向丕元，李中銀

(1.四川省華派生物制藥有限公司，四川簡陽641401；2.四川伊禾動物藥品有限公司，四川成都610066)

隨著養(yǎng)豬規(guī)?；彤a(chǎn)業(yè)化的發(fā)展，我國豬病流行日趨復(fù)雜，臨床表現(xiàn)主要為多病原混合感染和繼發(fā)感染。豬病防控的好壞直接影響豬群的生產(chǎn)成績和養(yǎng)豬經(jīng)濟(jì)效益。豬病防控仍然要堅(jiān)持預(yù)防為主的方針。預(yù)防是一種主動的、積極的、節(jié)約性手段，而治療則是一種被動的、消極的、消耗性補(bǔ)救措施，此外，有些疫病也是無法治好的。疫苗接種則是預(yù)防和控制豬病最經(jīng)濟(jì)、最有效的手段，而疫苗接種的整體效果與疫苗質(zhì)量密切相關(guān)。嚴(yán)格把控疫苗質(zhì)量無疑成為豬病防控工作的重要環(huán)節(jié)，科學(xué)、客觀、公正評價疫苗的免疫效果更是生產(chǎn)實(shí)際中不可回避的問題。

一、疫苗廠家的選擇

1.疫苗廠家必須是經(jīng)農(nóng)業(yè)部獸藥GMP(獸藥生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范)認(rèn)證通過的正規(guī)生產(chǎn)廠家，豬場業(yè)主可通過《中國獸藥信息網(wǎng)》的國家獸藥基礎(chǔ)信息查詢系統(tǒng)進(jìn)行查詢，核對農(nóng)業(yè)部官方網(wǎng)站公布的獸藥生產(chǎn)GMP證書號。

2.疫苗產(chǎn)品必須是經(jīng)農(nóng)業(yè)部審批并下達(dá)有批準(zhǔn)文號的正規(guī)產(chǎn)品，豬場業(yè)主可通過《中國獸藥信息網(wǎng)》的國家獸藥基礎(chǔ)信息查詢系統(tǒng)進(jìn)行查詢，核對農(nóng)業(yè)部官方網(wǎng)站公布的獸藥產(chǎn)品批準(zhǔn)文號。

3.豬場業(yè)主必須深入了解、明白和比較疫苗廠家的產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)控體系和技術(shù)服務(wù)體系，必要時可親臨疫苗廠家考察和交流。

4.產(chǎn)品價格也是豬場業(yè)主疫苗取舍關(guān)注的焦點(diǎn)，只有綜合性價比高的產(chǎn)品才能進(jìn)入豬場業(yè)主的視野。

二、疫苗產(chǎn)品的質(zhì)量評價

(一)任何一個正規(guī)的疫苗生產(chǎn)廠家，每一個疫苗產(chǎn)品生產(chǎn)前必須通過農(nóng)業(yè)部嚴(yán)格審批，獲得獸藥產(chǎn)品批準(zhǔn)文號 批準(zhǔn)文號格式為(獸藥生字)+(xxxx批準(zhǔn)年號)+(xx生產(chǎn)廠家所在省、自治區(qū)、直轄市序號)+(xxx企業(yè)序號)+(xxxx產(chǎn)品編號)，如批準(zhǔn)文號是獸藥生字(2009)221011004的產(chǎn)品，2009是指農(nóng)業(yè)部2009年批準(zhǔn)或復(fù)核審批的，22代表四川省，101是代表四川省華派生物制藥有限公司，1004是指細(xì)胞源的豬瘟活疫苗的產(chǎn)品編號，同類產(chǎn)品生產(chǎn)毒株不同或生產(chǎn)工藝不同，產(chǎn)品編號也不一樣，如批準(zhǔn)文號后4位是1001的產(chǎn)品是指用兔源脾淋組織生產(chǎn)的豬瘟活疫苗的產(chǎn)品編號。這一階段的評價可稱為疫苗產(chǎn)品的研究評價或注冊前評價，包括實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品評價、中試產(chǎn)品評價和臨床試驗(yàn)評價，由國家行業(yè)主管部門嚴(yán)格按法定程序進(jìn)行。

(二)疫苗廠家生產(chǎn)的每一個批號的產(chǎn)品，必須嚴(yán)格執(zhí)行農(nóng)業(yè)部要求的“批檢制”和“批簽發(fā)制” 按照部頒規(guī)程要求，對產(chǎn)品進(jìn)行安檢和效檢，并報(bào)中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所審核簽發(fā)。這一階段的評價可稱為疫苗產(chǎn)品的生產(chǎn)評價或產(chǎn)品評價，由疫苗生產(chǎn)廠家嚴(yán)格按規(guī)程進(jìn)行。

