瞿 慧 俞財榮 顧 曉 楊 濤

（上海市奉賢區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，上海 201499）

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的一種嚴(yán)重的人畜共患的慢性傳染病。結(jié)核病除了能夠感染人外，還能引起多種哺乳動物和禽類發(fā)病，其中感染力較強(qiáng)的為人型、牛型和禽型結(jié)核分枝桿菌，分別引起人結(jié)核病、牛結(jié)核病和禽結(jié)核病。牛結(jié)核病是由牛結(jié)核分支桿菌和結(jié)核分枝桿菌引起的一種嚴(yán)重的人畜共患的慢性消耗性傳染病[1]。世界衛(wèi)生組織（OIE）將其列為B類動物疫病，我國將其列為二類動物疫病[2]。在西方畜牧業(yè)發(fā)達(dá)的國家，牛結(jié)核病疫情曾一度相當(dāng)嚴(yán)重，但是通過實施嚴(yán)格的檢疫和撲殺措施后，疫情有所控制。美國于1917年首次出現(xiàn)牛結(jié)核病，并及時提出根除計劃，結(jié)核菌素陽性的牛一律屠宰，經(jīng)過實施“檢疫→撲殺”等措施，到1957年牛結(jié)核病基本控制。目前北歐的丹麥、比利時、德國等國家已經(jīng)基本上消滅了牛結(jié)核病，英國和法國處于控制狀態(tài)。

我國的結(jié)核病流行一直十分嚴(yán)重，其嚴(yán)重程度僅次于印度，居世界第2位[3]。牛結(jié)核病在我國依然是最常見的多發(fā)性疾病，20世紀(jì)50年代我國出現(xiàn)過牛結(jié)核病的大流行，1955年檢出陽性率達(dá)36.4%，以后由于采取多種有效措施，陽性率大大降低。但2000年以后，隨著養(yǎng)牛熱在全國掀起，結(jié)核病的陽性率也逐年上升。上海市奉賢區(qū)是上海市政府確定的適度養(yǎng)殖區(qū)，目前轄區(qū)內(nèi)有規(guī)?；蹋ǚN）牛場19家，總存欄量達(dá)11 000多頭，是上海的奶牛養(yǎng)殖大區(qū)。為正確評估和掌握我區(qū)奶牛結(jié)核病總體情況，本研究對從2007～2011年（2009年未統(tǒng)計）全區(qū)19家規(guī)模化奶牛場近萬頭奶牛每年2次的奶牛結(jié)核病檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，旨為奉賢地區(qū)奶牛結(jié)核病防控提出合理的建議，以期掌握其流行特點，同時也為上級部門防控奶牛結(jié)核病提供一手資料，現(xiàn)將檢測結(jié)果分析如下，供同行參考。

1 材料與方法

1.1 牛只來源

奉賢轄區(qū)內(nèi)19家規(guī)?；蹋ǚN）牛場，飼養(yǎng)1月齡以上奶（種）牛。

1.2 前期準(zhǔn)備

每次奶牛結(jié)核病普檢前一個月下發(fā)檢疫通知和檢疫日程表，并要求各場做好牛只分群、驅(qū)蟲、消毒、耳標(biāo)補(bǔ)號等工作，根據(jù)日程表等待檢疫。

1.3 材料準(zhǔn)備

牛型提純結(jié)核菌素（哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司生產(chǎn)）、剃須刀、游標(biāo)卡尺、70%酒精棉、結(jié)核菌素連續(xù)金屬注射器、記錄表、一次性防護(hù)用品。

