才 鳳，苗 翠，李洪江

鹿茸在我國(guó)已有幾千年的歷史，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》?！侗静菥V目》謂鹿茸能夠“生精補(bǔ)髓，養(yǎng)血益陰，強(qiáng)筋健骨，治一切虛損、耳聾、目暗、眩暈虛痢”［1］。鹿茸中的多肽及蛋白質(zhì)為其主要活性成分，而小分子多肽與大分子蛋白相比，具有活性強(qiáng)、抗原性小、易被人體吸收等優(yōu)點(diǎn)。傳統(tǒng)的提取方法，如加熱水提、醇提等，或?qū)е侣谷锥嚯牡氖Щ?，或使人體不能充分利用，造成鹿茸資源浪費(fèi)。本實(shí)驗(yàn)采用超聲裂解法破碎細(xì)胞，釋放有效物質(zhì)，最大限度地提高鹿茸的利用率。

1 藥品、儀器與試劑

1.1 鹿茸藥材 購(gòu)于遼寧西豐。

1.2 儀器與試劑 U-2010紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，電熱恒溫水浴鍋，牛血清白蛋白對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)。所用試劑均為分析純。試液均按《中國(guó)藥典》［2］2005年版附錄配制。

2 方法與結(jié)果

2.1 藥材的鑒定與前處理 鹿茸為鹿科動(dòng)物梅花鹿(Gervus nippon temminck)的雄鹿未骨化密生絨毛的幼角，經(jīng)檢驗(yàn)，符合《中國(guó)藥典》［2］鹿茸項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。藥材前處理:將鹿茸去毛皮，切成片，備用。

2.2 超聲提取工藝正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 稱取鹿茸片10 g，以水做溶劑進(jìn)行超聲提取，按L9(34)表進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，采用福林酚法測(cè)定鹿茸多肽含量，并以該含量為指標(biāo)優(yōu)選鹿茸多肽超聲提取最佳工藝。因素水平見(jiàn)表1，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 鹿茸多肽L9(34)正交試驗(yàn)因素水平表

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

由表2可見(jiàn)，3個(gè)因素的極差大小順序?yàn)锳＞C＞B，各因素與水平的組合應(yīng)為A1B1C3。進(jìn)一步進(jìn)行方差分析，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 方差分析表

查表得 F0.05(2.2)=19.00，F(xiàn)0.01(2.2)=99.00，經(jīng)方差分析，發(fā)現(xiàn)A因素有顯著意義，B因素?zé)o顯著意義，C因素接近顯著值，表明本試驗(yàn)設(shè)計(jì)較有意義。結(jié)合R水平，得出鹿茸多肽提取最佳加水量為10倍量，最佳提取時(shí)間為10 min，最佳提取次數(shù)為3次。即最佳提取工藝為A1B1C3。

2.3 最佳工藝確證 精密稱取鹿茸10 g，按上述最佳提取工藝A1B1C3重復(fù)提取2次，測(cè)定并計(jì)算其鹿茸多肽的含量。見(jiàn)表4。

表4 驗(yàn)證試驗(yàn)表(g)

通過(guò)正交驗(yàn)證試驗(yàn)可知，驗(yàn)證試驗(yàn)的鹿茸多肽含量均高于正交試驗(yàn)結(jié)果。

3 討論

通過(guò)單因素和正交試驗(yàn)，優(yōu)化了超聲提取鹿茸多肽的工藝條件，最終適宜參數(shù):料液比為1∶10，提取次數(shù)為3次，提取時(shí)間為10 min。

該試驗(yàn)以水溶液為提取劑，成本低廉，工藝操作簡(jiǎn)單，而且提取過(guò)程中未加入任何有毒物質(zhì)，因此，安全性較高，適于工業(yè)化生產(chǎn)。

［1］ 張榮.鹿茸的加工工藝與研究述要［J］.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，9(3):59-60.

［2］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典(一部)［S］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:303.