范 磊 蔣法成 陳樹霞 蔣鎖俊

（1江蘇省淮安市清浦區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所，江蘇省淮安市 223002；2江蘇省淮安市動物疫病預防控制中心，江蘇省淮安市 223001）

江蘇省淮安市清浦區(qū)豬細小病毒病血清學調(diào)查

范 磊1蔣法成2陳樹霞2蔣鎖俊2

（1江蘇省淮安市清浦區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所，江蘇省淮安市 223002；2江蘇省淮安市動物疫病預防控制中心，江蘇省淮安市 223001）

為了解清浦區(qū)生豬細小病毒感染情況，作者應用ELISA試驗對該區(qū)沒有免疫豬細小病毒疫苗的5個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的規(guī)模豬場和散養(yǎng)戶共計133份血清樣品進行抗體監(jiān)測，結(jié)果顯示：規(guī)模場和散養(yǎng)戶的豬均感染豬細小病毒，被檢的5個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，有3個鄉(xiāng)鎮(zhèn)規(guī)模場和散養(yǎng)戶檢出細小病毒抗體，2個鄉(xiāng)鎮(zhèn)沒有檢出，檢出率達3/5，說明該區(qū)大部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)規(guī)模豬場和散養(yǎng)戶的豬已被細小病毒污染。規(guī)模豬場和散養(yǎng)戶抗體陽性檢出率分別是8.99%和9.09%，個別鄉(xiāng)鎮(zhèn)陽性率高達20%，須引起高度重視。

抗體監(jiān)測；豬細小病毒；清浦區(qū)；淮安

豬細小病毒病是由豬細小病毒引起妊娠母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、木乃伊胎和弱仔為特征的繁殖障礙性疾病，給養(yǎng)豬業(yè)造成了重大經(jīng)濟損失。為準確掌握豬細小病毒病在江蘇省淮安市清浦區(qū)的流行動態(tài)，制定科學合理的防控方案，筆者于2012年4月份對清浦區(qū)5個鄉(xiāng) （鎮(zhèn)）部分規(guī)模養(yǎng)殖場和散養(yǎng)戶隨機采取133份豬血清進行了血清學檢測，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1診斷試劑

豬細小病毒ELISA抗體檢測試劑盒購自江蘇力通生物技術有限公司，武漢科前動物生物制品有限責任公司生產(chǎn)，批號：111205。

1.1.2 被檢血清

豬血清133份，采自清浦區(qū)城南、和平、武墩、黃碼、鹽河5個鄉(xiāng) （鎮(zhèn)），每鄉(xiāng) （鎮(zhèn)）選擇1個規(guī)模豬場和3家散養(yǎng)戶，前腔靜脈采血后自然凝固，分離血清，各血清樣品清亮，無溶血，置冰箱4℃保存?zhèn)溆谩Ｋ斜粰z測豬場和散養(yǎng)戶均未免疫豬細小病毒疫苗。

1.2 方法

1.2.1 配制洗滌液

將試劑盒中的濃縮洗滌液恢復至25℃左右，搖動使沉淀的鹽溶解，然后用蒸餾水作20倍稀釋。

1.2.2 樣品稀釋

在血清稀釋板中按1︰40的體積稀釋待檢血清樣品 （195μL樣品稀釋液中加5μL待檢血清樣品）。

1.2.3 對照稀釋

在血清稀釋板中按1︰4分別稀釋陽性對照和陰性對照 （180μL樣品稀釋液中加60μL對照血清）。

1.2.4 檢測步驟

取抗原包被板，分別將稀釋好的待檢血清和對照各取100μL加入到抗原包被板孔中，待檢樣品做1孔，陰性對照和陽性對照各設2孔。輕輕振勻孔中樣品，置37℃溫育30分鐘。

甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀釋好的洗滌液200μL，靜置3分鐘倒掉，再在吸水紙上拍干，共計洗滌5次。

每孔加羊抗豬酶標二抗 100μL，置37℃溫育30分鐘。

洗滌5次，方法同上。每次均在干凈吸水紙上拍干。

每孔先加底物液A一滴 （50μL）、再加底物液B一滴 （50μL），混勻，18℃～25℃避光顯色10分鐘。

每孔加終止液一滴 （50μL），10分鐘內(nèi)測定結(jié)果，測定前在震蕩器上輕輕震動一下。

1.3 結(jié)果判定

在酶標儀上測各孔 OD630nm值。試驗成立的條件是陽性對照孔平均OD630nm 值≥0.6， 陰性對照孔平均OD630nm 值必須＜0.3。 樣品 OD630nm值≥0.4，判為陽性；樣品OD630nm值＜0.4，判為陰性。