1.4 檢測方法

根據(jù)GB/T18645-2002方法（國家標(biāo)準(zhǔn)動物結(jié)核病診斷技術(shù)規(guī)范）進(jìn)行操作。

1.5 判定標(biāo)準(zhǔn)和陽性處理

陽性反應(yīng)：局部有明顯紅腫等炎性反應(yīng)，皮厚差≥4 mm，判定為“+”。

可疑反應(yīng)：炎性反應(yīng)不明顯，4 mm＞皮厚差≥2 mm，判定為“±”。

陰性反應(yīng)：無炎性反應(yīng)，皮厚差＜2 mm，判定為“—”。

凡判定為疑似反應(yīng)牛只，于第一次檢疫后2個月進(jìn)行復(fù)檢，其結(jié)果仍為可疑的，再經(jīng)2個月復(fù)檢，如仍為可疑的，判為陽性。凡判定為陽性的牛只上報上海市動物疫病預(yù)防控制中心，移送動物衛(wèi)生監(jiān)督管理部門作無害化處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 奶牛結(jié)核病檢測總體情況

我們對2007～2011年（2009年未統(tǒng)計）奉賢區(qū)奶牛結(jié)核病檢測結(jié)果進(jìn)行分析，詳見表1。

表1 2007～2011年奉賢區(qū)奶牛結(jié)核病檢測結(jié)果匯總表 （單位：頭次、頭、%）

圖1 結(jié)核病監(jiān)測陽性率趨勢圖

根據(jù)表1看出，奉賢區(qū)奶牛存欄（檢測數(shù)）近幾年呈明顯的上升趨勢。2007年共檢測奶牛結(jié)核病17 446頭次，陽性率為0.09%；2008年共檢測奶牛結(jié)核病17 884頭次，陽性率為0.15%；2010年共檢測奶牛結(jié)核病18 268頭次，陽性率為0.04%；2011年共檢測奶牛結(jié)核病19 420頭次，陽性率為0.10%。

奶牛結(jié)核病陽性檢出率呈波浪狀，表明我區(qū)奶牛結(jié)核病疫情仍不穩(wěn)定，詳見圖1。

2.2 2007～2011年各牛場結(jié)核病檢測結(jié)果

我們對2007～2011年各個牛場結(jié)核病檢測結(jié)果進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)我區(qū)奶牛結(jié)核病陽性牛分布較廣，其中有12家牛場曾經(jīng)檢測到結(jié)核病陽性牛，占總牛場數(shù)的63.2%，詳見表2。

表2 2007～2011年奉賢區(qū)各牛場檢測結(jié)果 （單位：頭次、頭、%）

從表2中可以看出，奶牛結(jié)核病陽性率超過0.1%（2009～2015年結(jié)核病防治規(guī)劃中要求穩(wěn)定控制區(qū)陽性率應(yīng)小于0.1%）的場數(shù)有6家，占總場數(shù)的31.6%；這6家牛場共檢出陽性牛63頭，占總陽性數(shù)的83.6%，說明大部分陽性牛在這幾個老疫點中反復(fù)出現(xiàn)，應(yīng)對以上幾個牛場重點關(guān)注。

2.3 不同年齡奶牛結(jié)核病陽性牛檢測結(jié)果

在檢測過程中，我們發(fā)現(xiàn)育成牛結(jié)核病陽性檢出率最高為63%，其次為犢牛，成乳牛最低，詳見表3。

表3 不同年齡奶牛結(jié)核病陽性牛檢測結(jié)果 （單位：頭、%）

2.4 2007～2011年可疑牛復(fù)檢情況統(tǒng)計

在檢測過程中，我們發(fā)現(xiàn)結(jié)核病可疑牛經(jīng)過2次復(fù)檢后，其轉(zhuǎn)陰率非常高，達(dá)97.9%，詳見表4。

表4 2007～2011年可疑牛復(fù)檢情況統(tǒng)計 （單位：頭、%）

3 討論

（1）從表1中可知，近年奉賢區(qū)奶牛結(jié)核病陽性檢測率和可疑牛檢測陽性率呈波浪狀，陽性率在0.04%～0.15%間浮動，說明我區(qū)結(jié)核病疫情還存有不安定因素。按照農(nóng)業(yè)部2009～2015年奶牛結(jié)核病防治規(guī)劃標(biāo)準(zhǔn)，連續(xù)2年結(jié)核病無疫情且陽性率＜0.10%為穩(wěn)定控制區(qū)，無疫情且連續(xù)2年無結(jié)核病陽性牛檢出為凈化區(qū)。但從我區(qū)幾年來的檢測結(jié)果來看，我們離“2009～2015年防治規(guī)劃”的目標(biāo)還有一定距離，仍需進(jìn)一步強(qiáng)化檢測、消毒等技術(shù)工作，堅持自繁自養(yǎng)，嚴(yán)格控制奶（種）牛異地引進(jìn)，確保在2015年前達(dá)到穩(wěn)定控制區(qū)目標(biāo)，力爭達(dá)到凈化區(qū)。

