王云霞

永州市第二中醫(yī)院，湖南永州 425006

癌癥是我國(guó)死亡率最高的疾病，主要包括腫癌、肝癌、胃癌、食管癌、結(jié)直腸癌、宮頸癌、乳腺癌和鼻煙癌等，在我國(guó)，上述幾種癌癥的死亡人數(shù)占所有癌癥致死人數(shù)的80%以上。因此，研發(fā)一種療效顯著、結(jié)構(gòu)新穎且不良反應(yīng)少的抗癌藥物具有重要的意義。黃荊(VitexnegundoL.)是馬鞭草科牡荊屬植物，其主要產(chǎn)區(qū)為長(zhǎng)江以南地區(qū)，包括江西、浙江、四川及湖廣等地區(qū)。該藥物具有利濕解毒、清熱解毒、止咳平喘和緩解支氣管痙攣等作用。黃荊中的VBE-l和VBE-2是目前普遍認(rèn)同的具有顯著抗腫瘤功能的成分。筆者對(duì)黃荊中VBE-l和VBE-2含量及相關(guān)工藝進(jìn)行了研究分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料及方法

1.1 材料

以浙江省藥材公司的黃荊為研究樣本，經(jīng)中國(guó)藥科大學(xué)藥物研究所鑒定，確定為馬鞭草科牡荊屬植物黃荊（Vitexnegundo L.）。

1.2 儀器及試劑

采用美國(guó)惠普公司生產(chǎn)的Agllent1100型高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分析。由實(shí)驗(yàn)室自制VBE-l、VBE-2對(duì)照品。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 VBE-1、VBE-2含量測(cè)定法 溶液制備將黃荊根、莖、葉、花、果實(shí)等部位樣本碾碎成細(xì)粉，分別精密稱取5g細(xì)粉，置于250mL的圓底燒瓶?jī)?nèi)，加入濃度為60%的酒精50mL，加熱回流1h，經(jīng)脫脂棉過(guò)濾；在濾渣內(nèi)再加入濃度為60%的酒精50mL，加熱回流1h，再次過(guò)濾。將兩次濾得的溶液合并，使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器將部分酒精進(jìn)行回收，將濃縮液置于50mL的容器內(nèi)，并用酒精乙醇稀釋至刻度。

制備對(duì)照品溶液精密稱取10.75mg的VBE-1對(duì)照樣本和6.35mg的VBE-2對(duì)照樣本，分別用濃度為60%的酒精進(jìn)行溶解，定容至50mL，避光保存。

含量測(cè)定采用HPLC法，以KromasiIODS-1柱為色譜柱，流動(dòng)相為以濃度為0.1%的乙腈醋酸溶液，采用梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為255nm，柱溫為25℃，體積流量為1.0mL/min[1]。

1.4 制備工藝

①取3份，每份100g的粉碎的黃荊子樣本，分別加入1L濃度為60%的酒精溶液中進(jìn)行回流，時(shí)長(zhǎng)為90min，再分別進(jìn)行過(guò)濾，測(cè)出濾液體積。②在上述藥液過(guò)濾出的濾渣中再次加入濃度為60%的酒精溶液，進(jìn)行3次回流提取，酒精溶液用量分別為藥材體積的9倍，提取時(shí)間為60min，過(guò)濾后濃縮濾液至浸膏，測(cè)出浸膏率。

2 結(jié)果

2.1 有效成分

通過(guò)對(duì)黃荊根、莖、葉、果實(shí)中VBE-1及VBE-2含量的檢測(cè)測(cè)定，證明黃荊果實(shí)中VBE-1和VBE-2的含量最高。見表1。

