陳妙蘭
(江門市質(zhì)量計(jì)量監(jiān)督檢測所,廣東 江門 529000)
近年來食品安全問題日益凸現(xiàn),據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)估計(jì),全球每年發(fā)生食源性疾病約十億人次,發(fā)達(dá)國家(包括美國)發(fā)生食源性疾病的概率也相當(dāng)高,平均每年有 1/3的人群感染食源性疾病。因此食品安全問題已成為人類面臨的最大健康問題,食品安全監(jiān)督檢驗(yàn)工作越來越受到重視,各種新的分析測試儀器也被不斷開發(fā)[1]。采用高效、可靠的分析技術(shù)檢測食品中的有害物質(zhì),杜絕超標(biāo)食品進(jìn)入市場是降低食品安全風(fēng)險(xiǎn)的有效手段之一。高效液相色譜法是一項(xiàng)發(fā)展前景非常好的檢測技術(shù),尤其是在食品安全指標(biāo)快速檢測中的表現(xiàn)尤為出色。它融合了液相和氣相兩種色譜分析方法的優(yōu)勢,因而功效更明顯,在食品檢測工作中被越來越廣泛的應(yīng)用。
高效液相色譜法(HPLC)是目前應(yīng)用廣泛的分離、分析、純化有機(jī)化合物(包括能通過化學(xué)反應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)化合物的無機(jī)物)的有效方法之一。高效液相色譜儀型號很多,但主要部件和結(jié)構(gòu)系統(tǒng)相同。高效液相色譜儀裝置示意圖,見圖1。
HPLC法適宜于分離分析高沸點(diǎn)、熱不穩(wěn)定性、分子量比較大的物質(zhì),因而已廣泛應(yīng)用于核酸、稠環(huán)芳烴、高聚物、藥物的分析。近年來,HPLC也不斷引入食品中對有毒害成分的分析,明顯提高了分析速度和靈敏度。HPLC比液相柱層析法和氣相色譜法先進(jìn),因而完全可以大范圍的在食品快速檢測中應(yīng)用。筆者試述了幾種常用的應(yīng)用技術(shù)分析方案,供同行們學(xué)習(xí)交流。
高效液相色譜法應(yīng)用于食品分析中自80年代就已經(jīng)有過試驗(yàn)了,如國家標(biāo)準(zhǔn)《食品衛(wèi)生檢驗(yàn)方法理化部分》GB/T 5009-1996中就有關(guān)于HPLC法的相關(guān)說明。
3.1.1 在乳品分析中的應(yīng)用
牛奶以及各種奶制品富含糖、脂、蛋白質(zhì)、維生素等營養(yǎng)以及強(qiáng)化的營養(yǎng)物質(zhì),應(yīng)用HPLC技術(shù)可以很好的檢測奶制品所含的各種營養(yǎng)成分及其含量,如在低分子糖類的測定中通常采取氨基鍵合柱、糖類分析專用柱進(jìn)行分離,或者采取低成本非特定色譜柱測定低分子糖這一方式。
3.1.2 在肉制品分析中的應(yīng)用
腌臘肉制品通常含有一定量的硝酸鹽以及亞硝酸鹽,這些添加劑往往作為發(fā)色劑來使用,而這些物質(zhì)如果使用量超過規(guī)定要求或者在與肉品的相互作用下容易生成 N-亞硝胺。這是一種有毒的物質(zhì),極易引發(fā)食用者患肝癌、結(jié)腸癌等。以往我們在使用氣相色譜法耗時(shí)長,而使用先進(jìn)的高效液相色譜法僅僅需要13 min左右。
N-亞硝胺,在測定腌臘肉品中常添加硝酸鹽或亞硝酸鹽作發(fā)色劑用,由于添加量過大或自身的還原作用在肉品中生成N-亞硝胺。N-亞硝胺可誘發(fā)肝癌、結(jié)腸癌等。某些N-亞硝胺化合物,如N-亞硝基二甲胺、N-亞硝基二乙胺、N-亞硝基四氫吡咯等也是一類致癌物質(zhì)。過去采用氣相色譜法測定食物中揮發(fā)性亞硝胺,其中僅色譜測定一步便需耗時(shí)1 h,而采用高效液相色譜法則只需要13 min。
3.1.3 在其他食品分析中的應(yīng)用
HPLC可以有效檢測各種食品,包括蔬果、熟食制品、方便食品等的營養(yǎng)成分及含量、食品添加劑、農(nóng)藥殘留以及是否含有有毒性物質(zhì)、違禁物質(zhì)等情況,真正做到讓食品檢測質(zhì)量過硬,讓消費(fèi)者放心。
