顧慶龍，柯名娟，王方海

(1. 中山大學(xué)有害生物控制與資源利用國家重點實驗室∥昆蟲學(xué)研究所, 廣東 廣州 510275;2. 揚州市職業(yè)大學(xué)，江蘇 揚州 225009)

蟛蜞菊WedeliachinensisMerr別名馬蘭草、路邊菊、黃花龍舌草等，屬于菊科草本植物，在我國的海南、廣東等省廣為分布，多生于路旁、田邊、溝邊或濕潤草地上，是一種常見的地被植物[1]。

稻縱卷葉螟Cnaphalocrocismedinalis(Guenee)為水稻重要害蟲，是造成水稻減產(chǎn)減收的主要原因之一，近年來該蟲發(fā)生頻率和危害程度呈加劇趨勢。稻縱卷葉螟屬鱗翅目，螟蛾科，別名白葉蟲、刮青蟲。廣泛分布于熱帶到溫帶種植的水稻上。中國是種植水稻的大國，長年來深受該害蟲的危害。此蟲不但危害水稻，還危害麥子、玉米、谷子、紅薯等農(nóng)作物。因此，國內(nèi)外科學(xué)家們一直都非常重視稻縱卷葉螟的研究，希望能找到新的防治方法和措施，以減少此蟲的危害[2]。

由于許多化學(xué)合成殺蟲劑存在著環(huán)境污染及易引起害蟲產(chǎn)生抗藥性等方面的嚴(yán)重問題，人們越來越重視環(huán)境友好的有效控制害蟲的新方法的研究，近年來有關(guān)植物源殺蟲劑的開發(fā)和研制已成為其中的一個研究熱點[3]。許多研究成果已被廣泛應(yīng)用于害蟲防治中，如采用雷公藤制劑防治小菜蛾[4]，利用苦皮藤乳油控制菜青蟲[5],以及采用印楝素殺蟲劑防治同翅目昆蟲葉蟬、蚜蟲、褐飛虱和粉虱等[6]。

已有研究表明蟛蜞菊提取物對多數(shù)昆蟲具有拒食、忌避及毒殺等作用。如朱彩云等[7]于2006年報道蟛蜞菊甲醇提取物對鱗翅目螟蛾科的玉米螟有明顯的拒食活性；陳澤坦等[8]于2003年報道蟛蜞菊甲醇抽提物對花生蚜具有明顯的忌避作用及毒殺作用；樂海洋等[9]于1997年則報道蟛蜞菊葉和花的乙醇抽提物對白紋伊蚊幼蟲具有毒殺作用。我們實驗室首次研究發(fā)現(xiàn)蟛蜞菊甲醇提取物對稻縱卷葉螟也具有較強的拒食作用及一定的毒殺作用，本研究主要報導(dǎo)蟛蜞菊不同組織部位的甲醇提取物對稻縱卷葉螟各齡幼蟲的拒食和毒殺作用。

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

索氏提取儀：廣州格泰儀器有限公司;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：BUCHI R-200,Labortechnik AG, Switzerland;養(yǎng)蟲管：長5 cm，直徑3 cm的指形玻璃管;N,N-二甲基甲酰胺(DMF)和甲醇：分析純，購自廣州化學(xué)試劑廠。

1.2 供試植物

蟛蜞菊采自廣州市中山大學(xué)南校區(qū)校園內(nèi)。

1.3 供試?yán)ハx

稻縱卷葉螟采自廣州市華南農(nóng)業(yè)大學(xué)水稻試驗田內(nèi)。挑選發(fā)育良好及蟲齡一致的二齡至五齡幼蟲作為供試?yán)ハx。

1.4 蟛蜞菊提取方法

采集蟛蜞菊的莖、葉、花3部分，清洗并在室內(nèi)通風(fēng)處陰干，60 ℃的恒溫干燥箱內(nèi)干燥至恒質(zhì)量，用植物粉碎機粉碎，然后過40目篩子。稱取各組織干粉10 g，索氏提取儀提取，溶劑為甲醇。待提取完成后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮，蒸干溶劑得粗提物，稱量。

