湯艷

[摘要] 目的 檢測整合素αv及基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）和血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）在人卵巢上皮性癌的表達(dá)，探討整合素與卵巢上皮性癌血管生成及浸潤轉(zhuǎn)移的關(guān)系。方法 采用免疫組織化學(xué)SABC法檢測60例卵巢上皮性癌組織及30例卵巢良性腫瘤中整合素αv、VEGF、MMP-2的表達(dá)。 結(jié)果 60例卵巢上皮性癌中整合素αv、VEGF、MMP-2的陽性表達(dá)率分別為68.33%、73.33%和65.00%，30例卵巢良性腫瘤中三者的陽性表達(dá)率分別為13.33%、50.00%、43.33%，卵巢上皮性癌與卵巢良性腫瘤組織間3種蛋白陽性表達(dá)率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05，P < 0.01，P < 0.01）；整合素αv、VEGF、MMP-2與卵巢上皮性癌的分期、分級(jí)相關(guān)；整合素αv與VEGF及MMP-2的陽性表達(dá)均成正相關(guān)。 結(jié)論 整合素αv在卵巢上皮性癌中高表達(dá)，與臨床分期及分級(jí)相關(guān)；與MMP-2及VEGF的表達(dá)呈正相關(guān)，表明整合素αv促進(jìn)卵巢上皮性癌的侵襲轉(zhuǎn)移。

[關(guān)鍵詞] 卵巢上皮性癌；整合素αv；基質(zhì)金屬蛋白酶-2；血管內(nèi)皮生長因子

[中圖分類號(hào)] R737.31[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號(hào)] 1673-9701（2012）29-0049-03

卵巢癌是婦科惡性腫瘤中死亡率最高的一類腫瘤，而卵巢上皮性癌約占卵巢惡性腫瘤的90%，其發(fā)展快，預(yù)后差，容易發(fā)生腹腔內(nèi)轉(zhuǎn)移。腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的主要生物學(xué)特征，也是腫瘤患者致死的主要原因。整合素是一大類跨膜蛋白細(xì)胞粘附分子家族，整合素表達(dá)變化與卵巢癌的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)，與多種腫瘤的新生血管形成以及瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)。本研究通過檢測整合素αv、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）和基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）在卵巢上皮性癌組織中的表達(dá)情況，探討整合素αv與卵巢癌血管生成及浸潤轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選擇2001～2011年我院收治的60例卵巢上皮性癌病例，其中漿液性腺癌39例，黏液性腺癌21例。按FIGO（1988）標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行手術(shù)分期，Ⅰ期和Ⅱ期32例、Ⅲ期和Ⅳ期28例。高分化（G1）30例，中分化（G2）17例，低分化（G3）13例。卵巢良性上皮性卵巢腫瘤30例。

1.2 檢測方法

采用免疫組化SABC法，實(shí)驗(yàn)步驟按試劑盒說明書進(jìn)行。標(biāo)本經(jīng)甲醛固定，石蠟包埋，切片厚度5 μm。一抗（整合素αv、VEGF及MMP-2）所用濃度均為1：100稀釋液。采用已知陽性切片做陽性對(duì)照，PBS代替一抗作陰性對(duì)照。

1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定

染色結(jié)果判定方法參考潘穎等[1]研究：顯微鏡下觀察細(xì)胞染色情況，細(xì)胞漿或細(xì)胞膜中出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒為其陽性判定標(biāo)準(zhǔn)，有著色細(xì)胞為陽性，無著色細(xì)胞為陰性。光鏡下隨機(jī)觀察10×40視野，每個(gè)視野記錄100個(gè)目標(biāo)細(xì)胞，計(jì)算陽性細(xì)胞的百分比和染色強(qiáng)度評(píng)分。根據(jù)陽性細(xì)胞的比例分為，0分：陽性細(xì)胞率<25%；1分：陽性細(xì)胞率25%～50%；2分：陽性細(xì)胞率50%～75%；3分：陽性細(xì)胞率≥75%。依據(jù)細(xì)胞著色強(qiáng)度計(jì)分，0分：無著色；1分為淺黃色；2分為黃色；3分為棕黃色。細(xì)胞染色數(shù)和細(xì)胞染色強(qiáng)度評(píng)分乘積即為該例標(biāo)本整合素αv、VEGF及MMP-2的免疫組化染色結(jié)果判定分值，以≥1分視為陽性，<1分視為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 卵巢良性腫瘤組織及卵巢上皮性癌中整合素αv、MMP-2及VEGF的表達(dá)結(jié)果

