核發(fā)育子代純合度都依賴于表型、染色體技術(shù)等去鑒定。盡管所得雌核發(fā)育子代可證明是由雌核發(fā)育所獲得，但無(wú)法確定所獲雌核發(fā)育子代是否存在基因重組現(xiàn)象，也無(wú)法證明其在基因座位 (特別是與經(jīng)濟(jì)性狀相關(guān)的基因座位) 上表現(xiàn)為純合子還是雜合子。因此還應(yīng)利用微衛(wèi)星等分子標(biāo)記對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步分析。

微衛(wèi)星 (Microsatellites) ,又稱簡(jiǎn)單序列重復(fù)(Simple sequence repeats,SSRs) 、 短串聯(lián)重復(fù) (Short tandem repeats,STRs) 、 簡(jiǎn)單序列長(zhǎng)度多態(tài)性(Simple sequence length polymorphism,SSLP) ,是指以少數(shù)幾個(gè)核苷酸(一般為 1～6 個(gè))為重復(fù)單位組成簡(jiǎn)單的串聯(lián)重復(fù)序列 ,由于重復(fù)的次數(shù)不同以及重復(fù)的程度不一致而造成這些序列的多態(tài)性[8]。1992年Goff等[9]首次從斑馬魚基因組中篩選出微衛(wèi)星標(biāo)記序列，此后微衛(wèi)星標(biāo)記便成為生物標(biāo)記領(lǐng)域中極為重要的一員。目前已經(jīng)在斑馬魚Daniorerio[10]、尼羅羅非魚Oreochromisnilotica[11]、鮭科魚類(大西洋鮭Salmosalar，紅點(diǎn)斑Salvelinusalpinus，虹鱒Oncorhynchusmykiss)[12,13 14 ]以及鱘形目魚類(密西西比鏟鱘Scaphirhynchusplatorynchus，高首鱘Acipensertransmontanus和太平洋鱘A.medirostris)[17-18 ]等多種魚類中獲得了微衛(wèi)星標(biāo)記序列。因微衛(wèi)星標(biāo)記可提供高多態(tài)性高分辨率的遺傳信息[21-22 ]，且通用性好、呈孟德爾方式遺傳、屬于共顯性的標(biāo)記，具有明顯優(yōu)于其他分子標(biāo)記的優(yōu)勢(shì)[23]，所以已被廣泛應(yīng)用于魚類遺傳育種研究的各個(gè)方面，包括種群遺傳結(jié)構(gòu)分析、親子鑒定與個(gè)體識(shí)別、遺傳作圖等，取得了較大的進(jìn)展。

本研究以冷休克和熱休克法誘導(dǎo)俄羅斯鱘雌核發(fā)育，在對(duì)其后代進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步利用微衛(wèi)星標(biāo)記區(qū)分其中的雌核發(fā)育后代、單倍體后代和雜交后代,并計(jì)算出雌核發(fā)育后代的重組率，證明了微衛(wèi)星DNA分子標(biāo)記是可以用來(lái)進(jìn)行雌核發(fā)育后代分析的，特別是在常規(guī)方法難以分辨的單倍體后代鑒別以及雌核發(fā)育后代重組率計(jì)算方面具有突出的優(yōu)點(diǎn)。為探討和完善俄羅斯鱘人工雌核發(fā)育的誘導(dǎo)方法和分子鑒定方法的研究，更好地利用雌核發(fā)育技術(shù)于俄羅斯鱘育種提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

俄羅斯鱘雌核發(fā)育誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)于2010年5月在北京鱘魚良種場(chǎng)(北京十渡名優(yōu)魚類繁育基地)進(jìn)行，采用30 cm(20 cm(30 cm的玻璃鋼桶進(jìn)行孵化和魚苗飼養(yǎng)。

1.2 雌核發(fā)育誘導(dǎo)

