昝 瓊

高效液相色譜法測定丹皮酚軟膏中丹皮酚的含量研究

昝 瓊

目的探討高效液相色譜法在測定丹皮酚軟膏中丹皮酚的含量中的應用價值。方法為了有效控制丹皮酚軟膏中主要成分丹皮酚的含量，本研究應用高效液相色譜法建立了一種測定丹皮酚軟膏中丹皮酚含量的分析方法。結(jié)果丹皮酚質(zhì)量濃度為2.10～31.28μg/ml范圍內(nèi)，丹皮酚的質(zhì)量濃度與色譜峰面積呈現(xiàn)良好的線性關系。供試品溶液連續(xù)進樣5次的RSD（%）均小于1.0，重現(xiàn)性良好，符合高效液相色譜法測定含量的要求。樣品溶液0小時與8小時后峰面積無明顯變化，供試品溶液8小時內(nèi)穩(wěn)定。本品在相當于標示量的80%～120%范圍內(nèi)，測得丹皮酚的平均回收率為99.78%，相對標準偏差（RSD%）為0.65。表明該方法準確度良好，符合高效液相色譜法對含量測定的要求。按照確定的高效液相的方法，對中試六批產(chǎn)品及市售品進行含量測定，結(jié)果顯示中試六批產(chǎn)品與市售品中的丹皮酚含量相比，相對標準偏差（RSD%）為2.23。結(jié)論該方法測定本品含量的重現(xiàn)性好，準確可靠，專屬性強，靈敏度高，符合高效液相色譜法對含量測定的要求。

高效液相色譜法；丹皮酚軟膏；丹皮酚；含量

為了有效控制丹皮酚軟膏中主要成分丹皮酚的含量，本研究應用高效液相色譜法建立了一種測定丹皮酚軟膏中丹皮酚含量的分析方法。

1 材料與方法

1.1材料與試藥

島津 LC-10ATvp 高效液相色譜儀，島津SPD-10Avp 紫外可見檢測器，Shim-Pack VP-ODS C18150mm×4.6mm 5μm 色譜柱，丹皮酚對照品購于中國藥品生物制品檢定所（批號：708-9003）。甲醇為色譜純，水為蒸餾水，其他試劑均為分析純。丹皮酚軟膏自制（批號：070801、070802、070803、070804、070805、070806）。

1.2方法

①色譜條件：流動相為甲醇-水（50：50），色譜柱為Shim-Pack VP-ODS C18150mm×4.6mm 5μm，流速為1.0ml/min，檢測波長為274nm，進樣量為20μl。②對照品制備：精密稱取丹皮酚對照品適量，加甲醇溶解并稀釋至25ml；精密量取該溶液各0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0ml，分別置50ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。③供試品制備：稱取丹皮酚軟膏約 0.5g，加甲醇研磨溶解，轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，稀釋至刻度。取續(xù)濾液1ml，稀釋至25ml，作為樣品溶液[1]。

2 結(jié)果

2.1系統(tǒng)適應性實驗

取樣品溶液20μl注入液相色譜儀，按照上述色譜條件，記錄色譜圖，丹皮酚峰的理論塔板數(shù)為46647.579，分離度為 16.148。兩個主峰的分離度及相鄰雜質(zhì)峰的分離度均大于1.5。

2.2線性關系考察

精密稱取丹皮酚對照品適量，加甲醇溶解并稀釋至25ml；精密量取該溶液各0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0ml，分別置50ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。分別進樣 20μl，記錄色譜圖，記錄樣品的峰面積，以進樣量作為X軸，峰面積作為Y軸，得到回歸方程：Y=6321.25X+38.32，r=0.9995，這表明丹皮酚質(zhì)量濃度為2.10～31.28μg/ml范圍內(nèi)，丹皮酚的質(zhì)量濃度與色譜峰面積呈現(xiàn)良好的線性關系。

2.3重現(xiàn)性試驗

稱取本品 0.5g，按照上述方法配制成供試品溶液，取20μl照上述色譜條件進樣，連續(xù)5次，記錄色譜圖，詳見表1。試驗表明，供試品溶液連續(xù)進樣5次的RSD（%）均小于1.0，重現(xiàn)性良好，符合高效液相色譜法測定含量的要求。