2 監(jiān)測結(jié)果

監(jiān)測結(jié)果詳見表1、表2。

3 討論

3.1 監(jiān)測結(jié)果分析

本次監(jiān)測的生豬，都是育肥豬和仔豬，沒有母豬和種公豬，從監(jiān)測結(jié)果可以看出，目前清浦區(qū)規(guī)模場和散養(yǎng)戶均感染豬細小病毒，被檢的5個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，有3個鄉(xiāng)鎮(zhèn)均檢出細小病毒抗體，2個鄉(xiāng)鎮(zhèn)沒有檢出，檢出率達3/5，說明大部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬場和散養(yǎng)戶已被細小病毒污染。通過對陽性率較高的鄉(xiāng)鎮(zhèn)進行跟蹤調(diào)查，現(xiàn)其規(guī)模場中母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎等臨床癥狀較多，這可能與豬細小病毒病感染有關。同時在散養(yǎng)戶中檢出了陽性抗體豬只，說明該病已經(jīng)在本地擴散蔓延。

清浦區(qū)規(guī)?；B(yǎng)殖場和散養(yǎng)戶未經(jīng)免疫豬只的細小病毒病抗體陽性檢出率分別是8.99%和9.09%，兩者抗體陽性率差異不顯著 （P＞0.05），個別鄉(xiāng)鎮(zhèn)陽性率高達20%，須引起高度重視。

表1清浦區(qū)各鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬細小病毒病血清學檢測結(jié)果

表2清浦區(qū)規(guī)模豬場和散養(yǎng)戶豬細小病毒病感染率

33..22 感染原因分析

3.2.1檢疫不嚴

最近幾年，生豬養(yǎng)殖經(jīng)濟效益很高，清浦區(qū)大量從外地引進種豬和仔豬，由于檢疫不嚴格而將疫病引入。

3.2.2豬場污染情況

規(guī)模豬場飼養(yǎng)密度大，有利于病原的傳播。散養(yǎng)戶的生豬雖然飼養(yǎng)密度較小，流通少，接觸傳染源機會小，但是，多數(shù)散養(yǎng)戶的仔豬都是購自規(guī)模豬場和傳統(tǒng)母豬養(yǎng)殖戶，仔豬的出生地多已污染細小病毒，因此，散養(yǎng)戶也檢出病毒抗體就不足為奇了。

3.2.3未免疫細小病毒病疫苗

由于多數(shù)規(guī)模豬場和散養(yǎng)戶沒有認識到豬細小病毒病危害的嚴重性[1]，未將其納入免疫計劃范圍，導致免疫抗體缺失，細小病毒乘虛而入，帶毒生豬不斷增多。

3.2.4缺乏監(jiān)測

和平、鹽河和城南3鄉(xiāng)鎮(zhèn)被檢豬場都是飼養(yǎng)多年的老場，有生豬養(yǎng)殖的傳統(tǒng)和歷史，本次均有抗體陽性檢出，可能和該地養(yǎng)殖時間長及檢疫與消毒不夠嚴格有關，歷史上從未開展過細小病毒的監(jiān)測。未檢出的2個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，其被檢規(guī)模場都是剛建設兩年的新場，其豬場選址和規(guī)劃布局科學合理，消毒制度完善且落實到位，豬場管理者養(yǎng)殖、防疫技術水平較高。染。通過對陽性率較高的鄉(xiāng)鎮(zhèn)進行跟蹤調(diào)查，現(xiàn)其規(guī)模場中母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎等臨床癥狀較多，這可能與豬細小病毒病感染有關。同時在散養(yǎng)戶中檢出了陽性抗體豬只，說明該病已經(jīng)在本地擴散蔓延。

清浦區(qū)規(guī)?；B(yǎng)殖場和散養(yǎng)戶未經(jīng)免疫豬只的細小病毒病抗體陽性檢出率分別是8.99%和9.09%，兩者抗體陽性率差異不顯著 （P＞0.05），個別鄉(xiāng)鎮(zhèn)陽性率高達20%，須引起高度重視。