1.2.1 親本選擇 從北京鱘魚良種場(chǎng)養(yǎng)殖的繁殖種群中選取體質(zhì)健壯且性成熟的雄性達(dá)氏鰉Husodauricus和雌性俄羅斯鱘Acipensergueldenstaedtii各一尾分別作為父母本，進(jìn)行催產(chǎn)，分別獲得相應(yīng)的精子和成熟的卵。

1.2.2 精子的處理 將收集的精液放在顯微鏡下觀察精子活力，選取活力良好的精液放于4℃待用。取少量精液，用Hank’s液(氯化鈉8 g，氯化鉀400 mg，碳酸氫鈉350 mg，七水磷酸氫二鈉90 mg，十二水磷酸氫二鈉100 mg，無(wú)水磷酸二氫鉀60 mg，葡萄糖1 g，七水硫酸鎂100 mg，六水氯化鎂100 mg，氯化鈣140 mg，蒸餾水加至1 000 mL，用5.6％碳酸氫鉀調(diào)pH至7.5)按5∶19的比例進(jìn)行稀釋后置于玻璃培養(yǎng)皿中，將培養(yǎng)皿放在紫外線照射裝置的水平搖床上，搖床振動(dòng)頻率為60次/min，輕輕振蕩以使精子均勻分散。用紫外燈照射精液，從2 min 30 s開始鏡檢觀察精子活力，直到約80％精子停止活動(dòng)，確定照射時(shí)間，收集滅活精液待用做人工授精。

1.2.3 受精卵的獲得和處理 使用滅活的精液與成熟的卵進(jìn)行干法授精，待受精3 min后用滑石粉脫粘，將脫粘后的受精卵平鋪于玻璃培養(yǎng)皿上，分別進(jìn)行冷休克或熱休克處理后，放入孵化器中使用17 ℃左右的池水進(jìn)行孵化。

1.2.4 雌核發(fā)育誘導(dǎo) 冷休克誘導(dǎo)：在人工授精10 min后立即將受精卵放置于4 ℃冰箱中，進(jìn)行40 min冷休克誘導(dǎo)，然后放回17 ℃水中繼續(xù)進(jìn)行孵化，編號(hào)為M1。熱休克誘導(dǎo)：在人工授精18 min后立即將受精卵放入37 ℃水中，進(jìn)行熱休克處理2 min，然后放回17 ℃水中繼續(xù)進(jìn)行孵化，編號(hào)為M2。對(duì)照組人工授精：將余下的少部分卵與未經(jīng)紫外線照射的精液混合，正常受精后移入到17 ℃池水中孵化，編號(hào)為G1。

1.3 微衛(wèi)星分析

1.3.1 取樣 催產(chǎn)成功后分別剪取各親魚鰭條保存于φ=95％的乙醇中。子代樣本于孵化后第2天開始從各組中進(jìn)行采樣，冷休克組收集個(gè)體20尾、熱休克組收集40尾、對(duì)照組收集20尾，分別保存于φ=95％的乙醇中，帶回實(shí)驗(yàn)室。

1.3.2 基因組DNA的提取 剪取保存在乙醇中的親魚鰭條及其后代魚苗肌肉組織大約0.2 g，分別加入400 μL裂解液，55 ℃消化過夜，待組織完全消化后取出，用酚(氯仿(異戊醇(體積比為25∶24∶1)法提取DNA。為了確保DNA樣品的質(zhì)量，對(duì)提取的DNA樣品進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)和紫外分光光度計(jì)A260測(cè)定。將DNA質(zhì)量濃度調(diào)至20 ng(μL,并保存于-20 ℃冰箱中備用。

