譚立紅

（山東省萊西市望城動物防疫監(jiān)督站，萊西 266600）

馬立克氏病（marek’s disease，MD）是由皰疹病毒科的細胞結(jié)合性馬立克氏病病毒（marek’s piseasevirm，MDV）引起的一種高度接觸傳染性、淋巴組織增生性腫瘤病。本病以患雞內(nèi)臟、外周神經(jīng)、性腺、皮膚及眼出現(xiàn)腫瘤為特征。自從火雞皰疹病毒（HVT）疫苗廣泛使用，MD發(fā)生迅速下降，但目前HVT免疫效果下降，雞群不能得到有效保護，從病雞群中分離到超強毒株。為防制超強毒株對雞群的危害，1983～1985年國際上使用雙型雙價苗，使免疫雞群得到了較好保護。1995年以來，免疫后雞群的MD發(fā)病率顯著上升，死亡率達8%～30%，并且分離出特超強毒株，MDV毒力的不斷強化，給MD的疫苗生產(chǎn)和預防帶來了新的挑戰(zhàn)。

1 病原體

1.1 病毒分類

MDV是皰疹病毒科的成員，在雞體內(nèi)以2種形式存在：（1）無囊膜的病毒顆粒存在于病變組織細胞中；（2）有囊膜的完整病毒粒子存在于皮膚羽囊上皮細胞中，可脫離細胞隨塵埃飛揚。

1.2 血清型

應用免疫熒光、免疫擴散和血清中和試驗可將MDV分為3個血清型：血清Ⅰ型Ⅱ型和Ⅲ型。這3個血清型毒株，含有共同抗原，也含有型特異性抗原，他們可通過型特異性血清相鑒別，不同血清型之間還有協(xié)同作用，特別是Ⅰ型和Ⅱ型之間更明顯。

1.3 致病力

不同的MDV分離物，其毒力差異很懸殊，按致病力大小可分為4類：（1）無致病毒株：不產(chǎn)生肉眼可見的MD病變。（2）低毒株：引起古典型MD毒株，主要引起腳翼神經(jīng)麻痹和性腺病變。（3）強毒株：引起急性MD的毒素，在心臟、皮膚、肌肉內(nèi)出現(xiàn)腫瘤。（4）毒力特強毒株：HVT疫苗對這類毒素無免疫預防作用，其特點是引起高度急性溶血性感染，表現(xiàn)為法氏囊和胸腺萎縮，早期無腫瘤性死亡，對抗力強品種，也有比較高的致瘤性；對HVT免疫雞，尤其是存在母源抗體時，易造成免疫失敗，HVT對其抵抗力可由69%下降到18%～10%，可從免疫過的雞群中分離到超強毒株。管恩平等[1]報道我國存在超強毒株。蔣玉雯[2]從用過HDV疫苗免疫的雞群種分離到國際標準毒株GA還強的毒株（MDV-G2），使用二價苗均不能提供良好的保護。

2 流行病學

2.1 易感禽類

主要危害雞，鵪鶉、山雞也有發(fā)病。但近年來，法國、以色列陸續(xù)有關于商業(yè)火雞爆發(fā)MD且死亡率到達16.5%～80%的報道，這可能是MDV毒力增強所致，也可能MDV發(fā)生變異使其宿主范圍擴大的結(jié)果，這對火雞業(yè)面臨的一個新問題。

2.2 傳染源

病雞和帶毒雞毛囊上皮能產(chǎn)生大量的具有囊膜的完整病毒，并可脫離細胞排至外界，污染環(huán)境。因此，脫落的角化毛囊上皮、毛屑和雞舍中的灰塵是最重要的傳染源。其次，病雞和毒雞的分泌物、排泄物也有傳染性。

2.3 傳播途徑

MD具有高度接觸傳染性，通過直接或間接接觸，經(jīng)氣源傳播。在羽囊上皮細胞中復制到MDV，隨羽毛、皮屑排出，隨塵埃經(jīng)呼吸道進入機體，也可經(jīng)消化道進入。但MD不可能垂直傳播。

2.4 發(fā)病日齡

自然感染雞8～21周齡發(fā)病，古典型MD感染的雞可早在第3周發(fā)病，但一般以12～18周齡雞發(fā)病率最高。近年來由于MDV毒力增強，發(fā)病日齡有提前趨勢，3～4周齡開始出現(xiàn)腫瘤，8～9周齡時已經(jīng)很嚴重。這一研究成果對制定蛋用雞和種雞的MD控制策略有重要意義。

3 發(fā)病機理

3.1 早期溶細胞感染

MDV侵入雞只體內(nèi)，很快在脾臟、法氏囊和胸腺中增殖并發(fā)生溶細胞感染，最終導致法氏囊和胸腺萎縮。這一階段發(fā)生在感染后第1～6 d，在這期間，感染雞只不分品系和日齡，感染水平基本一致；強致瘤性毒株比弱致瘤性毒株可引起更嚴重的溶細胞感染而導致早期死亡綜合征。

3.2 潛伏感染期

在感染后第6～7 d時，由于免疫應答的出現(xiàn)特別是細胞免疫的作用，溶細胞感染轉(zhuǎn)變?yōu)闈摲腥尽摲腥臼浅掷m(xù)性的，可伴隨宿主終生。絕大部分潛伏感染的細胞為T細胞，少部分為B細胞，但B細胞的壞死性感染又激活T細胞反應。

