摘 要: 通過對含有苯并噻二唑（BTH）、咖啡酸（CA）或氯化鈷（CC）等不同MS培養(yǎng)上甜瓜愈傷組織的研究，測定了超氧陰離子（）產(chǎn)生速率、過氧化氫（H2O2）含量及抗性相關(guān)酶活性的變化，探討了BTH誘導(dǎo)的甜瓜ROS代謝和抗性酶活性及其相關(guān)的信號途徑。結(jié)果表明，CA可以消除BTH對甜瓜愈傷組織增加和H2O2積累的誘導(dǎo)作用； CA或CC能夠部分抵消BTH對SOD增強(qiáng)的誘導(dǎo)作用； CC對BTH誘導(dǎo)的POD增強(qiáng)具有抑制效應(yīng)，CA+CC可完全消除BTH對POD的誘導(dǎo)作用；CA和CC均能促進(jìn)BTH對PAL增強(qiáng)的誘導(dǎo)作用，且具有協(xié)同效應(yīng)。BTH對甜瓜升高、H2O2積累和CAT降低的誘導(dǎo)主要通過SA途徑實(shí)現(xiàn)，對POD的影響主要通過ET途徑實(shí)現(xiàn)，對SOD升高的誘導(dǎo)通過SA和ET 2條途徑實(shí)現(xiàn)，而對PAL活性的影響通過ET和SA以外的途徑實(shí)現(xiàn)。

關(guān)鍵詞： 甜瓜； 苯并噻二唑； 咖啡酸； 氯化鈷； 活性氧； 抗病相關(guān)酶； 信號途徑

中圖分類號：Ｓ６52 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：Ａ 文章編號：１００９－９９８０（２０12）０2－0246－０7

The signal pathway of melon calli ROS metabolism and defensive enzyme activities induced by BTH

WANG Chun-lin1，3， ZHANG Yu-xin2， CHEN Nian-lai1，2*， DAI Chun-yan2， FANG Chun-yuan2， KANG En-xiang2

（1Agronomy College， Gansu Agricultural University， Lanzhou，Gansu 730070 China； 2College of Resources and Environment，Gansu Agricultural University， Lanzhou，Gansu 730070 China； 3Long Dong College，Qingyang，Gansu 745000 China）

Abstract: The melon calli were cultured in dark （25±2) ℃ on MS medium contained 5 mmol·L-1 coffeic acid （CA) and/ or 10 mmol·L-1 CoCl2 （CC)， while benzothiadiazole （BTH） were sprayed on the calli. The production rate of ， content of H2O2 and the activities of SOD，CAT，POD，PPO，PAL were determined. The result showed that CA inhibited the induction of BTH on rate， H2O2 production and CAT decrease. While CC stimulated rate， but had no effect on BTH induced H2O2 production and CAT decrease. Either CA or CC could partially inhibit the increase of SOD activity induced by BTH， and CA+CC completely counterbalanced the effect of BTH on SOD. CC eliminated POD increase induced by BTH， while CA showed no effect on this. Both CA and CC promoted the increase of PAL induced by BTH. These results demonstrate that the induction of BTH on CAT activity， rate and H2O2 production is through SA-dependent pathway， the induction of BTH on POD activity is through ET-dependent pathway， and the effect of BTH on SOD activity is through SA- and ET-dependent pathways， while the induction of BTH on PAL may be via signal transduction other than SA- or ET-dependent pathway.

Key words: Melon； Benzothiadiazole； Coffeic acid； Cobalt chloride； Reactive oxygen species； Defensive enzymes； Signal pathway