3.2.1檢疫不嚴

最近幾年，生豬養(yǎng)殖經(jīng)濟效益很高，清浦區(qū)大量從外地引進種豬和仔豬，由于檢疫不嚴格而將疫病引入。

3.2.2豬場污染情況

規(guī)模豬場飼養(yǎng)密度大，有利于病原的傳播。散養(yǎng)戶的生豬雖然飼養(yǎng)密度較小，流通少，接觸傳染源機會小，但是，多數(shù)散養(yǎng)戶的仔豬都是購自規(guī)模豬場和傳統(tǒng)母豬養(yǎng)殖戶，仔豬的出生地多已污染細小病毒，因此，散養(yǎng)戶也檢出病毒抗體就不足為奇了。

3.2.3未免疫細小病毒病疫苗

由于多數(shù)規(guī)模豬場和散養(yǎng)戶沒有認識到豬細小病毒病危害的嚴重性[1]，未將其納入免疫計劃范圍，導致免疫抗體缺失，細小病毒乘虛而入，帶毒生豬不斷增多。

3.2.4缺乏監(jiān)測

和平、鹽河和城南3鄉(xiāng)鎮(zhèn)被檢豬場都是飼養(yǎng)多年的老場，有生豬養(yǎng)殖的傳統(tǒng)和歷史，本次均有抗體陽性檢出，可能和該地養(yǎng)殖時間長及檢疫與消毒不夠嚴格有關，歷史上從未開展過細小病毒的監(jiān)測。未檢出的2個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，其被檢規(guī)模場都是剛建設兩年的新場，其豬場選址和規(guī)劃布局科學合理，消毒制度完善且落實到位，豬場管理者養(yǎng)殖、防疫技術水平較高。

表1清浦區(qū)各鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬細小病毒病血清學檢測結(jié)果

表2清浦區(qū)規(guī)模豬場和散養(yǎng)戶豬細小病毒病感染率

4 防控對策

4.1 強化疫病檢疫

本病尚無有效治療方法，只能采用對癥療法，預防本病最有效的方法是堅持自繁自養(yǎng)。必須要從場外進豬時應加強檢疫，血清學檢測為陰性方可引進，引進隔離觀察2周后再進行1次檢測，證實為陰性后再混群飼養(yǎng)。

4.2 加強豬場凈化

感染豬場應將發(fā)病母豬、仔豬淘汰，并用血清學方法對全群進行檢查，對檢測陽性豬應采取隔離或淘汰[2]，豬場環(huán)境、用具，嚴格消毒。

4.3 及時科學免疫

根據(jù)豬場抗體水平監(jiān)測情況，確定首免時間，間隔3周再加強免疫，有良好的預防效果。

4.4 做好疫病監(jiān)測

由于豬場中各種潛伏疫病引起豬的免疫抑制，從而導致其它疫病相繼發(fā)生，長期監(jiān)測，并采取恰當?shù)拇胧┦鞘直匾?。尤其是?guī)?；B(yǎng)豬場，一定

本病尚無有效治療方法，只能采用對癥療法，預防本病最有效的方法是堅持自繁自養(yǎng)。必須要從場外進豬時應加強檢疫，血清學檢測為陰性方可引進，引進隔離觀察2周后再進行1次檢測，證實為陰性后再混群飼養(yǎng)。

感染豬場應將發(fā)病母豬、仔豬淘汰，并用血清學方法對全群進行檢查，對檢測陽性豬應采取隔離或淘汰[2]，豬場環(huán)境、用具，嚴格消毒。

根據(jù)豬場抗體水平監(jiān)測情況，確定首免時間，間隔3周再加強免疫，有良好的預防效果。

由于豬場中各種潛伏疫病引起豬的免疫抑制，從而導致其它疫病相繼發(fā)生，長期監(jiān)測，并采取恰當?shù)拇胧┦鞘直匾?。尤其是?guī)?；B(yǎng)豬場，一定要定期進行疫病監(jiān)測，及時了解豬場疫病流行病學情況和疫苗的免疫效果，同時實行嚴格的生物安全措施，做好各種疫病的預防和控制工作[3]。要定期進行疫病監(jiān)測，及時了解豬場

[1]鄧位喜，涂麗君，曾貴英，等.遵義地區(qū)豬細小病毒病的血清學調(diào)查.豬業(yè)科學，2008（2）：25.

[2]高洪，趙強，立陸勇，等.貴州省桐梓縣豬細小病毒病的血清學調(diào)查.畜牧獸醫(yī)科技信息，2010（2）：32.

[3]杜宗沛，吳植，解慧梅，等.江蘇中部地區(qū)3個種豬場主要疫病的調(diào)查及應對方略.中國獸醫(yī)雜志，2011，47（8）：47-48.

S858.285.3

C

1673-4645（2012）07-0030-02