3.3 第2次溶細胞感染

除遺傳抗性品系雞外，易感雞通常在感染后第2～3周由第2階段發(fā)展到第3階段的溶細胞感染，而且伴隨有持久性的免疫抑制。

3.4 腫瘤細胞增生期

被病毒感染的淋巴細胞絕大部分為非生產(chǎn)性感染，最終結(jié)果是產(chǎn)生淋巴性腫瘤。MD腫瘤的來源也可能是克隆的，因為從對MDV的DNA在淋巴瘤細胞基因的隨機插入研究中發(fā)現(xiàn)，來源同一淋巴瘤或同一淋巴瘤衍生的細胞中，其插入位點是相同的。

4 癥狀與病理變化

病雞主要表現(xiàn)位精神萎頓、生長不均勻、消瘦、消化不良，常不表現(xiàn)特殊癥狀而死亡，有些病雞腿麻痹、翅下垂、頭頸歪斜，常呈“單腿立”姿勢，有些虹膜褪色，瞳孔邊緣不整。大部分患雞死于腫瘤的并發(fā)癥。主要病變是神經(jīng)損傷和各種器官的淋巴瘤。

5 診斷

5.1 病毒分離

病毒分離不但對診斷很有價值，而且對流行病學及病原特性的研究至關重要。MDV初代分離培養(yǎng)一般是將血液淋巴細胞或淋巴相比的單細胞懸液接種易感的細胞培養(yǎng)。

5.2 病毒抗原的血清學檢測

此類方法主要用于檢測包括毛尖和毛囊上皮、溶細胞感染的淋巴細胞組織及感染的細胞培養(yǎng)物等樣品。檢測方法有熒光抗體法、免疫過氧化酶法、瓊脂擴散試驗及酶聯(lián)免疫吸附試驗。值得注意的是很難在淋巴瘤和潛伏感染的組織中檢測到MDV抗原。

5.3 聚合酶鏈反應技術(shù)

用PCR可以鑒別致弱株、野毒株及腫瘤中的病毒DNA。設計出的引物可廣泛應用到引起雞各種腫瘤的MDV、網(wǎng)狀內(nèi)皮增生性病毒、淋巴白血病病毒和淋巴增生性病毒的鑒別測定當中。

5.4 DNA探針技術(shù)

以DNA探針通過DNA點雜交的方法可用于鑒定羽尖提取物中MDV的DNA，通過原位雜交用于MDV和HVT感染細胞定位的探針技術(shù)也有報道。

5.5 外周血淋巴細胞的端粒酶活性檢測

端粒酶活性可作為診斷惡性腫瘤模型的生物學指標。

5.6 織形態(tài)學觀察

雞MD的病原分離和血清學診斷，只能確定雞是否感染了MDV，不能確定是否發(fā)生了腫瘤。對病理剖檢不具有特征性的病例則還有通過病理組織學觀察才能得出準確的診斷。

6 防治

養(yǎng)禽業(yè)自20世紀70年代采用疫苗預防至今已有幾十年的歷史，但隨著MDV致病性不斷演化，MDV的毒力和致病性不斷增強，所用疫苗從HVT單價苗發(fā)展到多價苗。

6.1 免疫接種

疫苗的種類主要有單價苗、二價苗、三價苗及重組DNA疫苗4類。我國自1978年研究成功HVT疫苗以來，養(yǎng)雞業(yè)經(jīng)歷了一個平穩(wěn)的發(fā)展時期。

6.2 選育抗MDV品種

很早人們就觀察到不同遺傳品系的雞對MD的易感性是不同的。因此，在研究和再生產(chǎn)上均培育出抗病的雞品系。根據(jù)國內(nèi)外資料，抗MD雞種選育應從3個途徑入手：（1）從細胞或分子水平上尋找與MD有關聯(lián)的標記基因或其產(chǎn)物進行選擇；（2）利用攻擊MDV幸存雞進行擴群選育；（3）通過后裔MDV攻擊試驗選留MDV強抗性親本擴群選育。

6.3 隔離與衛(wèi)生，避免野毒早期感染

雞對于MD有日齡抵抗力。1日齡雛雞比14日齡易感性大1 000倍，新生雛進場后幾小時內(nèi)，在免疫力產(chǎn)生之前就不可避免的遭受MDV侵襲。因為存在于毛囊上皮細胞中的MDV可隨皮屑漂浮于空氣中長期存活，剛出殼雛雞吸入含有MDV的空氣就能感染上MD，而注射疫苗后雛雞至少要5～7 d才能產(chǎn)生抗體。故做好孵化室、育雛室及其用具器械的消毒，切斷傳播途徑，以防止雛雞早期感染。

7 小結(jié)

MD是危害養(yǎng)禽業(yè)健康發(fā)展的3種主要疫病之一，也是世界上第1個能用疫苗來預防的腫瘤性疾病。盡管廣泛使用了很多疫苗，但由于MDV毒力的不斷強化，免疫失敗仍頻頻發(fā)生，以及關于使用血清2型疫苗導致早期感染禽白血病病毒的某些特定遺傳品系的雞發(fā)生淋巴白血病的問題，給MD的疫苗預防和研究帶來了新的課題。隨著MDV分子生物學的研究，基因工程疫苗研制成功和應用，生物安全措施的不斷加強和飼養(yǎng)管理的不斷完善，必將給MD防制帶來新的希望。

[1]管恩平.廣西霞煙雞抗馬立克氏病選育報告[J].廣西農(nóng)業(yè)大學學報，1993，12（1）：57-64

[2]蔣玉雯.用狄高辛標記DNA探針對雞馬立克氏病的流行研究[J].中國獸醫(yī)學報，1993，12（1）：230-232