通過研究和分析植物抗病信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在誘導(dǎo)機(jī)制和抗病機(jī)制中的作用，有助于我們利用相關(guān)基因并培育具有廣譜、高抗的轉(zhuǎn)基因植物。活性氧（ROS，Reactive oxygen species）是植物寄主-病原物非親和性互作過程中發(fā)生的早期事件之一[1-2]。ROS在植物抗病過程中具有殺菌、引發(fā)過敏反應(yīng)、加強(qiáng)細(xì)胞壁、促進(jìn)植保素合成等作用，還是植物抗病信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的第二信使[3-4]。靜息細(xì)胞內(nèi)的ROS被控制在很低的范圍，當(dāng)細(xì)胞受到各種生理或病理因素作用時(shí)，多種細(xì)胞外信號分子作用于膜受體，ROS被受體活化誘導(dǎo)而“有目的”地快速增加，從而作為細(xì)胞內(nèi)信號分子參與細(xì)胞增殖，分化和凋亡等各種細(xì)胞行為[5]。植物為了將活性氧的量嚴(yán)格限制在一定的濃度范圍內(nèi)，而進(jìn)化出了一系列復(fù)雜的酶促與非酶促降解途徑來清除活性氧，維持活性氧的動態(tài)平衡[6]。在植物的保護(hù)酶系中，超氧化物歧化酶（SOD）是主要的活性氧清除酶系，它氧化迸發(fā)過程產(chǎn)生的歧化為O2和H2O2；POD 不僅是H2O2水解的主要酶之一，而且在特定的條件，也能與NADPH 等反應(yīng)產(chǎn)生H2O2，生成的H2O2用于細(xì)胞壁的木質(zhì)化或蛋白質(zhì)的交聯(lián)；過氧化氫酶（CAT）使H2O2轉(zhuǎn)化為H2O和O2[7]。

植物體內(nèi)至少存在2條主要的抗病信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，其中一條依賴于水楊酸（Salicylic acid，SA），介導(dǎo)過敏反應(yīng)、系統(tǒng)獲得抗性和激活防御基因的表達(dá)，并通過與多個(gè)細(xì)胞因子的相互作用對植株抗性產(chǎn)生廣泛的影響，稱之為SA-依賴性途徑（SA-dependent pathways）；另一條依賴于茉莉酸/乙烯（Ethylene，ET），介導(dǎo)系統(tǒng)誘導(dǎo)抗性，稱為SA-非依賴性途徑[8]。植物體內(nèi)的SA是通過苯丙烷途徑合成的，肉桂酸-4-羥化酶是其中SA合成的關(guān)鍵酶[9]?？Х人幔╟affeic acid，CA）可以抑制SA合成途徑中的肉桂酸-4-羥化酶，進(jìn)而降低SA含量[10]。ET合成酶是ET生物合成途徑中最后一個(gè)酶，催化1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸向乙烯的轉(zhuǎn)化，是組織培養(yǎng)過程中ET合成的限速酶，Co2+能強(qiáng)烈抑制其活性[11]。苯并噻二唑（Benzothiadiazole，BTH）是人工合成的植物誘抗劑，能夠誘導(dǎo)許多重要的農(nóng)作物產(chǎn)生對病原菌廣譜和持久的抗性[12]。BTH可誘導(dǎo)甜瓜幼苗對白粉病的抗性[13-14]和抗性相關(guān)酶活性增強(qiáng)[15]。但關(guān)于BTH誘導(dǎo)ROS代謝和抗性相關(guān)酶活性增強(qiáng)的信號途徑幾乎沒有報(bào)道。我們用BTH處理培養(yǎng)在含SA或/和ET合成抑制劑（CA或/和CoCl2）的MS培養(yǎng)基上的甜瓜愈傷組織，通過監(jiān)測愈傷組織ROS及相關(guān)酶活性變化，探討B(tài)TH誘導(dǎo)甜瓜抗病性產(chǎn)生的信號途徑，以期進(jìn)一步闡釋BTH誘導(dǎo)植物抗病性的生化機(jī)理，為植物誘導(dǎo)抗性的應(yīng)用和抗病機(jī)制研究提供更多理論依據(jù)，促進(jìn)誘導(dǎo)抗病性技術(shù)在實(shí)踐中的應(yīng)用。