適量N,N-二甲基甲酰胺(DMF)完全溶解各部分粗提物后用蒸餾水定容至25 mL，然后稀釋成質(zhì)量濃度為80 mg/mL的溶液，保存于冰箱備用。

1.5 拒食活性和毒殺作用測定方法

用葉片浸漬法進(jìn)行非選擇性拒食試驗，具體參照鄒向菲等[10]。將新鮮水稻葉放入提取物溶液中浸漬10 s(作為處理葉)，或放入w=50%DMF溶液中浸漬10 s(作為對照葉)，取出晾干，用于試驗。

將處理葉和對照葉分別放入養(yǎng)蟲小管，每管接入1頭已饑餓4 h的各齡幼蟲，然后放于養(yǎng)蟲室內(nèi)飼養(yǎng)觀察，飼養(yǎng)溫度為24～26 ℃，相對濕度大于80%，光照條件16 h。24 h后測定試蟲取食量，記錄死亡蟲數(shù)，并更換新的處理葉和對照葉繼續(xù)飼養(yǎng)1 d后再次測量試蟲取食量和記錄死亡蟲數(shù)，每種處理10頭蟲，3次重復(fù)，根據(jù)死亡蟲數(shù)確定毒殺作用的強弱，按照葉片稱重法計算拒食率。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用SPSS Statistics V17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 蟛蜞菊不同部位提取物對稻縱卷葉螟幼蟲的拒食活性

蟛蜞菊莖、葉、花3個部位提取物對稻縱卷葉螟不同齡期幼蟲的24 h拒食率見表1。從2齡幼蟲到5齡幼蟲的測試結(jié)果來看，蟛蜞菊花的部位提取物具有較強的拒食活性，都達(dá)到或接近100%的拒食率；莖部位提取物的拒食活性略低，各齡期幼蟲的拒食率都接近80%左右；葉部位提取物的拒食活性最低，各齡期幼蟲的拒食率都低于60%，最低的只有(34.37±8.52)%。

表1 蟛蜞菊莖、葉、花提取物對稻縱卷葉螟各齡期幼蟲的24 h拒食率1)

蟛蜞菊莖、葉、花3個部位提取物對稻縱卷葉螟不同齡期幼蟲的48 h拒食率見表2。蟛蜞菊花的部位提取物對各齡期幼蟲具有最強的拒食活性，拒食率都達(dá)到或接近100%；莖部位的拒食活性居兩者之間；葉部位提取物的拒食活性最低。

2.2 稻縱卷葉螟各齡幼蟲的拒食活性比較

各齡期幼蟲對蟛蜞菊莖的甲醇提取物都具有較強的拒食活性。24 h的拒食率隨著齡期的增大有逐漸下降的趨勢，其中2齡幼蟲的拒食率高達(dá)(91.11±3.85)%，而5齡幼蟲則下降到(72.35±9.08)%，兩者差異達(dá)到顯著水平(見表1)；5齡期幼蟲48 h的拒食率比24 h的拒食率有明顯增長，達(dá)到(94.53±1.49)%，顯著高于3齡期幼蟲的拒食率(見表1,2)。

表2 蟛蜞菊莖、葉、花提取物對稻縱卷葉螟各齡期幼蟲的48 h拒食率1)

各齡期幼蟲對蟛蜞菊葉的甲醇提取物都表現(xiàn)出較弱的拒食活性，其24 h的拒食率最高的只有(57.84±3.68)%(見表1)；各齡期幼蟲48 h的拒食率均有所升高，但增高幅度不是很顯著，如2齡期幼蟲48 h拒食率為70.86±3.10，與其它齡期幼蟲的拒食率相比已算是最高的(見表2)。

各個齡期幼蟲對花的甲醇提取物都很敏感，24 h和48 h拒食率都達(dá)到或接近100%，且各齡期之間無論是24 h拒食率還是48 h拒食率均沒有顯著差異(見表1， 2)。

