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        裂解加熱—熒光毛細(xì)管法快速測(cè)定血液紅細(xì)胞內(nèi)丙酮酸

        2012-04-12 00:00:00周朗李喬婧李永生高秀峰
        分析化學(xué) 2012年11期

        摘 要 在常規(guī)紅細(xì)胞處理方法中,用生理鹽水對(duì)紅/白細(xì)胞清洗分離會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)丙酮酸外滲,造成丙酮酸測(cè)定值不能反映細(xì)胞內(nèi)丙酮酸的真實(shí)濃度。本研究設(shè)計(jì)了“氯化銨裂解液特異性裂解紅細(xì)胞-離心分離白細(xì)胞/血小板-加熱去除蛋白-丙酮酸酶熒光毛細(xì)管分析”方法。最優(yōu)化的血樣預(yù)處理?xiàng)l件是:以16000 r/min離心血液1 min,獲得紅細(xì)胞;裂解液裂解紅細(xì)胞后在100 ℃下加熱5 min。對(duì)比實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),本方法優(yōu)于其它紅細(xì)胞處理法。本研究中丙酮酸測(cè)定方法的線性范圍為10~120 mmol/L; 檢出限為0.98 mmol/L;靈敏度為5.64 F L/mmol,高于文獻(xiàn)方法60倍以上;測(cè)定紅細(xì)胞內(nèi)丙酮酸值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2.8% (n=11),回收率在98.3%~104.1%之間。

        關(guān)鍵詞 酶熒光毛細(xì)管分析; 丙酮酸; 紅細(xì)胞; 裂解加熱法

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