1 材料和方法

1.1 材料和處理

供試甜瓜品種為Tam Dew和卡拉克賽。Tam Dew是白蘭瓜品種，高抗白粉??；卡拉克賽又名伽師瓜，是我國著名哈密瓜品種，易感白粉病[16]。

選取子粒飽滿的甜瓜種子去殼，在75%的醫(yī)用酒精中浸泡30 s、再在0.1%升汞中浸泡并搖晃6 min，用無菌水沖洗5~6次后播種在1/2 MS培養(yǎng)基上，置于（25±2） ℃的光照培養(yǎng)箱中發(fā)芽。取幼嫩子葉轉(zhuǎn)接到1/2MS +2.4-D（0.1 mg·L-1）+6-BA （1.0 mg·L-1）的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)愈傷組織。選擇長勢良好的愈傷組織，分別作以下處理，處理1：將愈傷組織轉(zhuǎn)接到含5 mmol·L-1的SA合成抑制劑咖啡酸的1/2 MS培養(yǎng)基上；處理2：將愈傷組織轉(zhuǎn)移到含10 mmol·L-1 的ET合成抑制劑CoCl2（CC）的1/2 MS培養(yǎng)基上；處理3：將愈傷組織轉(zhuǎn)移到含5 mmol·L-1 咖啡酸 + 10 mmol·L-1 CoCl2的1/2 MS培養(yǎng)基上；處理4：將愈傷組織轉(zhuǎn)接到不含咖啡酸或CoCl2的1/2 MS培養(yǎng)基上。用1 mL注射器給上述愈傷組織噴灑BTH（50 mg·L-1）溶液（約1 mL·15 g FW），以無菌水噴灑處理4愈傷組織為對照，在（25±2） ℃下暗培養(yǎng)。于處理后0、2、4、6、8 d取培養(yǎng)瓶中的愈傷組織進(jìn)行ROS和酶活性測定。

1.2 測定指標(biāo)與方法

1.2.1 產(chǎn)生速率 參照宗會等[17]的方法測定，取甜瓜愈傷組織0.3 g，加入5 mL 10 mmol·L-1的鹽酸羥胺，真空滲入15 min，于30 ℃溫箱中溫育45 min，生成NO2。吸取2 mL樣品溶液，與1 mL 17 mmol·L-1的對氨基苯磺酸和1 mL 7 mmol·L-1 α-萘胺充分反應(yīng)，10 min后取上清液，在530 nm測其吸光值。

1.2.2 H2O2含量 參照林植芳等[18]的方法測定，取甜瓜愈傷組織0.3 g，按1∶2（w∶v）加入預(yù)冷的丙酮提取。取1 mL提取液加0.1mL 20%TiCl4的濃鹽酸液、0.2 mL濃氨水，生成的過氧化物-Ti復(fù)合物在3 000 r·min-1離心10 min。沉淀用丙酮懸浮洗滌5次。最后將沉淀溶于3 mL 1 mol·L-1的硫酸中，用在410 nm波長下測定吸光值。

1.2.3 SOD 活性測定 取愈傷組織0.3 g于冰凍研缽中，加3 mL預(yù)冷的0.05 mol·L-1 BPS（pH 7.8）在冰浴上研磨成漿，4 ℃，10 000 r·min-1下離心20 min，上清液即為粗酶液。活性測定參照李合生[19]的NBT（氮藍(lán)四唑）光化還原法，以抑制NBT光化還原50%的酶量為1個(gè)酶活力單位。

1.2.4 POD 活性測定 取愈傷組織0.3 g于冰凍研缽中，加3 mL預(yù)冷的0.05 mol·L-1 BPS（pH 6.0）在冰浴上研磨成漿，4 ℃，3 000 r·min-1離心10 min，上清液即為粗酶液?；钚詼y定參照李合生[19]的愈創(chuàng)木酚法。

1.2.5 PAL活性測定 參照李合生[19]的方法，取愈傷組織0.3 g，加5 mL含5 mmol·L-1 β-巰基乙醇硼酸緩沖液（pH8.8）、0.5 g聚乙烯吡咯烷酮（PVP）在研缽中研磨，于10 000 r·min-1下離心15 min，上清液為酶液粗提液。取上清液1.0 mL，加入1.0 mL 0.02 mol·L-1苯丙氨酸、2.0 mL蒸餾水，總體積為4 mL。置恒溫水浴30 ℃保溫0.5 h，以每小時(shí)在290 nm處吸光度變化0.01所需酶量為1個(gè)酶活性單位。