以上兩項(xiàng)評價的重點(diǎn)在于疫苗本身質(zhì)量的穩(wěn)定性、安全性、有效性和可控性。要對疫苗的種毒、工藝、產(chǎn)品、抗體陽性率、抗體平均滴度、抗體持續(xù)時間、疫苗保護(hù)率等因素予以考慮。

(三)豬場業(yè)主如何評價出廠的疫苗

1.污染指標(biāo)的檢測。病毒性活疫苗作為一個生物體，攜帶外源病毒的情況已不是新鮮事。有關(guān)豬場或機(jī)構(gòu)在普通藍(lán)耳病活疫苗中檢測出了高致病性豬藍(lán)耳病病毒，在高致病性豬藍(lán)耳病活疫苗中檢測出了普通藍(lán)耳病病毒，在豬瘟疫苗中檢測出了牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)和豬圓環(huán)病毒(PCV)。對疫苗中外源病毒的污染檢測已日益受到業(yè)內(nèi)有關(guān)專家和行業(yè)主管部門的廣泛關(guān)注，因?yàn)楹型庠床《疚廴镜囊呙?，不僅影響疫苗免疫效果的表達(dá)，而且免疫接種過程就悄然成為了疫病傳播的推手。近年來我國新發(fā)的外來動物疫病除進(jìn)口動物引種檢疫把關(guān)不嚴(yán)外，進(jìn)口動物疫苗(特別是活疫苗)無疑也成了“進(jìn)口”外來疫病并使之傳播的“幫兇”。我國已有疫苗生產(chǎn)企業(yè)提出：豬瘟疫苗要確保支原體和牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、豬圓環(huán)病毒(PCV)、偽狂犬病毒(PRV)、豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV)、豬細(xì)小病毒(PPV)、藍(lán)舌病病毒(BTV)、輪狀病毒(RV)等外源病毒零污染；偽狂犬疫苗要確保支原體和牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、豬圓環(huán)病毒(PCV)、豬瘟病毒(CSFV)、豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV)等外源病毒零污染；普通藍(lán)耳活疫苗要確保支原體和牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、豬圓環(huán)病毒(PCV)、豬瘟病毒(CSFV)、偽狂犬病毒(PRV)、高致病性豬藍(lán)耳病病毒(HP-PRRSV)等外源病毒零污染。據(jù)調(diào)查，具有相關(guān)機(jī)構(gòu)、設(shè)備和人員等技術(shù)支撐的成都正大農(nóng)牧食品有限公司和四川鐵騎力士集團(tuán)目前已開展了豬用疫苗部分污染指標(biāo)的檢測，對疫苗質(zhì)量的要求比較嚴(yán)格。

2.抗原含量的檢測。在確保疫苗安全性高的前提下，抗原含量與免疫抗體水平成正相關(guān)。大多數(shù)病毒性活疫苗的效力是通過測定其每頭份細(xì)胞半數(shù)感染量(TCID50)高低來評判，如偽狂犬活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗等；豬瘟活疫苗的效力檢驗(yàn)則通過測定其每頭份兔體感染量(RID)的高低來評判；豬乙型腦炎活疫苗是通過活病毒數(shù)量(蝕斑形成單位，PFU)來評判，有些細(xì)菌性活疫苗是以活菌計(jì)數(shù)(菌落形成單位，CFU)來評判，如仔豬副傷寒活疫苗。目前，成都正大農(nóng)牧食品有限公司和四川鐵騎力士集團(tuán)開展了豬用疫苗抗原含量的檢測，而且對所用疫苗實(shí)行“批檢制”，確保所用疫苗抗原含量的相對穩(wěn)定。

三、疫苗免疫效果的評價

免疫效果評價可稱為疫苗產(chǎn)品的應(yīng)用評價或使用評價，包括疫苗質(zhì)量、影響因素、免疫學(xué)反應(yīng)(體液免疫和細(xì)胞免疫)、流行病學(xué)調(diào)查、免疫效率、經(jīng)濟(jì)效益等綜合評價。此評價的重點(diǎn)在于疫苗免疫后，其免疫措施的影響、安全、效力和效果。要對疫苗質(zhì)量、豬只健康、衛(wèi)生狀況、生態(tài)環(huán)境、流行病學(xué)狀況、免疫程序和飼養(yǎng)管理等因素予以考慮。豬場業(yè)主往往對疫苗評價，只關(guān)注疫苗免疫后某一特定時點(diǎn)的抗體水平，有技術(shù)支撐的豬場自行檢測，沒有技術(shù)支撐的豬場則委托相關(guān)機(jī)構(gòu)檢測。

