陳宏麗 柴向斌 王寧

COX-2在變應(yīng)性鼻炎患者血清中的表達(dá)

陳宏麗 柴向斌 王寧

目的檢測變應(yīng)性鼻炎患者與正常人群血清環(huán)氧化酶-2的水平，探討血清環(huán)氧化酶-2與變應(yīng)性鼻炎的關(guān)系。方法采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA法)檢測變應(yīng)性鼻炎患者與正常人的血清COX-2水平，比較AR患者治療前后與健康人群中血清COX-2濃度的差異。結(jié)果 AR組患者治療前后血清COX-2水平均高于正常對照組血清COX-2水平，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);AR患者治療后血清COX-2水平與對照組比較，無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論血清COX-2可能與變應(yīng)性鼻炎發(fā)生有關(guān)，有望成為AR患者疾病發(fā)生、發(fā)展、治療及預(yù)后的動態(tài)觀察指標(biāo)。

變應(yīng)性鼻炎;環(huán)氧化酶-2

環(huán)氧化酶(cyclooxygenase，COX)是前列腺素(PG)合成過程中一個重要的限速酶，可將花生四烯酸代謝成各種前列腺素產(chǎn)物，從而維持機體的各種病理生理過程。近年來研究顯示，COX-2與炎癥、腫瘤等疾病的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，然而對變應(yīng)性鼻炎與COX-2的關(guān)系研究甚少。本研究旨在通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA法)檢測變應(yīng)性鼻炎患者與正常人的血清COX-2水平，比較治療前后AR患者與正常人血清中COX-2的水平變化，初步探討COX-2與變應(yīng)性鼻炎的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2010年8月至2011年12月在我院耳鼻咽喉-頭頸外科就診并按2009年武夷山制定的“變應(yīng)性鼻炎診斷和治療指南”確診為變應(yīng)性鼻炎者90例，平均年齡(28.43±14.53)歲，其中男42例，女48例，以上病例均排除其他免疫性疾病，并且在受檢前2周內(nèi)未用過皮質(zhì)激素，亦未應(yīng)用過非甾體類抗炎藥物或選擇性環(huán)氧化酶抑制劑藥物。選擇同期我院職工健康體檢者18例作為對照組，其中女11例，男7例，平均年齡(30.11±12.91)歲。選擇90例AR患者中經(jīng)治療(方法不限)癥狀減輕或好轉(zhuǎn)的病例37例作為治療后患者組。

1.2 標(biāo)本采集 全部研究對象均晨起空腹采靜脈血3ml，將所采血液立即注入無菌干燥管(無抗凝劑)，室溫存放，靜置凝固后以每分鐘3000轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速，在4℃條件下離心15min，用精密移液器安裝一次性吸頭提取血清，分裝于一次性密閉試管內(nèi)，不同患者的血清分裝于不同的試管內(nèi)，并作相應(yīng)標(biāo)記，并于-20℃冰箱凍存待測。

1.3 主要試劑 人環(huán)氧化酶-2(COX-2)試劑盒，購自上海西唐生物科技有限公司。

1.4 實驗方法 采用采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA法)

1.5 結(jié)果判定 ①用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值(OD值)，各孔OD值減去空白對照孔OD值為實際OD值。②以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度即 0ng/ml，5ng/m l、10ng/ml、20ng/m l所測 OD值在坐標(biāo)紙上作圖，以標(biāo)準(zhǔn)物濃度為橫坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo))，OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo))，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。③根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度，再擴大20倍即為樣品的實際濃度。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，多組間樣本均數(shù)比較采用方差分析，檢驗水準(zhǔn)取α=0.05，以P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

AR組患者血清COX-2水平(2.3640±1.2511)及治療后AR組患者血清COX-2水平(1.6825±0.4719)均高于正常對照組血清COX-2水平(1.4654±0.6940)，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);AR組患者血清COX-2水平(2.3640±1.2511)高于正常對照組血清水平(1.4654±0.6940)，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);AR組患者血清COX-2水平(2.3640±1.2511)高于治療后AR組患者血清COX-2水平(1.6825±0.4719)，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);正常對照組血清 COX-2水平(1.4654±0.6940)與治療后AR組患者血清COX-2水平(1.6825±0.4719)比較，無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。(表1、表2、圖 3)

表1 基本資料描述

三組方差分析F=9.087，P＜0.05，按α=0.05的水準(zhǔn)，可以認(rèn)為以上三組間COX-2濃度總的來講有差別，故對以上任意兩組作兩兩比較。

表2 三組兩兩比較情況

對照組與AR組比較，P＜0.05;對照組與治療后AR組比較，P＞0.05;AR組與治療后AR組比較，P＜0.05。

3 討論

哮喘和變應(yīng)性鼻炎是一種常見的氣道炎性疾病。大多數(shù)哮喘患者都伴有變應(yīng)性鼻炎，而變應(yīng)性鼻炎不僅可能引發(fā)哮喘也常使哮喘難以控制和管理［1］變應(yīng)性鼻炎和哮喘在發(fā)病機制、診斷、治療等方面存在廣泛的相似之處:如上下呼吸道黏膜在結(jié)構(gòu)上相似。哮喘和變應(yīng)性鼻炎常同時發(fā)生于同一患者［2］。病理生理學(xué)［3］研究提示AR和哮喘關(guān)系密切。基于上述理論，我們推測COX-2是通過釋放PG而引發(fā)AR的。COX-2在受到炎癥因子的刺激后，使酶的表達(dá)顯著升高，促進炎癥介質(zhì)PG的合成，加劇炎癥反應(yīng)。COX-2為誘導(dǎo)酶，表達(dá)在單核、巨噬細(xì)胞，滑膜細(xì)胞，軟骨細(xì)胞，成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞等。在正常情況下COX-2表達(dá)極少。當(dāng)纖維母細(xì)胞、血管平滑肌或內(nèi)皮細(xì)胞等暴露到內(nèi)毒素、脂多糖、炎性因子或細(xì)胞因子時，即誘導(dǎo)產(chǎn)生大量COX-2，并促使合成大量前列腺素，引起炎癥反應(yīng)［4］。

但是，關(guān)于COX-2與變應(yīng)性鼻炎的關(guān)系目前國內(nèi)研究還很罕見，本實驗采用ELISA方法檢測AR患者血清中COX-2的表達(dá)，此方法方便、簡單、安全、可重復(fù)性強，有望成為AR患者疾病發(fā)生、發(fā)展、治療及預(yù)后的動態(tài)觀察指標(biāo)。

［1］ 張羅，韓德民．解讀2008年新版變應(yīng)性鼻炎科及其對哮喘的影響．中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2008，43(7):552-557.

［2］ GreisnerWA 3rd，Settipane RJ，SettipaneGA．The course of asthma a parallels thatof allergic rhinitis:a23-year follow-up study of college students，Allerg Asthma Proc，2000，21:371-375．

［3］ Fuhlbrigge AL，Adams RJ．The effectof treatment of allergic rhinitis on asthma amorbidity，including emergency department visits．Curr Opin Allergy Clin Immunol，2003，3:29-32．

［4］ Rondòn C，Doňa I，Torres MJ，et al．Evolution of patientswith nonallergic rhinitis supports conversion to allergic rhinitis．J Allergy Clin Immunol，2009，123:1098-1102.

030001山西醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院耳鼻咽喉教研室(陳宏麗)，耳鼻咽喉-頭頸外科(柴向斌 王寧)