1.2.6 CAT活性測定 酶液提取同SOD，活性測定參照鄒琦[20]的紫外吸收法。

1.3 數(shù)據(jù)分析

利用SPSS 16.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，差異顯著性測驗(yàn)采用Duncan 法，作圖軟件為Excel。

2 結(jié)果與分析

2.1 咖啡酸和CoCl2對BTH誘導(dǎo)的甜瓜愈傷組織ROS代謝的影響

2.1.1 咖啡酸和CoCl2對BTH誘導(dǎo)的甜瓜愈傷組織產(chǎn)生速率的影響 BTH處理后，2個(gè)甜瓜品種愈傷組織產(chǎn)生速率均顯著增加，抗病品種Tam Dew的增加幅度大于感病品種卡拉克賽（圖1）。CA+BTH處理后2個(gè)品種產(chǎn)生速率與對照相當(dāng)，表明咖啡酸可以抑制BTH所誘導(dǎo)的甜瓜愈傷組織產(chǎn)生速率的增加。產(chǎn)生速率在CC +BTH和CA+CC+BTH處理中均顯著高于對照和BTH處理，其中CA+CC+BTH處理的愈傷組織中產(chǎn)生速率最高，說明CoCl2能促進(jìn)BTH對甜瓜愈傷組織產(chǎn)生的誘導(dǎo)作用，且CoCl2能恢復(fù)咖啡酸的抑制作用。

2.1.2 咖啡酸和CoCl2對BTH誘導(dǎo)的甜瓜愈傷組織H2O2含量的影響 BTH處理后甜瓜愈傷組織H2O2含量迅速增加（圖2），且顯著（P＜0.05）高于對照。CC+BTH處理后兩品種H2O2積累量與BTH處理基本一致；CA+BTH或CA+CC+BTH處理后2品種H2O2積累量與對照沒有顯著差異。表明咖啡酸可以抑制BTH對甜瓜愈傷組織H2O2積累量增加的誘導(dǎo)作用，CoCl2對BTH誘導(dǎo)的H2O2積累沒有顯著影響，但CoCl2能抵消咖啡酸對BTH作用的抑制效應(yīng)。

2.2 咖啡酸和CoCl2對BTH誘導(dǎo)甜瓜愈傷組織抗性酶活性的影響

2.2.1 咖啡酸和CoCl2對BTH誘導(dǎo)甜瓜愈傷組織SOD活性的影響 BTH誘導(dǎo)后甜瓜愈傷組織SOD活性顯著（P＜0.05）高于對照（圖3），卡拉克賽的SOD活性峰值比Tam Dew出現(xiàn)的較晚，約為2 d。CA+BTH和CC+BTH處理后2品種甜瓜愈傷組織的SOD活性都高于CK，但低于BTH處理；CA+CC+BTH處理后的SOD活性與CK相當(dāng)。說明，單獨(dú)使用咖啡酸或CoCl2能夠部分抵消BTH對甜瓜愈傷組織SOD活性增強(qiáng)的誘導(dǎo)作用，2者共存時(shí)則能有效抑制BTH的誘導(dǎo)作用。

2.2.2 咖啡酸和CoCl2對BTH誘導(dǎo)甜瓜愈傷組織CAT活性的影響 BTH處理顯著降低了甜瓜愈傷組織的CAT活性，處理后6~8 d Tam Dew的CAT活性受到更大的抑制（圖4）。CA+ BTH和CA+CC+BTH處理后CAT活性與CK間無顯著差異； CC+BTH處理后CAT活性與BTH處理相當(dāng)。表明CoCl2對BTH誘導(dǎo)的甜瓜愈傷組織CAT活性無顯著影響，而咖啡酸可以消除BTH對CAT活性的抑制作用。