如今翻翻各種食品的外包裝,經(jīng)常會在食品成分處發(fā)現(xiàn)一長串的叫不出來名字的物質(zhì),各種各樣的食品添加劑能夠大大提高原有食品所含成分的質(zhì)量以及營養(yǎng)價(jià)值、改善食品外觀、延長食品保藏期、減少腐壞變質(zhì)問題等等。據(jù)初步統(tǒng)計(jì),我國目前有食品添加劑20個(gè)大類,將近1 000個(gè)細(xì)分品種。對食品添加劑我們應(yīng)該客觀看待,不是所有的添加劑都對人類健康有害,例如,過去豆腐的主要添加劑就是鹵水,雖然這種物質(zhì)是有毒的,但是因?yàn)槲覀兊挠昧亢苌?,而且豆腐的凝固環(huán)節(jié)這種物質(zhì)在當(dāng)時(shí)是必須的,且我國已經(jīng)使用了上千年,因而我們不能說添加劑是完全應(yīng)該禁止的。另外,我們還可以對一些營養(yǎng)成分不足的食品添加必要的所缺乏的營養(yǎng)成分,如在牛奶中加入VA/VD等,這樣可以補(bǔ)充食品的營養(yǎng)缺乏或功能不全,促進(jìn)我們的健康。再如為了加強(qiáng)酸奶的功能,我們往往會在里面加入一些其他的有益菌種,如對于成人來說體內(nèi)缺乏雙歧桿菌,通過食品添加劑的補(bǔ)充,更完善了其作用。另外還有些食品本身營養(yǎng)成分不全面,我們在其中加入多種維生素和礦物質(zhì),就會更有益健康,因此我們對食品添加劑應(yīng)該本著合理使用的態(tài)度,防止出現(xiàn)不加限制的使用,這樣才能真正發(fā)揮食品對人體的作用。
又如食品甜味劑,甜味劑通常泛指人工合成的非營養(yǎng)型甜味劑,常見的有糖精鈉、環(huán)己氨基磺酸鈉(甜蜜素)、乙?;前匪徕洠ò踩郏┖吞於1奖奔柞ィㄌ鹞端睾桶⑺拱吞穑┑取F渲刑蔷c由于價(jià)格便宜,因而在食品中廣泛應(yīng)用,然而在使用過程中一定要控制使用量,否則會有損健康。當(dāng)前還有幾種天然的甜味劑如阿斯巴甜、木糖醇等,這些甜味劑效果好,無毒無害,但是價(jià)格稍貴。用液相色譜-氣相色譜聯(lián)用技術(shù)能夠有效檢測各種食品中甜味劑的使用情況,分析結(jié)果準(zhǔn)確,出結(jié)果時(shí)間短,實(shí)踐證明值得被廣泛應(yīng)用。
還有一種常見的食品添加劑,即食品防腐劑,常見的防腐劑有苯甲酸及其鈉鹽、山梨酸及其鈉鹽等,食品防腐劑對人體健康的負(fù)面影響很明顯,因而對其的檢測是非常嚴(yán)格的。利用HPLC技術(shù)能夠在同一時(shí)間檢測食品中山梨酸、苯甲酸、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸異丙酯、對羥基苯甲酸丙酯和對羥基苯甲酸丁酯,且檢測結(jié)果非常準(zhǔn)確。
應(yīng)用HPLC技術(shù)能夠有效對食品農(nóng)藥、獸藥殘留進(jìn)行檢測,且結(jié)果準(zhǔn)確。農(nóng)藥殘留是由于使用農(nóng)藥而導(dǎo)致的在食品、農(nóng)產(chǎn)品或動物飼料中殘留的一定物質(zhì),國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)都有明確的藥物最大殘留量,超過其值有可能對人體造成危害[2]。如筆者運(yùn)用HPLC柱后衍生熒光檢測法,測定蘋果、梨、桃、葡萄、香蕉和芒果等水果樣品中涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威、三羥基克百威、涕滅威、克百威和甲萘威7種氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留量,結(jié)果7種農(nóng)藥3種不同濃度平均添加回收率在72.5%~116.2%,最低檢出限為0.003 7~0.007 4 mg/kg。
食品中含有大量的微生物以及微生物的代謝物,其中很多比如黃曲霉素等對人體是有害的,當(dāng)食品中的這些代謝物超標(biāo)就會影響到人們的食品安全。高效液相色譜法在食品微生物的檢測中有著較廣泛的應(yīng)用,其原理就是依據(jù)不同微生物的化學(xué)組成或其產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物,利用HPLC法檢測可直接分析各種體液中的各種細(xì)菌代謝產(chǎn)物,確定病原微生物的特異性化學(xué)組分,從而確定被檢測食品中是否存在微生物超標(biāo)的情況以及是否威脅到人們的健康等。
綜上所述,高效液相色譜法技術(shù)有著很好的發(fā)展前景,是一種高效的現(xiàn)代化分析檢測方法,具有分離速度快、檢測效率高、重現(xiàn)性好的特點(diǎn)。近年在食品檢測上應(yīng)用后,擴(kuò)大了檢測范圍,提高了分析水平,尤其對食品中殘留的微量、痕量有毒有害物質(zhì),能快速、準(zhǔn)確的分析出來,進(jìn)一步提高了食品衛(wèi)生質(zhì)量,保障了食品安全和人民身體健康,促進(jìn)了食品出口。因而完全可以大范圍的應(yīng)用,而且隨著這項(xiàng)技術(shù)的不斷成熟與完善,這項(xiàng)技術(shù)也會越來越被專業(yè)人士熟練地掌握,有著很好的發(fā)展前景。
圖1 高效液相色譜儀裝置示意圖
[1]鄭玲,李麗華.高效液相色譜法測定食品中的甜蜜素[J].化學(xué)分析計(jì)量,2005(03).
[2]黃國宏.高效液相色譜技術(shù)在食品分析中的應(yīng)用[J].食品工程,2006(4).