辛青松 何韶堅(jiān) 修寧寧 張光輝 陳 杰

1.廣東省東莞康華醫(yī)院，廣東 東莞 523080;2.東莞市塘廈醫(yī)院，廣東 東莞 523000

泌尿生殖道沙眼衣原體 (Chlamydia trachomatis，CT)感染是世界范圍內(nèi)一種常見(jiàn)的性傳播疾病，其發(fā)病率高，流行廣泛，已經(jīng)發(fā)展成較為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。女性，其引起的疾病包括宮頸炎、尿道炎、急性輸卵管炎、盆腔炎、異位妊娠、不孕不育等后果;男性引起尿道炎、附睪炎、前列腺炎等，往往病情反復(fù)，導(dǎo)致不孕不育癥［1－2］。當(dāng)沙眼衣原體侵入生殖道后早期多呈現(xiàn)隱匿感染，表現(xiàn)為無(wú)癥狀或輕微癥狀而不為病人所重視，其感染在我國(guó)有逐漸上升的趨勢(shì)［3］。為了解本地區(qū)CT感染情況，進(jìn)行了本次調(diào)查，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 來(lái)自東莞康華醫(yī)院2010年5月1日至2010年11月30日的泌尿外科、皮膚科、婦產(chǎn)科的標(biāo)本，共1459例。

1.2 主要試劑和儀器 試劑盒為愛(ài)爾蘭Trinity公司，批號(hào)T016107，有效期20101226，酶標(biāo)儀為Clinibio 128C，產(chǎn)地:奧地利;洗板機(jī)為DEM－III，產(chǎn)地:北京拓普。

1.3 標(biāo)本采集 ①女性宮頸樣本采集:先用清潔拭子，清潔宮頸口周圍的分泌物，用拭子插入宮頸管內(nèi)2～3cm，轉(zhuǎn)動(dòng)5～10s后取出，放入傳送管中，于標(biāo)記處折除棉簽桿，蓋緊管蓋。②男性尿道樣本采集:先用清潔拭子清除尿道口周圍分泌物，后用拭子插入男性尿道2～3cm左右，轉(zhuǎn)動(dòng)拭子后取出，于標(biāo)記處折除棉簽桿，蓋緊管蓋 (囑病人采樣前一小時(shí)內(nèi)勿小便)。③男性尿液標(biāo)本:采集5ml初段尿(囑病人在采樣之前一小時(shí)內(nèi)不應(yīng)小便)。

1.4 操作方法

1.4.1 標(biāo)本處理 標(biāo)本及質(zhì)控物，陽(yáng)性、陰性對(duì)照置于預(yù)熱板上95～100℃，15min。

1.4.2 主要操作過(guò)程 分別將質(zhì)控物和陽(yáng)性、陰性對(duì)照及標(biāo)本各100μl加入微孔板置于37±2℃孵育90分鐘;洗板:將抗體試劑100μl加入微孔板中，37℃孵育30分鐘;洗板。再加入100μl酶結(jié)合物，37℃孵育30分鐘。

1.4.3 結(jié)果判斷 分別加入50μlA和B底物;用酶標(biāo)儀(主波長(zhǎng)450～副波長(zhǎng)620nm)雙波長(zhǎng)檢測(cè)各孔吸光值(A)，S/CO＞1為陽(yáng)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，卡方檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

表1 不同科室ELISA法檢測(cè)的CT陽(yáng)性率

經(jīng)卡方檢驗(yàn)，皮膚科和泌尿外科高于婦產(chǎn)科，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.01)。

表2 不同性別ELISA法檢測(cè)的CT陽(yáng)性率

經(jīng)卡方檢驗(yàn)，男性和女性陽(yáng)性檢出率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.01)。21～30歲和31～40歲年齡組明顯高于其它年齡段。

表3 不同年齡段ELISA法檢測(cè)的CT陽(yáng)性構(gòu)成比

3 討論

3.1 沙眼衣原體在宿主細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖，是一類專性細(xì)胞內(nèi)寄生，具有特殊的發(fā)育周期，能通過(guò)細(xì)胞濾器的原核細(xì)胞型微生物。其特殊發(fā)育周期，可觀察到兩種不同的顆粒結(jié)構(gòu)，一種是原體，具有高度的感染性，其形態(tài)多為球形，直徑約為0.3μm;一種是網(wǎng)狀體，沒(méi)有感染性，圓形或不規(guī)則形，直徑約為0.5～1.0μm甚至更大。一般認(rèn)為網(wǎng)狀體在包涵體中以類似普通細(xì)菌的二分裂方式增殖，經(jīng)過(guò)若干次分裂之后，網(wǎng)狀體濃縮成具有堅(jiān)韌細(xì)胞壁的原體，并從細(xì)胞破裂釋放，繼而感染其他細(xì)胞，開(kāi)始新的發(fā)育周期，每個(gè)發(fā)育周期需要48～72小時(shí)［4］。