2.2.3 咖啡酸和CoCl2對BTH誘導(dǎo)甜瓜愈傷組織POD活性的影響 圖5所示，BTH處理后甜瓜愈傷組織POD活性顯著增強(qiáng)，且抗病品種Tam Dew的POD活性大幅上升。CA+BTH處理的POD活性與BTH處理相當(dāng)； CC+BTH處理后POD活性呈先下降而后緩慢升高的趨勢，但顯著低于BTH處理，表明CoCl2對BTH誘導(dǎo)的POD活性增強(qiáng)具有抑制效應(yīng)；CA+CC+BTH處理完全消除了BTH的誘導(dǎo)作用，愈傷組織POD活性與CK相當(dāng)。

2.2.4 咖啡酸和CoCl2對BTH誘導(dǎo)甜瓜愈傷組織PAL活性的影響 BTH處理能促進(jìn)甜瓜愈傷組織PAL活性明顯增強(qiáng)，抗病品種Tam Dew的增幅大于感病品種卡拉克賽（圖6）； CA+BTH、CC+BTH和CA+CC+BTH處理的PAL活性均顯著高于BTH處理，CA+CC+BTH處理的PAL活性最高。表明咖啡酸和CoCl2均能促進(jìn)BTH對甜瓜愈傷組織PAL活性增強(qiáng)的誘導(dǎo)作用。此外，它們可能對PAL活性升高具有直接作用，且咖啡酸和CoCl2在增強(qiáng)PAL活性方面具有協(xié)同效應(yīng)。

2.3 甜瓜愈傷組織ROS代謝與抗病相關(guān)酶活性的相關(guān)性

對ROS含量變化與抗病相關(guān)酶活性的相關(guān)分析結(jié)果（表1）顯示，2品種甜瓜愈傷組織PAL活性與產(chǎn)生速率和H2O2含量極顯著正相關(guān)，SOD活性與H2O2含量極顯著正相關(guān)，CAT活性與產(chǎn)生速率顯著負(fù)相關(guān)，SOD活性與CAT極顯著負(fù)相關(guān)、而與POD和PAL活性呈極顯著正相關(guān)，說明不論基礎(chǔ)抗性高低，甜瓜的ROS清除均與SOD、PAL、CAT活性密切相關(guān)。

3 討 論

3.1 BTH誘導(dǎo)甜瓜愈傷組織ROS代謝的信號途徑

BTH處理能夠顯著提高甜瓜愈傷組織產(chǎn)生速率和H2O2含量，抗病品種產(chǎn)生速率和H2O2積累量高于感病品種，與BTH誘導(dǎo)甜瓜葉片抗病性提高的結(jié)果相一致[21]；咖啡酸處理抑制了BTH對產(chǎn)生速率和H2O2含量的誘導(dǎo)作用，表明其阻斷了BTH對甜瓜ROS信號途徑的誘導(dǎo)作用；CoCl2處理促進(jìn)了BTH對產(chǎn)生速率的誘導(dǎo)，而對H2O2含量沒有影響。結(jié)果表明，BTH處理誘導(dǎo)甜瓜愈傷組織產(chǎn)生速率和H2O2積累量的增加，不受ET途徑的影響，BTH可能通過SA等途徑影響ROS積累。

