岳孝瑞

（甘肅省正寧縣動物疫病預防控制中心，正寧 745300）

正寧縣是個農業(yè)縣，畜牧業(yè)在縣域經(jīng)濟的發(fā)展中占據(jù)著重要的地位。近年來，隨著規(guī)模化、標準化養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，正寧縣的養(yǎng)豬從數(shù)量到質量都有了質的飛躍。但隨著養(yǎng)豬數(shù)量的不斷增長和飼養(yǎng)環(huán)境的變化，也出現(xiàn)了一些問題：主要表現(xiàn)在管理不夠規(guī)范，疫病防治混亂，且呈上升趨勢。問題的存在嚴重影響和制約著養(yǎng)豬事業(yè)的發(fā)展。加強動物疫病實驗室檢測工作，完善檢測手段、提高檢測水平，是科學制定防疫計劃，防控豬病的有效措施，在重大動物疫病的診斷及防控中具有不可替代的重要作用。

1 實驗室檢測的作用

1.1 了解和掌握豬群的健康狀況，確診疾病

隨著高科技手段在獸醫(yī)領域的廣泛應用，動物疫病檢測技術也得到了普及推廣和提升，實驗室檢測、診斷水平的提高，為防控動物疫病提供了重要依據(jù)。通過病原學檢測，可以了解豬群是否攜帶或感染某種病原，定期檢測血清學的變化就可以做到防患于未然，及早發(fā)現(xiàn)問題，及早采取措施，起到一種預警的作用；通過抗體檢測可以了解豬群的整體免疫狀況，從而為相應措施的采取提供依據(jù)。

1.2 預測和掌握接種時間

在動物免疫中，恰當合理的免疫接種時間往往是有效免疫的關鍵。特別是在使用疫苗尤其是活苗的時候，一定要考慮母源抗體的影響，最可靠和可行的方法就是通過血清學檢測來測定母源抗體的消長，來確定免疫接種的最佳時機。

1.3 檢測疫苗免疫效果，為制定和修改免疫程序提供依據(jù)

豬群在免疫某種疫苗后通過定期檢測，可以了解豬群是否產(chǎn)生抗體、產(chǎn)生抗體水平的高低，從而為免疫程序的制定和修改提供依據(jù)。同時，在我們的日常業(yè)務工作中，通過免疫抗體檢測，也是考核防疫員免疫工作的依據(jù)。此外，目前市場上疫苗廠家眾多，疫苗質量參差不齊，加上疫苗運輸、保存、注射等環(huán)節(jié)都會影響免疫效果，通過實驗室檢測可以了解這些疫苗的質量和效果，為下一步的疫苗選擇提供參考。

1.4 豬場疫病凈化、根除，建立陰性豬場（群）

對規(guī)模養(yǎng)豬場（戶），針對某種疫病，通過定期進行病原學實驗室檢測，掌握豬場某種病原的存在情況，確定感染豬群或豬只，從而采取撲殺、隔離、無害化處理等措施達到豬群凈化的目的。

2 實驗室檢測的方法及判定

目前實驗室檢測的方法主要有病原學檢測和血清學檢測2種。臨床上可以根據(jù)檢測目的不同分別進行選擇。

2.1 病原學檢測方法及判定

2.1.1 方法 病原學檢測：病毒的分離培養(yǎng)鑒定、反轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）、ELISA等。如豬的O型口蹄疫檢測采集豬頜下淋巴結用RT-PCR方法進行監(jiān)測，結果為陽性豬，對陽性豬進行流行病學調查；高致病性豬藍耳病監(jiān)測用RT-PCR或熒光RTPCR方法檢測，對病原學檢測結果為陽性的豬進行撲殺，并進行無害化處理。病原學檢測操作技術要求高，結果判定很難掌握，目前主要由省疫控中心進行檢測。