表1 精密度實驗

2.4溶液的穩(wěn)定性試驗

稱取本品 0.5g，照含量測定項下的方法，制成供試品溶液，分別于0、2、4、6、8小時取20μl進樣，記錄色譜圖?？疾旃┰嚻啡芤旱姆€(wěn)定性。結(jié)果見表2。上述試驗表明，樣品溶液0小時與8小時后峰面積無明顯變化，供試品溶液8小時內(nèi)穩(wěn)定。

表2 溶液的穩(wěn)定性試驗

2.5加樣回收試驗

精密稱取丹皮酚原料（含量：99.6%）相當于測定量80%、100%、120%各3份，分別按處方混合并加入 10g的丹皮酚軟膏，加流動相適量，攪拌使溶解并混合均勻。取適量定按照含量測定下的方法配制供試品溶液，并照含量測定項下的方法依法測定，記錄色譜圖，并計算各份含丹皮酚的量及回收率。試驗結(jié)果見表3。本品在相當于標示量的80%～120%范圍內(nèi)，測得丹皮酚的平均回收率為99.78%，相對標準偏差（RSD%）為0.65。表明該方法準確度良好，符合高效液相色譜法對含量測定的要求。

表3 丹皮酚回收試驗結(jié)果

2.6六批中試樣品及市售品的含量測定

按照確定的高效液相的方法，對中試六批產(chǎn)品及市售品進行含量測定，結(jié)果見表4。結(jié)果顯示中試六批產(chǎn)品與市售品中的丹皮酚含量相比，相對標準偏差（RSD%）為2.23。

表4 含量測定結(jié)果

3 結(jié)論

丹皮酚軟膏為抗過敏藥，有消炎止癢作用。臨床主要用于各種濕疹、皮炎，皮膚瘙癢等皮膚疾病[2-4]；另外，丹皮酚軟膏對過敏性鼻炎和防治感冒也有一定的治療效果[5]。為了有效控制丹皮酚軟膏中主要成分丹皮酚的含量，本研究應用高效液相色譜法建立了一種測定丹皮酚軟膏中丹皮酚含量的分析方法。研究發(fā)現(xiàn)丹皮酚質(zhì)量濃度為2.10～31.28μg/ml范圍內(nèi)，丹皮酚的質(zhì)量濃度與色譜峰面積呈現(xiàn)良好的線性關系。供試品溶液連續(xù)進樣5次的RSD（%）均小于1.0，重現(xiàn)性良好，符合高效液相色譜法測定含量的要求。樣品溶液0小時與8小時后峰面積無明顯變化，供試品溶液 8小時內(nèi)穩(wěn)定。本品在相當于標示量的80%～120%范圍內(nèi)，測得丹皮酚的平均回收率為99.78%，相對標準偏差（RSD%）為0.65。表明該方法準確度良好，符合高效液相色譜法對含量測定的要求。按照確定的高效液相的方法，對中試六批產(chǎn)品及市售品進行含量測定，結(jié)果顯示中試六批產(chǎn)品與市售品中的丹皮酚含量相比，相對標準偏差（RSD%）為2.23。上述研究結(jié)果說明該方法測定本品含量的重現(xiàn)性好，準確可靠，專屬性強，靈敏度高，符合高效液相色譜法對含量測定的要求。

[1]李驊，楊倩，王四旺，等.高效液相色譜法測定雙丹膠囊中丹皮酚的含量[J].解放軍藥學學報，2011，27（3）：251-253.

[2]郜琪臻，楊希琴，俞旗峰，等.丹皮酚軟膏的質(zhì)量標準研究[J].中草藥，2008，39（6）：866-867.

[3]尹毅.HPLC法測定復方丹皮湯中丹皮酚的含量[J].安徽醫(yī)藥，2009，13（9）：1045-1046.

[4]孫瑛蔚，徐芝育.高效液相色譜法測定蒲黃止血口服液中丹皮酚的含量[J].吉林中醫(yī)藥，2010，30（2）：172-173.

[5]林冬杰，盧萬飄，蔡月蓮.高效液相色譜法測定活血調(diào)經(jīng)丸中丹皮酚含量[J].中國藥業(yè)，2010，19（16）：24-25.

天圣制藥集團股份有限公司，重慶 400060