3 討論

惡性腫瘤以侵襲轉(zhuǎn)移和誘導(dǎo)新血管生成為其重要的生物學(xué)特性。目前普遍認(rèn)為腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移首先是由腫瘤細(xì)胞與基底膜粘附，進(jìn)而降解基底膜及細(xì)胞外基質(zhì)，使腫瘤突破自身基底膜，在局部增殖形成轉(zhuǎn)移灶，腫瘤自身基底膜的完整性和腫瘤間質(zhì)血管的形成在腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移中起關(guān)鍵作用[2]。腫瘤血管生長及基質(zhì)破壞已成為近年來腫瘤學(xué)科研究的熱點(diǎn)。

整合素是一種膜鑲嵌糖蛋白，是粘附分子中的一個(gè)重要組成部分。介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）、細(xì)胞與細(xì)胞之間及細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞之間的粘附反應(yīng)。腫瘤細(xì)胞與ECM發(fā)生粘附和附著是腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的第一步，粘附作用涉及到細(xì)胞之間的粘附，細(xì)胞和基底膜的粘附等。整合素表達(dá)變化與卵巢癌的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。與正常卵巢細(xì)胞和良性卵巢腫瘤細(xì)胞相比，卵巢癌細(xì)胞系中整合素α3、α6、αv和β1的表達(dá)顯著增高[3]。整合素αvβ6在正常卵巢組織和良性卵巢腫瘤中不表達(dá)，在交界性、低度和高度惡性的卵巢腫瘤中的表達(dá)逐步增加[4，5]。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，整合素αv在卵巢上皮性癌組織的表達(dá)與卵巢良性腫瘤組織相比，呈顯著高表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01）。且整合素αv的表達(dá)在卵巢上皮性癌晚期（Ⅲ～Ⅳ期）組與卵巢上皮性癌早期（Ⅰ～Ⅱ期）組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。其在卵巢上皮性癌組織中低分化組與高分化組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)整合素αv與VEGF在卵巢上皮性癌組織中的表達(dá)進(jìn)行相關(guān)分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)整合素αv與VEGF的表達(dá)在卵巢上皮性癌組織中呈正相關(guān)。對(duì)整合素αv與MMP-2的表達(dá)進(jìn)行相關(guān)分析后發(fā)現(xiàn)，整合素αv與MMP-2的表達(dá)在卵巢上皮性癌組織中亦呈正相關(guān)。提示整合素αv在卵巢上皮性癌浸潤轉(zhuǎn)移過程中起到一定的作用。

[參考文獻(xiàn)]

[1]潘穎，朱丹，司乃文，等. 卵巢上皮性癌組織RhoC和MMP-2蛋白的表達(dá)及其臨床意義[J]. 吉林大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2008，34（6）：1042-1046.

[2]Egeblad M，Werb Z. New function for the matrix metalloproteinases in cancer progression[J]. Nat Rev Cancer 2002，2（3）：161.

[3]Ahmed N，Riley C，Rice G，et al. Role of integrin receptors for fibronectin，collagen and lam in the regulation of ovrian carcinoma functions in response to a matrix microenvironment[J]. Clin Exp Metastasis，2005；22（5）：391-402.

[4]Ahmed N，Pansino F，Clyde R，et al. Overexpression ofαvβ6 integrin in serous epithelial ovarian cancer regulates extracellular matrix degradation via the plasminogen activation cascade[J]. Carcinogenesis，2002；239（2）：237-244.

[5]Ahmed N，Riley C，Rice GE，et al. αvβ6 integrin-α marker for the malignant potential of epithlial ovarian cancer[J]. J Histochemi Cytochem，2002；50（10）：1371-1380.

[6]Mousa SA，Davis FB，Davis PJ. Hormone-integrin cross talk and angiogenesis and modulation [J]. Imm Unology，2009，9（2）：75.

[7]Sengupta S，Chattopadhyay N，Mitra A，et al. Role of alphavbeta3 integrin receptors in breast tumor[J]. J Exp Clin Cancer Res，2001，20（4）：585-590.

[8]Mahabeleshwar GH，Chen J，F(xiàn)eng W，et al. Integrin affinity modulation in angiogenesis[J]. Cell Cycle，2008，7（3）：335-347.

[9]馬莉，張桂華，戚鳳. 基質(zhì)金屬蛋白酶-2與腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2009，25（10）：1524-1525.

[10]莊蕓，胡華成. MMP-2、MMP-9及其抑制劑在肺癌中的表達(dá)與臨床意義[J]. 江南大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，4（3）：324-327.

[11]張阿麗，王世宣，盧運(yùn)萍，等. 卵巢癌細(xì)胞體外侵襲與血管內(nèi)皮生長因子和明膠酶-A表達(dá)的關(guān)系[J]. 癌癥，2002，21（3）：263-266.

（收稿日期：2012-07-16）