1.3.3 PCR反應(yīng) 本實(shí)驗(yàn)中使用的微衛(wèi)星引物來(lái)自董穎等(未發(fā)表數(shù)據(jù))開發(fā)的5種鱘魚跨種擴(kuò)增熒光微衛(wèi)星引物。PCR擴(kuò)增反應(yīng)總體積為10 μL，其中包括DNA模板0.5 μL(20 ng(μL)，10(PCR buffer 1 μL,25 mmol/L MgCl20.25 μL,2.5 mmol/L dNTP 0.8 μL，5 mmol/L正反向熒光引物各0.3 μL，5 U/μL Taq酶(TAKARA)0.05 μL，雙蒸水7.05 μL。PCR反應(yīng)程序：94 ℃預(yù)變性3 min；94 ℃變性30 s,50～61 ℃退火30 s,72 ℃延伸30 s,41個(gè)循環(huán)；72 ℃充分延伸10 min。微衛(wèi)星引物序列及具體退火溫度情況見表1。擴(kuò)增產(chǎn)物用w=1.0％的瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行分離，GelRed染色后用BIORAD凝膠成成像儀進(jìn)行定性分析。

表1 微衛(wèi)星引物序列及特異退火溫度

1.3.4 基因型分析 使用ABI PRISM 3100 型遺傳分析儀(applied biosystems) 對(duì)擴(kuò)增片斷進(jìn)行測(cè)定,并用GeneMapper3.0 軟件(applied biosystems) 對(duì)基因型進(jìn)行判讀。

1.3.5 數(shù)據(jù)分析 根據(jù)所得到的基因型數(shù)據(jù)，利用SPAGeDi軟件[24]計(jì)算微衛(wèi)星基因座的等位基因數(shù)、(Number of alleles，A)、等位基因頻率(Allele Frequency，P)、期望雜合度(Expected Heterozygosity，He)。并分別根據(jù)父本基因型和母本基因型分辨子代中的雜交后代、單倍體后代和雌核發(fā)育后代。

2 結(jié) 果

2.1 精子的最佳照射時(shí)間

對(duì)照組卵(俄羅斯鱘與達(dá)氏鰉雜交)的受精率與孵化率分別為95.3％和76.5％，說明俄羅斯鱘卵質(zhì)量良好。用Hank’s液稀釋精液(19∶5)并放在紫外燈下照射，采用鏡檢的方法觀察精子的活動(dòng)狀態(tài)，照射2 min 30 s時(shí)發(fā)現(xiàn)絕大部分精子仍在活動(dòng)；照射3 min時(shí)發(fā)現(xiàn)約20％精子仍在活動(dòng)，但其余大部分精子不活動(dòng)；照射3 min 30 s時(shí)發(fā)現(xiàn)幾乎所有的精子都已經(jīng)停止活動(dòng)了。因此認(rèn)為3 min的紫外線照射為最佳的照射時(shí)間，此時(shí)的精子絕大部分處于遺傳失活的狀態(tài)。

2.2 雌核發(fā)育誘導(dǎo)結(jié)果

將成活的魚苗飼養(yǎng)至可以清楚觀察其外形特征時(shí)，通過形態(tài)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)在冷休克組和熱休克組中都即存在外形符合俄羅斯鱘(達(dá)氏鰉雜交后代特征的雜交鱘，也存在與純種俄羅斯鱘特征相吻合的雌核發(fā)育誘導(dǎo)后代[25]。

2.3 微衛(wèi)星檢測(cè)結(jié)果

選用6對(duì)具有高多態(tài)性的微衛(wèi)星標(biāo)記，分別對(duì)父母本親魚及其經(jīng)過雌核發(fā)育誘導(dǎo)產(chǎn)生的后代(冷休克組20尾，熱休克組40尾)進(jìn)行擴(kuò)增，結(jié)果6對(duì)引物均可擴(kuò)增出清晰的條帶，擴(kuò)增片段大小在116～414 bp。

2.4 遺傳變異分析

遺傳雜合度(H)又稱基因多樣度，是指所檢測(cè)到的微衛(wèi)星位點(diǎn)上雜合子基因型占該位點(diǎn)所有基因型的比例。從表2的結(jié)果可以看出，所檢測(cè)的等位基因座位有4～9個(gè)等位基因，各基因座位的等位基因頻率由0.006～0.774不等；其中熱休克雌核發(fā)育組的等位基因頻率為0.006～0.774，期望雜合度的平均值為0.6873，平均多態(tài)信息含量為0.610 7，平均等位基因數(shù)5.5；冷休克雌核發(fā)育組的等位基因頻率為0.001～0.708，期望雜合度平均值為0.590 6，平均多態(tài)信息含量為0.6754，平均等位基因數(shù)為6.0。Boestein等[26]認(rèn)為當(dāng)PIC>0.5時(shí)該位點(diǎn)表現(xiàn)為高度多態(tài)，當(dāng)0.25