3.2 BTH誘導(dǎo)甜瓜愈傷組織抗病相關(guān)酶活性的信號途徑

CoCl2對BTH誘導(dǎo)的甜瓜愈傷組織CAT活性影響不顯著，而咖啡酸可以消除BTH對CAT活性的抑制作用，表明BTH對CAT活性的抑制是通過SA途徑實(shí)現(xiàn)的。單獨(dú)使用咖啡酸或CoCl2只有部分消除BTH對SOD活性增強(qiáng)的誘導(dǎo)作用，而咖啡酸和CoCl2共存幾乎完全消除了BTH的作用，說明BTH能通過SA和ET 2條途徑誘導(dǎo)SOD活性增強(qiáng)；CoCl2對BTH誘導(dǎo)的甜瓜愈傷組織POD活性具有抑制效應(yīng)，而咖啡酸對BTH的誘導(dǎo)效應(yīng)無影響，表明BTH對POD活性的誘導(dǎo)主要通過ET途徑實(shí)現(xiàn)。CoCl2或咖啡酸及CoCl2+咖啡酸對BTH誘導(dǎo)的PAL活性增強(qiáng)均無抑制作用，表明BTH誘導(dǎo)PAL活性增強(qiáng)不依賴于SA或ET途徑。相反咖啡酸和CoCl2還有可能作為化學(xué)逆境因子促進(jìn)PAL的活性。嚴(yán)文文等[11]研究證明，咖啡酸明顯促進(jìn)茉莉酸甲酯（MJ）對PAL活性誘導(dǎo)而又明顯降低SA含量，咖啡酸可能抑制了SA合成途徑中肉桂酸-4-羥化酶的活性。本試驗(yàn)結(jié)果與嚴(yán)文文等[11]研究咖啡酸和CoCl2對茉莉酸甲酯誘導(dǎo)煙草PAL活性的結(jié)果一致。BTH對PAL活性的影響可能是通過ET或SA以外的途徑，咖啡酸和CoCl2對PAL活性增強(qiáng)具有協(xié)同效應(yīng)，BTH對PAL活性的誘導(dǎo)途徑尚需進(jìn)一步研究。

3.3 BTH誘導(dǎo)的甜瓜愈傷組織ROS代謝與抗病相關(guān)酶活性的關(guān)系

研究指出，ROS快速積累對誘導(dǎo)植株防衛(wèi)反應(yīng)非常重要[22]。H2O2代謝主要由SOD、CAT和POD控制，SOD可將歧化為H2O2，而POD和CAT 可降解H2O2。PAL是植物莽草酸代謝途徑的關(guān)鍵酶和限速酶，在木質(zhì)素的積累、植保素和酚類物質(zhì)的合成中均具有重要作用。在特定的條件，POD能與NADPH 等反應(yīng)產(chǎn)生H2O2，生成的H2O2能介導(dǎo)木質(zhì)素合成以及HRGP在細(xì)胞壁中的氧化交聯(lián)[23]。2品種甜瓜愈傷組織PAL活性與產(chǎn)生速率和H2O2含量極顯著正相關(guān)，SOD活性與H2O2含量極顯著正相關(guān)，CAT活性與產(chǎn)生速率顯著負(fù)相關(guān)，而與POD和PAL活性呈極顯著正相關(guān)，說明不論基礎(chǔ)抗性高低，甜瓜的ROS清除均與SOD、PAL、CAT活性密切相關(guān)。感病品種（卡拉克賽）H2O2積累量與CAT極顯著負(fù)相關(guān)、而與PAL不相關(guān)，抗病品種（Tam Dew）H2O2積累量與PAL極顯著負(fù)相關(guān)、而與CAT不相關(guān)，說明不同抗性甜瓜品種維持ROS平衡的生化機(jī)制有差異。

4 結(jié) 論

BTH處理對甜瓜產(chǎn)生速率升高、H2O2積累和CAT活性降低的誘導(dǎo)主要通過SA途徑實(shí)現(xiàn)，對POD活性的影響主要通過ET途徑實(shí)現(xiàn)，對SOD活性升高的誘導(dǎo)通過SA和ET 2條途徑實(shí)現(xiàn)，而對PAL活性的影響通過ET和SA以外的途徑實(shí)現(xiàn)。

參考文獻(xiàn) References:

[1] LAMB C， DIXON R A. The oxidative burst in plant disease resistance[J]. Annual Review of Plant Physiology and Plant Molecular Biology， 1997， 48: 251-275.

[2] WANG Luo-xia， ZHANG Sheng-min， CHEN Yin-hua. Roles of reactive oxygen species and nitric oxide in interactions between plants and pathogens[J]. Chinese Journal of Tropical Agriculture， 2009， 29（6）: 70-77.

王羅霞， 張盛敏， 陳銀華. 活性氧和一氧化氮在植物-病原體互作反應(yīng)中的作用[J]. 熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2009， 29（6）: 70-77.

