石云龍，孟祥軍

(1.沈陽醫(yī)學(xué)院沈洲醫(yī)院藥劑科，遼寧沈陽110002;2.沈陽醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院化學(xué)教研室)

甲磺酸托烷司瓊是一種外周神經(jīng)原及中樞神經(jīng)系統(tǒng)5-羥色胺3(5-HT3)受體的高效、高選擇性競爭拮抗劑。用于預(yù)防和治療癌癥化療引起的惡心和嘔吐。在控制強致吐化療藥物的急性嘔吐及改善食欲不振方面療效好，不良反應(yīng)少［1］。甲磺酸托烷司瓊注射液現(xiàn)行質(zhì)量標準為國家食品藥品監(jiān)督管理局甲磺酸托烷司瓊注射液試行標準WS-695(X-509)-2002(北京四環(huán)醫(yī)藥科技有限公司)。該標準影響因素較多，試劑配制繁雜且有一定毒害，操作步驟也較繁瑣。該制劑在《中國藥典》化學(xué)藥品標準第二冊中沒有收載。為了更好地控制本產(chǎn)品質(zhì)量，提高甲磺酸托烷司瓊注射液試行標準，保證產(chǎn)品的療效，本文參照國家食品藥品監(jiān)督管理局鹽酸托烷司瓊注射液進口標準(JX20040224)［2］，采用高效液相色譜法對甲磺酸托烷司瓊注射液中有關(guān)物質(zhì)進行研究，建立了快速、準確、專屬性強、靈敏度高的有關(guān)物質(zhì)檢查方法，可更好用于本品的質(zhì)量控制。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器 AUW120D型電子天平 (1/10萬)(日本島津儀器有限公司)、檢測器SPD-20A、高壓泵LC-20A、系統(tǒng)控制器CBM-20Alite高效液相色譜儀 (日本島津儀器有限公司)。

1.1.2 主要試劑 甲磺酸托烷司瓊對照品 (自制工作對照品，純度為99.8%)，甲磺酸托烷司瓊注射液 (山西諾成制藥有限公司)，規(guī)格:2 ml∶6 mg(以甲磺酸托烷司瓊計)。(批號為10101011、10101111、10101211)，乙腈 (色譜純)，甲醇(色譜純)，三乙胺 (色譜純)，水 (純化水)。

1.2 實驗方法

1.2.1 色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相為甲醇－水－乙腈－三乙胺 (750∶200∶50∶0.2);流速為1.0 ml/min;檢測波長284 nm;柱溫為室溫;進樣量20μl。

1.2.2 溶液的配制 供試品溶液:取本品適量，精密稱定，用流動相A溶解并稀釋制成每ml中含有甲磺酸托烷司瓊1 mg的溶液，作為供試品溶液。對照溶液:精密稱取供試品溶液1 ml，置200 ml量瓶中，加流動相A稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。

1.2.3 檢測波長的選擇 取甲磺酸托烷司瓊對照品適量，加流動相溶解并稀釋制成每1ml含有甲磺酸托烷司瓊10μg的溶液，照紫外分光光度法 (中國藥典2010年版二部附錄ⅣA)，在190～400 nm處掃描，甲磺酸托烷司瓊在284 nm處有最大吸收，標準中確定的檢測波長是本品的特征吸收峰，選擇合理，因此確定標準中的檢測波長為284 nm。

2 結(jié)果

2.1 線性實驗 精密稱取甲磺酸托烷司瓊對照品約13.4 mg，置10 ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為儲備液。精密量取貯備溶液0.8、0.9、1.0、1.1、1.2 ml分別置10 ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積 (A)對檢測量 (μg)進行線性回歸 (n=5)，得回歸方程為:Y=2 547.2X+3.456，r=1。結(jié)果表明，以高效液相色譜法測定甲磺酸托烷司瓊的檢測量在1.6～2.4μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

圖1 甲磺酸托烷司瓊標準曲線圖譜

2.2 重復(fù)性實驗 取本品 (批號10101011)，取裝量差異項下的內(nèi)容物，精密量取適量，加流動相稀釋制成每1ml含0.1 mg的溶液，精密量取20 μl注入液相色譜儀，連續(xù)測定6次，記錄色譜圖;另取甲磺酸托烷司瓊對照品適量，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。RSD為0.15%，結(jié)果表明，保留時間及含量測定結(jié)果的 RSD≤2.0%，本方法重復(fù)性良好。

2.3 穩(wěn)定性實驗 取同一供試品溶液分別于配制后0、1、2、3、4 h時內(nèi)按“3.2.1”項下的色譜條件進行測定，連續(xù)測定5次，記錄色譜圖;另取甲磺酸托烷司瓊對照品適量，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。RSD為0.15%，結(jié)論:5次進樣所得的含量結(jié)果的RSD值均＜2.0%，表明供試品溶液在4 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4 耐用性實驗 分別考察流動相比例變化±2%、流動相 pH值變化±0.2、柱溫變化 ±5℃、檢測變化±2 nm、流速變化±5%以及采用三根不同批號的色譜柱進行測定時，每個條件下各測試兩次，可接受的標準為:主成分峰的拖尾因子不得大于2.0，主成分峰與其他成分峰必須達到基線分離;各條件下的含量結(jié)果 (n=18)的相對標準差應(yīng)不大于2.0%。結(jié)論:試驗結(jié)果表明，RSD均小于2%，本測定方法穩(wěn)定，不會受到客觀因素的影響，準確度高。

2.5 準確度實驗 按處方量的80%、100%、120%精密稱取甲磺酸托烷司瓊對照品 (含量99.8%)各3份，加入相同輔料，再加流動相稀釋制成甲磺酸托烷司瓊質(zhì)量濃度分別為0.08、0.10、0.12 mg/ml的溶液，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖;另取甲磺酸托烷司瓊對照品適量，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得X(平均值)=99.99%，RSD=0.51%。

結(jié)論:本法回收率RSD＜2.0%，準確度良好。表明本方法準確可靠。

2.6 含量測定 含量測定結(jié)果10101011、10101111、10101211分別為99.8%、99.8%、99.6%。

3 討論

對于高效液相色譜法含量測定，原采用以甲醇 －水 －乙腈 －三乙胺 (750∶200∶50∶0.3)為流動相，色譜峰形較好，但是考慮到三乙胺加入量較多會對色譜柱損害較大，所以采用以甲醇－水－ 乙腈 － 三乙胺 (750∶200∶50∶0.2)為流動相。

經(jīng)上述方法學(xué)驗證，本標準中最后確定的色譜條件及檢測方法能夠準確檢測產(chǎn)品含量及其相關(guān)雜質(zhì)，符合國家食品藥品監(jiān)督管理局甲磺酸托烷司瓊注射液試行標準中相關(guān)雜質(zhì)的限度要求，可以有效控制產(chǎn)品質(zhì)量。本文建立了專屬、靈敏、快速、準確的甲磺酸托烷司瓊注射液的含量測定，可以更好的控制該藥品的質(zhì)量。

［1］王宏宇，馮奉儀，李青.甲磺酸托烷司瓊預(yù)防化療藥物引起的惡心嘔吐 (Ⅱ期臨床試驗報告) ［J］.中國新藥雜志，2001，10(3):226－227.

［2］鹽酸托烷司瓊注射液.JX20040224.國家食品藥品監(jiān)督管理局.國家進口藥品注冊標準 ［S］.2005，1－3.