表2 俄羅斯鱘2個(gè)雌核發(fā)育群體6個(gè)座點(diǎn)的等位基因數(shù)、雜合度和多態(tài)信息含量

從圖1中可以看出，在微衛(wèi)星位點(diǎn)Afu54，母本(a)存在4個(gè)不同大小的等位基因，父本(b)為純合體，只存在1個(gè)等位基因。以父本b的基因型為診斷標(biāo)記，對(duì)所檢測(cè)的樣品進(jìn)行鑒定，只要在樣品中出現(xiàn)了父本b的基因型則認(rèn)為該樣本是雜交個(gè)體，由此可認(rèn)定樣本c為雜交后代。通過與父母本基因型的比對(duì)，可以區(qū)分樣本d為單倍體后代，而樣本e為雌核發(fā)育后代。

圖1 父母本及熱休克雌核發(fā)育組部分個(gè)體在位點(diǎn)Afu54的基因型

綜合運(yùn)用6對(duì)微衛(wèi)星多態(tài)性標(biāo)記數(shù)據(jù)，以父本特異條帶作為診斷標(biāo)記，對(duì)兩組雌核發(fā)育后代進(jìn)行鑒定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)熱休克雌核發(fā)育組在6個(gè)微衛(wèi)星座位上，檢測(cè)出11個(gè)樣本含有父本基因型，因此可認(rèn)定此11個(gè)樣品是由雜交發(fā)育而來(lái)的(此結(jié)果與表型判斷結(jié)果相吻合)，雜交后代占整個(gè)熱休克雌核發(fā)育組的27.5％。另外9個(gè)樣品的基因型與母本的完全相同，認(rèn)為這9個(gè)樣本是由雌核發(fā)育而來(lái)的，是完全的雌核發(fā)育后代，占熱休克雌核發(fā)育組的22.5％。還有6個(gè)樣本的基因型數(shù)目在所有位點(diǎn)均為母本基因型數(shù)目的一半，且不含父本基因型，因此認(rèn)為其為單倍體后代，占雌核發(fā)育組的15.0％。剩下的14個(gè)樣本所檢測(cè)的基因型出現(xiàn)了不同程度的重組現(xiàn)象，占整個(gè)雌核發(fā)育組的35.0％。

冷休克雌核發(fā)育組出現(xiàn)了8個(gè)樣本含有父本的基因型，雜交后代占冷休克雌核發(fā)育組的40.0％。2個(gè)單倍體樣本占雌核發(fā)育系的10.0％，未發(fā)現(xiàn)完全的雌核發(fā)育后代，出現(xiàn)了50.0％的重組基因型后代。