（2）筆者在這幾年的一線奶牛檢測工作中發(fā)現(xiàn)，其陽性牛多在幾個牛場的某幾個牛舍中被反復(fù)檢出，估算占總陽性牛的60%以上。進(jìn)一步觀察其牛舍多為環(huán)境差、陰暗潮濕不通風(fēng)、牛群飼養(yǎng)密度過大的散放牛舍，而且多數(shù)呈同舍感染。表明牛結(jié)核病容易在飼養(yǎng)密度大、潮濕、環(huán)境臟差的情況下呈舍內(nèi)傳播，且存活時間長，不易消除。在今后的工作中應(yīng)重點對這類牛群加大檢疫、加強(qiáng)消毒和飼養(yǎng)管理。

（3）從表3中得出，育成牛陽性檢測率最高，犢牛其次，成乳牛最低，因此我區(qū)奶牛檢測重點在后備牛群。但其具體原因有待進(jìn)一步研究。

（4）筆者發(fā)現(xiàn)，在日常工作中，往往可疑反應(yīng)牛經(jīng)隔離消毒后復(fù)檢，其轉(zhuǎn)陰率非常高，1 212頭可疑牛經(jīng)2次復(fù)檢后有1 186頭轉(zhuǎn)陰，轉(zhuǎn)陰率高達(dá)97.9%，這與有關(guān)報道稱重復(fù)檢疫時陽性率下降相符。目前PPD皮試診斷技術(shù)作為世界衛(wèi)生組織（OIE）的法定的檢疫方法有著其操作簡便、容易推廣等優(yōu)越性，但多年來研究表明：其結(jié)果容易受藥物、病毒、寄生蟲、PPD批號、牛只個體差異、妊娠情況、疾病、人為誤差等多種因素的影響，導(dǎo)致出現(xiàn)假陽性或假陰性。因此，我們在實踐工作中的具體做法是：檢疫前加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，做好分群、驅(qū)蟲、消毒等工作；檢疫時嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行；操作中誰檢疫誰判定，減少人為誤差；對個別有疑問的牛只結(jié)合同群牛6個月來的檢疫情況、牛只自身體況并根據(jù)以往實踐經(jīng)驗作出綜合判定；若實在難以作出判定的，可作為可疑牛只進(jìn)行隔離后復(fù)檢觀察，以提高檢測準(zhǔn)確性。

（5）目前沒有一種檢測方法可以做到100%準(zhǔn)確，為了減少不必要的損失，有條件的地區(qū)可采用PPD+ELISA或PPD+γ-干擾素試驗同時運用，相互彌補(bǔ)不足之處，盡可能提高檢測的特異性和敏感性。同時也呼吁能有特異性和敏感性高且操作方便、適合推廣的牛結(jié)核病診斷新技術(shù)能夠盡快的研發(fā)出來。

[1]Ahmed N，Mohanty A K，Mukhopadhyay U，et al.PCR-based rapid detection of Mycobacterium tuberculosis in blood from immunocompetent patients with pulmonary tuberculosis[J].Journal of Clinical Microbiology，1998，36（10）：3094-3095

[2]王忠仁.牛結(jié)核病與人結(jié)核病的相互關(guān)系[J].中國防癆雜志，2005，27（2）：123-125

[3]金鑫等.人獸共患病的現(xiàn)狀與防治（三）動物結(jié)核病[J].動物保健，2004，（16）：18-19