3.2 本實(shí)驗(yàn)CT陽(yáng)性檢出率為9.87%，與國(guó)內(nèi)其他文獻(xiàn)報(bào)道不一致，王新等報(bào)道為 7.2%［5］，王麗等報(bào)道為33.67%［6］，這可能是由于檢測(cè)的試劑盒不同及CT血清型存在地區(qū)差異或變異等原因造成［5］。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)不同科室的陽(yáng)性檢出率有明顯差異 (x2=35.17，P＜0.01)，皮膚科為25.0%，泌尿外科為17.58%，婦產(chǎn)科為7.60%，皮膚科和泌尿外科遠(yuǎn)高于婦產(chǎn)科，通過(guò)隨訪臨床發(fā)現(xiàn)，過(guò)來(lái)就診皮膚科和泌尿外科的病人大多都是因?yàn)槌霈F(xiàn)有尿道或陰道搔癢等不適癥狀，就診目的明確。除去試劑盒敏感性差異、血清型存在地區(qū)差異或變異、實(shí)驗(yàn)操作原因外，取樣的質(zhì)量對(duì)衣原體的檢測(cè)結(jié)果極為重要［5］。例如我院患者做檢測(cè)時(shí)，通常衣原體和支原體同時(shí)分別取材送檢，由于取第1根拭子時(shí)可能已經(jīng)帶走取樣部位大部分被感染的細(xì)胞，在同樣部位取樣的第2根拭子會(huì)因感染細(xì)胞的減少而使陽(yáng)性率降低。

3.3 本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)不同性別的陽(yáng)性檢出率有明顯差異，男性為18.46%，女性為7.14%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (x2=38.54，P＜0.05)。本實(shí)驗(yàn)與王麗等報(bào)道CT陽(yáng)性檢出率女性高于男性［6］不一致，我們經(jīng)回顧資料分析發(fā)現(xiàn)男性標(biāo)本來(lái)自皮膚科和泌尿外科標(biāo)本量少，提醒我們?cè)谝院驝T檢測(cè)中注意收集更多男性資料，再做進(jìn)一步探究。

3.4 本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)不同年齡段的CT陽(yáng)性構(gòu)成比有明顯差異，主要集中在21～30歲和31～40歲年齡組，與 Araujo的“年齡是泌尿生殖道沙眼衣原體感染的危險(xiǎn)因素”［7］相一致，說(shuō)明沙眼衣原體的感染與年齡有關(guān)，特別是21～40歲是性活動(dòng)頻繁時(shí)期，CT感染主要通過(guò)性傳播途徑而引起，為有效控制病原體的傳染，高危年齡段人群要做到定時(shí)體檢，盡早發(fā)現(xiàn)，及時(shí)治療，不要因?yàn)闆](méi)有癥狀就拒絕檢查和治療，同時(shí)提倡安全套的推廣使用。

3.5 目前CT檢測(cè)中，細(xì)胞培養(yǎng)法的敏感性為80～90%，特異性為100%，是確診沙眼衣原體感染最可靠的方法，是實(shí)驗(yàn)室診斷的金標(biāo)準(zhǔn)［3］，但對(duì)操作環(huán)境及技術(shù)要求高，較難在臨床實(shí)驗(yàn)室推行。酶聯(lián)免疫法和膠體金法檢測(cè)衣原體抗原設(shè)備要求低，一般實(shí)驗(yàn)室即可滿足條件，有著前幾種方法不可比擬的優(yōu)點(diǎn)，操作也較簡(jiǎn)便、快速。尤其是膠體金法時(shí)間更短，1h之內(nèi)便可以出結(jié)果。幸彩梅報(bào)道，雖然在沙眼衣原體檢測(cè)方面，膠體金檢測(cè)卡普遍使用，但方法學(xué)上存在靈敏度低的問(wèn)題，ELISA法較膠體金法敏感度高，對(duì)男性標(biāo)本，陽(yáng)性檢出率較膠體金高［8］。ELISA法敏感度高、快速、操作簡(jiǎn)便，可以為無(wú)癥狀的就診病人提供快速檢測(cè)，更適用于臨床檢測(cè)。

［1］王千秋.重視生殖道沙眼衣原體感染的防治［J］.中華皮膚科雜志，2007，40(5):257－259.

［2］MA.Guven，U.Dilek，O.Pata，S Dilek，P.Ciragil.Prevalance of Chlamydia trachmatis.Ureaplasma urealvticum and Mycoplasma hominis infections in the unexplained infertile women. Arch Gynecol Obstet，2007，276:219－223.

［3］徐麗玲，顧偉鳴，楊陽(yáng)，等.1996－2003年上海市某醫(yī)院泌尿生殖道分泌物標(biāo)本性病檢測(cè)結(jié)果分析［J］.中國(guó)艾滋病性病，2005，11(02):121－124.

［4］倪語(yǔ)星，尚紅.臨床微生物學(xué)與檢驗(yàn)［M］，第4版，北京:人民衛(wèi)生出版社，2008:315－329.

［5］王新，韓麗華.581例泌尿生殖道支原體、衣原體感染耐藥性分析及對(duì)策.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2007，17(6):752－754.

［6］王麗，王金桃.性病就診人群非淋球菌性尿道炎病原學(xué)的感染特征分析.中國(guó)艾滋病性病，2007，13(1):50－51.

［7］Araujo RSC，Guimaraes EMB，Alves MFC，et al.Prevalence and risk factors for Chlamydia trachomatis infection in adolescent females and young women in central Brazil［J］.Eur J Clin Microbiol infect Dis，2006 Jun;25(6):397－400.

［8］幸彩梅.二種沙眼衣原體抗原檢測(cè)方法比較與評(píng)價(jià)［J］.海南醫(yī)學(xué)雜志，2009，20(3):92－93.