2.3 蟛蜞菊不同部位提取物對稻縱卷葉螟幼蟲的毒殺作用

稻縱卷葉螟幼蟲取食經(jīng)蟛蜞菊莖提取物浸漬的新鮮水稻葉后的死亡率見表3和表4。各齡期幼蟲在處理24 h后的死亡率都很低，最高的也才只有14.3%，相互間沒有顯著差異(見表3)；當(dāng)處理時間延長到48 h，各齡期幼蟲的死亡率均有一定程度的提高，其中2齡幼蟲的死亡率達(dá)到40.0%，明顯高于其它高齡幼蟲的死亡率，且差異達(dá)到極顯著水平，此外各齡期幼蟲的死亡率有隨著蟲齡的增大而逐漸降低的趨勢(見表4)。

蟛蜞菊葉提取物對稻縱卷葉螟各齡幼蟲的毒殺作用都很弱，無論是處理24 h還是48 h，各齡期幼蟲的死亡率都很低，最高的只有15.4%，且不同齡期幼蟲的死亡率之間差異性不顯著(見表3,4)。

如表3所示，蟛蜞菊花提取物處理24 h對稻縱卷葉螟2齡和3齡幼蟲有極其微弱的毒殺作用，而對4齡和5齡幼蟲則不產(chǎn)生任何毒殺現(xiàn)象，被處理的4齡和5齡幼蟲均未觀察到死亡個體；但當(dāng)處理時間提高到48 h，各齡期幼蟲的死亡率均有明顯提高，特別是2齡幼蟲的死亡率高達(dá)72.7%，顯現(xiàn)出明顯的毒殺作用，另外各齡期幼蟲的死亡率隨著蟲齡增大有逐漸下降的趨勢，說明隨著蟲齡的增長，其抵抗蟛蜞菊花提取物的毒殺作用能力也逐漸增強(見表4)。

表3 稻縱卷葉螟取食蟛蜞菊莖葉花提取物處理過的水稻葉24 h后的死亡率1)

表4 稻縱卷葉螟取食蟛蜞菊莖葉花提取物處理過的水稻葉48 h后的死亡率1)

3 討 論

拒食活性是殺蟲植物對植食性昆蟲普遍具有的作用方式。在實驗室，一般通過選擇性試驗(昆蟲對提取物處理過的葉或者飼料的取食情況)和非選擇性試驗(昆蟲對提取物處理和未處理葉或者飼料的取食情況)來測定提取物的拒食活性。本試驗采用非選擇性試驗首次報道了蟛蜞菊各個部位的甲醇提取物對稻縱卷葉螟各齡幼蟲均具有一定的拒食活性，且發(fā)現(xiàn)低齡幼蟲對各個部位的提取物都有較強的拒食現(xiàn)象，48 h拒食率比24 h拒食率小幅增高。莖、葉和花3個部位中，以花的甲醇提取物拒食活性最高，這與朱彩云等[7]做的蟛蜞菊提取物對玉米螟的拒食作用研究結(jié)果一致。

利用昆蟲拒食劑來進(jìn)行作物保護(hù)近幾年進(jìn)展非常迅猛，研究成果大量涌現(xiàn)[11]。根據(jù)本研究結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)蟛蜞菊花的甲醇提取物對稻縱卷葉螟各齡幼蟲均表現(xiàn)出很強的拒食活性，下一步應(yīng)該對蟛蜞菊花中所含有的拒食活性成分進(jìn)行詳細(xì)分析和篩選，為今后開發(fā)出新的拒食劑控制稻縱卷葉螟的危害提供實驗依據(jù)。

本文還首次報道了蟛蜞菊各部位提取物對稻縱卷葉螟各齡幼蟲都有一定的毒殺作用，但比較微弱。也曾有人報道過蟛蜞菊乙醇或甲醇提取物對白紋伊蚊[9]、花生蚜[8]等害蟲具有一定的毒殺活性，但作用緩慢，效果不是很理想，與本研究的結(jié)果有點類似。

蟛蜞菊是我國南方常見的植物，繁殖能力很強，野外隨處可見，資源極其豐富，今后我們應(yīng)該從該植物對害蟲所具有的忌避和毒殺活性著手，深入研究，并對其進(jìn)行綜合開發(fā)利用。

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