3 討 論

本研究中采用與俄羅斯鱘不同屬的達(dá)氏鰉作為父本,用來(lái)提供精子誘導(dǎo)進(jìn)行俄羅斯鱘雌核發(fā)育,是因?yàn)榭梢詮耐庑紊虾苊鞔_地區(qū)分俄羅斯鱘、達(dá)氏鰉及其雜交后代,達(dá)氏鰉口裂大，可達(dá)頭側(cè)，呈半月形，且左右鰓膜相互連接；俄羅斯鱘口裂小，且鰓膜與頰部相連；而二者雜交后代的口裂大小則介于這兩者之間(比達(dá)氏鰉口裂小，比俄羅斯鱘口裂大)，且鰓膜與頰部?jī)H有較小部分相連。而雌核發(fā)育后代則具有和其母本相同的外形特征，因此可以通過外形鑒定區(qū)分出雜交后代。但是僅通過外形觀察尚不能區(qū)分雌核發(fā)育后代和單倍體后代，因此雖然大部分單倍體后代表現(xiàn)出脊柱側(cè)彎等單倍體綜合癥特征而不能存活，但仍不能確定所有存活下來(lái)的后代中是否有單倍體后代。Fopp-Bayat[27]使用微衛(wèi)星DNA分子標(biāo)記成功辨別出西伯利亞鱘雌核發(fā)育誘導(dǎo)后產(chǎn)生的單倍體后代，本研究中也利用微衛(wèi)星標(biāo)記來(lái)區(qū)分單倍體和雌核發(fā)育后代，并取得了成功。但目前使用微衛(wèi)星標(biāo)記分辨單倍體尚具有一定的局限性，必須要先開發(fā)出多對(duì)具有一定多態(tài)性的微衛(wèi)星標(biāo)記，再?gòu)闹羞x擇一對(duì)在雙親中基因型不同的用來(lái)進(jìn)行分析，因此此種方法不適用于多對(duì)親本混合使用的情況。另外，對(duì)于多倍體的鱘魚，為確保結(jié)果的準(zhǔn)確性，最好使用多對(duì)微衛(wèi)星位點(diǎn)綜合分析。

本次實(shí)驗(yàn)使用的6對(duì)微衛(wèi)星引物在兩組雌核發(fā)育系中均能擴(kuò)增出相應(yīng)的目的條帶，未出現(xiàn)無(wú)效等位基因現(xiàn)象。兩組雌核發(fā)育中，所有位點(diǎn)都表現(xiàn)出一定的雜合性。在人工誘導(dǎo)魚類雌核發(fā)育過程中，有時(shí)會(huì)因精子的遺傳物質(zhì)沒有完全的失活，而使部分父本的雄性基因參與了遺傳，因此有必要對(duì)雌核發(fā)育后代的真實(shí)性進(jìn)行確認(rèn)。張海發(fā)等[28]對(duì)彭澤鯽雌核發(fā)育進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)雌核發(fā)育子代中具有與父本相同而與母本相異的特異條帶。相似率為21.05％；鄒桂偉等[29]比較發(fā)現(xiàn)雌核發(fā)育鰱含有少數(shù)與父本相同的特異DNA擴(kuò)增條帶，表明雌核發(fā)育鰱整入了父本雄鯉的遺傳物質(zhì)。本研究用6對(duì)微衛(wèi)星引物對(duì)2組俄羅斯鱘的雌核發(fā)育后代進(jìn)行分析，結(jié)果在M1和M2兩組雌核發(fā)育系中分別檢測(cè)出8尾和11尾含有父本達(dá)氏鰉中存在而母本俄羅斯鱘中并沒有的父本特異DNA擴(kuò)增條帶，說明此樣本為雜交個(gè)體，雜交率分別為40.0％和27.5％。實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)到雜交個(gè)體較多，是因?yàn)檫@兩種魚雜交后代可活，并且具有雜交優(yōu)勢(shì)，生存能力更強(qiáng)。本實(shí)驗(yàn)選擇紫外照射后仍有20％左右活動(dòng)鏡子進(jìn)行雌核發(fā)育誘導(dǎo)，可以通過增加滅活精子比例來(lái)降低雜交后代比例。

在兩組雌核發(fā)育系中分別得到了不同程度的單倍體個(gè)體，分別占雌核發(fā)育組的10.0％和15.0％，由于本次實(shí)驗(yàn)采樣是在仔魚孵化后第2天開始的，起初所采集的樣品有一部分脊椎彎曲、肢節(jié)模糊，為單倍體綜合癥的表現(xiàn)，與實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)分析的結(jié)果相一致。在孵化階段雖有少數(shù)單倍體個(gè)體存活，但活力較差，最終全部死亡。本實(shí)驗(yàn)雌核發(fā)育后代中單倍體個(gè)體存活時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)，從初孵仔魚到存活3～4 d，可能與本實(shí)驗(yàn)所選的材料母本俄羅斯鱘(n=8)是多倍性有關(guān)．本實(shí)驗(yàn)得到的單倍體比例明顯少于鄒遠(yuǎn)超等[30]在匙吻鱘雌核發(fā)育后代中單倍體的比例(33.5％以上)，可能因?yàn)槿訖z測(cè)時(shí)期不同，他們?cè)谠c胚期取樣檢測(cè)，而本實(shí)驗(yàn)取的是孵出仔魚，有很多單倍體不能孵化成仔魚，在胚胎時(shí)期就死亡了。