2.1.2 判定 對病原學檢測結果為陽性的豬，進行流行病學調查，撲殺，并進行無害化處理等。

2.2 血清學檢測方法及判定

2.2.1 方法 正向間接血凝試驗（IHA）、液相阻斷ELISA、ELISA等。是基層實驗室檢測免疫抗體的主要方法，目前使用的也有商業(yè)化的成品試劑盒。

2.2.2 判定 如O型口蹄疫正向間接血凝試驗（IHA）：在對照孔合格的前提下，再觀察待檢血清各孔，以呈現(xiàn)“++”凝集的最大稀釋倍數(shù)為該份血清的抗體效價。例如1號待檢血清1～5孔呈現(xiàn)“++”～“+++”凝集，6～7孔呈現(xiàn)“++”凝集，第8孔呈現(xiàn)“+”凝集，第9孔無凝集，那么就可判定該份血清的口蹄疫抗體效價為1：128。接種口蹄疫疫苗的豬群免疫抗體效價達到1：128（即第7孔）呈現(xiàn)“++”凝集為免疫合格?？谔阋咭合嘧钄郋LISA試驗：以病毒抗原對照平均D492nm值的50%為臨界值，被檢血清稀釋孔D492mn值大于臨界值的孔為陰性孔，小于或等于臨界值的孔為陽性孔，陽性孔的D492nm值等于臨界值時所對應的稀釋度為該份血清的抗體滴度。ELISA抗體滴度與免疫動物攻毒保護的關系：豬≥1∶64，99%以上保護；<1∶4不保護；1∶4～45，50%保護。

注：《2010年國家動物疫病監(jiān)測計劃》：豬瘟免疫抗體檢測，使用正向間接血凝試驗，免疫21 d抗體效價≥25為免疫合格；使用豬瘟抗體阻斷ELISA檢測的，抗體陽性即為合格。豬O型口蹄疫免疫抗體檢測，使用正向間接血凝試驗，抗體效價≥25為免疫合格；液相阻斷ELISA檢測，抗體效價≥26為免疫合格。

3 加強實驗室檢測工作的對策

3.1 提高實驗室工作人員的業(yè)務技術能力

正寧縣的獸醫(yī)實驗室監(jiān)測人員，業(yè)務水平還比較低，大多數(shù)人沒有接受過較為系統(tǒng)的培訓，部分人員對檢測操作業(yè)務不夠熟悉，不能對檢測結果做出正確分析。因此，實驗室應有與其從事檢測活動相適應的專業(yè)技術人員和管理人員，加強相關業(yè)務培訓，所有人員應經(jīng)過嚴格培訓并持證上崗，以保證日常工作的開展。

3.2 提高實驗室的基本管理體系建設

按照實驗室考核認證的基本要求，加強各項管理體系，實驗室要制定一系列規(guī)章制度和一整套生物安全操作手冊，明確可能遇到的危害，并說明減小或消除這些危害的操作程序，并嚴格監(jiān)督和付諸實施。充實和完善各類儀器設備和器械，確保檢測結果的準確性。

3.3 提高疫病檢測工作的經(jīng)費投入

各級政府和業(yè)務主管部門，都要加強對疫病檢測工作的經(jīng)費投入，最大限度地滿足實驗室各種檢測試劑和診斷液的購置，保證檢測工作的正常開展。

3.4 提高檢測樣品采樣技術和質量

根據(jù)檢測的目的，必須保證所采樣品的時效性、合理性和樣品質量，妥善包裝、運輸和保存樣品。防止樣品污染、腐敗和變質，因而影響檢測結果。

3.5 提高對動物疫病檢測工作重要性的認識

大力宣傳《中華人民共和國動物防疫法》，貫徹執(zhí)行以“預防為主”的方針，使轄區(qū)內各動物飼養(yǎng)場（戶）及其他有關單位和個人能充分認識到動物疫病檢測工作的重要性和必要性，自覺接受動物防疫機構的疫病檢測，促進動物疫病檢測技術的普及推廣和提升。