(一)影響免疫效果的因素 豬群接種疫苗后，仍然出現(xiàn)相應(yīng)疫病的臨床表現(xiàn)、亞臨床感染或持續(xù)感染等免疫失敗現(xiàn)象，一些中、小規(guī)模豬場業(yè)主常常簡單地把免疫失敗歸咎于疫苗質(zhì)量，而忽略了造成免疫失敗的其他因素。在排除疫苗質(zhì)量本身的原因外，應(yīng)從以下諸多因素予以分析。

1.疫苗的儲存及運(yùn)輸、免疫方法等都會影響到疫苗的質(zhì)量和免疫效果?；钜呙鐟?yīng)在冷鏈條件下儲存，儲存溫度越低，保存期越長，運(yùn)輸應(yīng)有冷藏包裝，疫苗稀釋后應(yīng)在3小時內(nèi)用完；滅活疫苗應(yīng)在2-8℃儲存，切忌凍結(jié)。大多數(shù)疫苗是采用肌肉注射方法免疫，有些疫苗可采用口服，口服免疫應(yīng)增加劑量(2～4倍)，如仔豬副傷寒活疫苗、敗血鏈球菌活疫苗等，喘氣病活疫苗應(yīng)采取胸腔或肺內(nèi)注射免疫，胃腹輪三聯(lián)活疫苗應(yīng)于后海穴注射免疫。

2.母源抗體的干擾。首免時沒有檢測母源抗體水平(本底抗體)，免疫程序不盡科學(xué)、合理。

3.疫苗間的相互干擾和影響。有些疫苗(特別是活疫苗)是不能2種以上同時免疫接種的，藍(lán)耳病活疫苗免疫接種后需間隔10天以上才能接種豬瘟活疫苗。

4.免疫抑制病的影響。豬瘟、藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒病、附紅細(xì)胞體等病都會損害豬的免疫系統(tǒng)。特別是豬瘟、藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒病對豬免疫系統(tǒng)的損害最為嚴(yán)重，它們可破壞豬只淋巴細(xì)胞，使抗體產(chǎn)生受阻。

5.操作不規(guī)范。針頭選擇不當(dāng)，注射接種不到位。

6.不同公司提供的試劑盒，其檢測結(jié)果也有較大差異。如美國IDEXX公司、法國LSI公司、韓國JBT公司提供的豬瘟抗體監(jiān)測試劑盒(阻斷ELISA)，其特異性、敏感性和符合率都不盡相同。而國產(chǎn)豬瘟正向間接血凝(IHA)監(jiān)測試劑盒的符合率最低，規(guī)模豬場豬瘟免疫抗體監(jiān)測幾乎不使用此方法。

7.其他因素。豬群應(yīng)急反應(yīng)大，飼料發(fā)霉變質(zhì)、霉菌毒素含量過高導(dǎo)致豬只出現(xiàn)免疫抑制；豬只飲用水質(zhì)差、豬舍布局不合理、豬只密度太大、空氣流通狀況不好、仔豬保暖措施不到位、環(huán)境衛(wèi)生狀況差等因素，都可能引起豬群免疫功能下降；免疫接種前后5～7 d內(nèi)使用抗菌、抗病毒藥物也會影響豬的免疫應(yīng)答。

(二)科學(xué)評價疫苗免疫效果 疫苗出廠前的質(zhì)量把控由生產(chǎn)企業(yè)本身和其行業(yè)主管部門嚴(yán)格監(jiān)管。有條件的規(guī)模豬場要把疫苗的污染指標(biāo)、抗原含量指標(biāo)的檢測工作列入議事日程，最好能推行疫苗產(chǎn)品污染指標(biāo)和抗原含量指標(biāo)的“批檢制”。對疫苗免疫效果評價的理解不能過于狹義，不能只注意對疫苗本身的質(zhì)量評價，而忽略了疫苗免疫效果與多種影響因素相關(guān)性的綜合評價，更不能簡單地將免疫后某一特定時點(diǎn)的靜態(tài)抗體水平和抗體陽性率的檢測標(biāo)準(zhǔn)作為唯一的評價指標(biāo)。因?yàn)樵谥T多因素的影響下，抗體水平和抗體陽性率會發(fā)生變化，它們是一個綜合效應(yīng)的動態(tài)過程。因此，疫苗免疫效果評價方法和指標(biāo)應(yīng)充分關(guān)注多因素相互影響的動態(tài)趨勢。