[3] DONG Hai-li， JING Jin-xue. Role of ROS and NO in plant disease resistance responses[J]. Journal of Northwest A F University: Natural Science Edition， 2003， 31（1）: 161-166.

董海麗， 井金學(xué). 活性氧和一氧化氮在植物抗病反應(yīng)中的作用[J]. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版， 2003， 31（1）: 161-166.

[4] WU Qing-li， TAN Xiao-rong. Role of reactive oxygen species in crop disease resistance[J]. Journal of Henan University of Technology:Natural Science Edition， 2008， 29（3）: 81-86.

吳慶麗， 譚曉榮. 活性氧在農(nóng)作物抗病中的作用[J]. 河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào): 自然科學(xué)版， 2008， 29（3）: 81-86.

[5] ZHOU Song， YI Jing. Ligand-induced generation of reactive oxygen species in cell signaling[J]. Chinese Journal of Cell Biology，2006， 28 （5）: 656-660.

周崧，易靜. 信號配體誘導(dǎo)的活性氧生成[J]. 細(xì)胞生物學(xué)雜志， 2006， 28（5）: 656-660.

[6] PAN Xiao-wu， LI Yong-chao， LI Xiao-xiang， HUANG Rong-feng. Metabolism and signal transduction of H2O2 in plants under abiotic stresses[J]. Journal of Agricultural Science and Technology， 2010，12 （2）: 38-43.

潘孝武， 黎用朝， 李小湘， 黃榮峰. 非生物脅迫條件下植物H2O2的代謝及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)[J]. 中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào)， 2010， 12（2）: 38-43.

[7] ZHAO Li-kun， LIAO Xiang-ru， JIANG Ji-zhi. Study advance in active oxygen and plant systemic acquired resistance[J]. Journal of Agricultural University of Hebei， 2002， 25: 173-176.

趙麗坤， 廖祥儒， 蔣繼志. 活性氧與植物系統(tǒng)獲得抗病性研究進(jìn)展[J]. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)， 2002， 25: 173-176.

[8] KUNKEL B N，BROOKS D M. Cross talk between signaling pathways in pathogen defense[J]. Current Opinion in Plant biology，2002， 5（4）: 325-331.

[9] STVEN H S，ANNEMART K，SUSANNE M C C. NPR1 modulates cross-talk between salicylate- and jasmonate-dependent defense pathways through a novel function in the cytosol[J]. The Plant Cell， 2003， 15: 760-770.

[10] BERNARDS M A，STRACK D，WRAY V，ELLIS B E. Caffeoyl glucosides in fungal challenged tomato suspension cultures[J]. Phytochemistry， 1991， 30（2）: 497-499.

[11] YAN Wen-wen， LI Yan-fang， HE Li-hong， BIN Jin-hua. Effect of cafeic acid and cobalt chloride on the defense related enzymes of tobacco cain inducing by methyl jasmonate[J]. Chinese Bulletin of Botany， 2003， 20（1）: 67-74.

嚴(yán)文文， 李艷芳， 賀立紅， 賓金華. 咖啡酸和氯化鈷對茉莉酸甲酯誘導(dǎo)抗病相關(guān)酶活性的影響[J]. 植物學(xué)通報(bào)， 2003， 20（1）:67-74.

[12] FAN Wen-jing， CUI Xin-yi， WANG Xue-li. Progresses of Plant Activator Benzothiadiazole[J]. Journal of Tianjin Agricultural University， 2009， 16（3）: 52-55.

范文靜， 崔新儀， 王學(xué)利. 植物激活劑苯并噻二唑（BTH）的研究進(jìn)展[J]. 天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)， 2009， 16（3）: 52-55.

[13] CHEN Nian-lai， HU Min， QIAO Chang- ping， NAI Xiao-ying， WANG Rui. Effects of BTH， SA， and SiO2 treatment on disease resistance and leaf HRGP and lignin contents of melon seedlings[J]. Scientia Agricultura Sinica， 2010， 43（3）: 535-541.

陳年來， 胡敏， 喬昌萍， 乃小英， 王銳. BTH、SA和SiO2處理對甜瓜幼苗白粉病抗性及葉片HRGP和木質(zhì)素含量的影響[J]. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2010， 43（3）: 535-541.