表1 各部位VBE-1和VBE-2含量

2.2 制備方式

黃荊子樣本前2次的浸膏得率明顯高于后2次，可見提取2次后的有效成分基本提取完，因此建議提取次數(shù)為2次。見表2。

表2 提取物的浸膏得率

3 討論

黃荊的保健功效顯著，自古至今，歐洲國(guó)家眾醫(yī)生及民間一直將其視為治療和緩解婦女經(jīng)前綜合癥群及更年期癥狀的首選藥物，并因此開發(fā)了療效卓著的黃荊粉劑、片劑、膠囊和精油等一系列的婦女保健產(chǎn)品，在越來(lái)越崇尚無(wú)副作用自然療法的歐美發(fā)達(dá)國(guó)家，更是受到了廣大女性朋友的熱烈追捧[2]。在我國(guó)，從李時(shí)珍《本草綱目》記載以來(lái)，醫(yī)書上一直將其視為治療濕痰、哮喘、耳聾、抗癌防腫瘤以及婦女白帶等癥狀的良藥。《唐本草》載：“黃荊子，也稱牡荊子、小荊，性溫，主祛風(fēng)，祛痰，鎮(zhèn)咳，行氣，止痛，鎮(zhèn)驚安眠，用于咳嗽、哮喘、感冒、風(fēng)痹、關(guān)節(jié)痛、頭暈、失眠、神經(jīng)衰弱等癥”。

隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，中外科研工作者們對(duì)黃荊進(jìn)行了更深層次的天然化學(xué)成分分析和系列的實(shí)驗(yàn)研究，除了從理論上佐證了自古流傳下來(lái)的黃荊子藥方確有其科學(xué)依據(jù)以外，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)了黃荊子的抗腫瘤功效正逐步被人們所重視。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)證明，VBE-l和VBE-2是黃荊中抗腫瘤的主要活性物質(zhì)。根據(jù)本研究中所測(cè)得的結(jié)果，黃荊果實(shí)，即黃荊子中VBE-l和VBE-2的含量分別為0.175%和0.103%，明顯高于其它各個(gè)部位，可見黃荊子的藥用價(jià)值最高[3]。其次通過(guò)對(duì)制備工藝的分析結(jié)果顯示，在使用酒精溶液對(duì)藥物進(jìn)行回流提取的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，該藥物第1、第2次的浸膏得率較高，而后的浸膏得率顯著下降，因此在制備中建議提取次數(shù)為2次。

目前，天然抗癌藥物已成為世界各國(guó)醫(yī)藥界關(guān)注的一大熱點(diǎn)，具有廣闊的前景，對(duì)攻克人類頑癥、提升健康水平方面具有積極的意義。但是在對(duì)該類藥物的研究及開發(fā)中，生產(chǎn)工藝落后、產(chǎn)品的分離純化度低等是人們所面對(duì)的最難題。因此，在對(duì)天然抗癌藥物的研究及開中，解決上述問(wèn)題具有關(guān)鍵的作用。筆者的研究成果一方面為牡荊屬植物開發(fā)抗癌藥物提供了科學(xué)根據(jù)，另一方面也為提高黃荊子成品藥物的生產(chǎn)提供了一定的理論依據(jù)[4]。若能對(duì)該藥的制劑工藝進(jìn)行深入的研究及完善，從產(chǎn)業(yè)化、批量化方面入手，開發(fā)出新型的抗腫瘤藥物，必將獲得良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。

[1]唐瑩翠,曾光堯,譚健兵,等.RP-HPLC法測(cè)定黃荊子牡荊素A[J].中草藥,2009(2):145-147.

[2]Gupta R K.Tandon V R Ant inociceptive leaf extract[J].Indian journal,2005,49(2):163-170.

[3]Azad bak ht M,Baheddini A,Shorideh S M,et al.Effect of Vitex agnus castus L.leaf and fruit flavonoidal extracts on serum prolactin concentration[J].Faculty of Pharmacy,Faslnamahi Giyahani Daruyi,2005,4(16):56-61.

[4]唐瑩翠.黃荊子抗腫瘤有效成分資源調(diào)查及有效部位工藝研究[D].長(zhǎng)沙：中南大學(xué)，2009.