在對(duì)異質(zhì)雌核發(fā)育后代共顯性分子標(biāo)記檢測(cè)中一般會(huì)存在一些雜合位點(diǎn)，一般認(rèn)為這是因卵母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂時(shí)同源染色體之間發(fā)生交換引起的[33-34]，有關(guān)魚類的雌核發(fā)育群體基因重組的報(bào)道中，基因重組率的變動(dòng)范圍比較大。如王偉等采用篩選獲得的10對(duì)高多態(tài)性的微衛(wèi)星引物對(duì)牙鲆異精雌核發(fā)育進(jìn)行了分析，其中7個(gè)基因座位上均發(fā)生了基因—著絲粒之間的重組，重組率在42.6％～100％之間；王曉清等[36]運(yùn)用6對(duì)微衛(wèi)星引物對(duì)2組大黃魚雌核發(fā)育家系進(jìn)行了微衛(wèi)星標(biāo)記分析，發(fā)現(xiàn)在G1代有3個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)上發(fā)生了基因重組，重組率為12.5％，G2代有10個(gè)座位發(fā)生了重組，重組率為41.7％；Francescon等[37]發(fā)現(xiàn)歐洲鱸在6個(gè)微衛(wèi)星座位上發(fā)生了基因重組，重組率為40％～94％；Nagy等[38]發(fā)現(xiàn)鯉在9個(gè)基因座位上發(fā)生了重組，重組率為35％。本次研究的兩組俄羅斯鱘雌核發(fā)育后代在6對(duì)微衛(wèi)星引物中分別檢測(cè)出不同程度的重組現(xiàn)象，重組率分別為50％和35％。重組現(xiàn)象出現(xiàn)可能是所選擇的位點(diǎn)距著絲點(diǎn)較遠(yuǎn)，也可能是與實(shí)驗(yàn)材料的多倍性有關(guān)，當(dāng)然，要獲得準(zhǔn)確的結(jié)論還需要反復(fù)的實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證。

本實(shí)驗(yàn)所獲得的兩組雌核發(fā)育系；熱休克組中得到了22.5％的完全雌核發(fā)育個(gè)體，而冷休克中并無(wú)完全雌核發(fā)育個(gè)體，由此可見采用熱休克誘導(dǎo)俄羅斯鱘雌核發(fā)育較冷休克相比具有明顯的優(yōu)勢(shì)，是一個(gè)行之有效的方法。

目前有關(guān)于鱘魚雌核發(fā)育的報(bào)道中只有西伯利亞鱘AcipenserbaeriBrandt[39]、短吻鱘A.brevirostrum[40]和雜交鱘Bester(H.husofemale×A.ruthenusmale)[41]的性別決定機(jī)制為雌性異型配子。通過雌核發(fā)育可產(chǎn)生3種基因型后代雌魚為(ZW或WW型)，雄魚為(ZZ型),因雌魚(WW型)為超雌鱘魚，所以將其與雄性鱘魚(ZZ型)交配可獲得全雌鱘魚。而匙吻鱘的雌核發(fā)育后代全部為雌性，說明其為同型雌性配子。至于俄羅斯鱘的性別決定機(jī)制尚未知曉。本實(shí)驗(yàn)得到的完全雌核發(fā)育個(gè)體的性別還需要至少2 a的飼養(yǎng)才能進(jìn)行鑒定?？傊么坪税l(fā)育的手段來(lái)提高俄羅斯鱘品種的遺傳純度，減少個(gè)體之間的遺傳變異以及全雌育種具有重要的意義。

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