[14] CHEN Nian-lai， ZHU Zhen-jia， DAI Chun-yan， WANG Chun-lin， AN Cui-xiang. Induction of resistance of melon cultivars with different resistances to powdery mildew after BTH treatment[J]. Journal of Fruit Science， 2010， 27（5）: 764-769.

陳年來， 朱振家， 代春艷， 王春林， 安翠香. BTH誘導(dǎo)不同抗性水平甜瓜抗白粉病的效應(yīng)[J]. 果樹學(xué)報(bào)， 2010， 27（5）: 764 -769.

[15] DAI Chun-yan， ZHU Zhen-jia， AN Cui-xiang， CHEN Nian-lai. Powdery mildew resistant enzyme activities induced with BTH in melon seedlings[J]. Jiangsu J of Agr Sci，2010， 26 （2）: 286-291.

代春艷， 朱振家， 安翠香， 陳年來. 誘抗劑BTH誘導(dǎo)甜瓜幼苗抗白粉病相關(guān)酶活性的研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 2010， 26 （2）: 286 -291.

[16] MA Ke-qi， CHEN Nian-lai， WANG Ming. Melon cultivation theory and practice[M]. Beijing: China Agricultural Press，2001，111-117.

馬克奇， 陳年來， 王鳴. 甜瓜優(yōu)質(zhì)栽培理論與實(shí)踐[M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社， 2001， 111-117.

[17] ZONG Hui， HU Wen-yu， CHEN Gui. Determination of superoxide anion radicals content in fruits by the method of hydrorylamine oxidization[J]. Journal of Shenyang Agricultural University，1998，29（4）: 326-329.

宗會， 胡文玉， 陳貴. 羥胺氧化法測定果實(shí)中含量方法[J]. 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)報(bào)， 1998， 29（4）: 326-329.

[18] LIN Zhi-fang， LI Shuan-shun， LIN Gui-zhu， GUO Jun-yan. The Accumulation of hydrogen peroxide in senescing leaves and chloroplasts in relation to lipid peroxidation[J]. Acta Phytophysiologica Sinica， 1988， 14（1）: 16-22.

林植芳， 李雙順， 林桂珠， 郭俊彥. 衰老葉片和葉綠體中H2O2的積累與膜脂過氧化的關(guān)系[J]. 植物生理學(xué)報(bào)，1988，14（1）: 16-22.

[19] LI He-sheng. Plant Physiology and Biochemistry experimental principle and technology[M]. Beijing: Higher Education Press，2000，213 -214.

李合生. 植物生理生化試驗(yàn)原理與技術(shù)[M]. 北京: 高等教育出版社， 2000， 167-169.

[20] ZOU Qi. Plant Physiology experimental guide[M]. Beijing: China Agricultural Press， 2001: 57-58.

鄒琦. 植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社， 2001: 57-58.

[21] CHEN Nian- lai， ZHU Zhen-jia， AN Cui-xiang， HU Min. Effects of chemical elicitors on several defense -related enzyme activities in muskmelon leaves[J]. Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica， 2008， 28（7）: 1354-1358.

陳年來， 朱振家， 安翠香， 胡敏. 誘抗處理對甜瓜葉片防衛(wèi)酶活性的影響[J]. 西北植物學(xué)報(bào)， 2008， 28（7）: 1354-1358.

[22] CAO S F，ZHENG Y H，YANG Z F，TANG S S，JIN P，WANG K T，WANG X M. Effect of methyl jasmonate on the inhibition of Colletotrichum acutatum infection in loquat fruit and the possible mechanisms[J]. Postharvest Biology and Technology， 2008， 49（2）: 301-307.

[23] IWANO M， CHE F S， GOTO K， TANAKA N， TAKAYAMA S， ISOGAI A. Electron microscopic analysis of the H2O2 accumulation preceding hypersensitive cell death induced by an incompatible strain of Pseudomonas avenae in cultured rice cells[J]. Molecular Plant Pathology， 2002， 3（1）: 1-8.