摘 要 從皮膚點(diǎn)狀出血的日本鰻鱺中分離出產(chǎn)酸克雷伯氏菌菌株B12，經(jīng)福爾馬林滅活后，注射新西蘭兔，制備免疫抗血清，G蛋白親和層析純化得到抗體（IgG），以固定于微孔板的IgG作為捕獲抗體，Eu3+螯合物標(biāo)記的IgG作為檢測(cè)抗體，建立了產(chǎn)酸克雷伯氏菌的夾心型時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)法（TRFIA），并研究了抗體濃度、免疫時(shí)間及離解時(shí)間對(duì)檢測(cè)的影響。本方法檢出限為5.0×103 cfu/mL； 線性范圍5.0×103～1.0×107 cfu/mL，相關(guān)系數(shù)達(dá)0.99以上。交叉反應(yīng)表明其具有較高的特異性，板內(nèi)和板間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為5.64%和2.27%。將本方法標(biāo)準(zhǔn)化后，檢測(cè)了29份人工感染的日本鰻鱺樣品，包括鰓、腎、腸、肝和肌肉組織，結(jié)果滿意。

關(guān)鍵詞 時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)； 產(chǎn)酸克雷伯氏菌； 日本鰻鱺