耿 薇，鄭敏燕，尚永輝，張君才

(咸陽師范學(xué)院化學(xué)與化工學(xué)院，陜西咸陽712000）

分析測試

櫻桃仁的脂肪酸組成與含量分析*

耿 薇，鄭敏燕，尚永輝，張君才

(咸陽師范學(xué)院化學(xué)與化工學(xué)院，陜西咸陽712000）

用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）測定櫻桃仁中的脂肪酸含量，用外標(biāo)法與峰面積歸一法兩種方法進(jìn)行定量分析。櫻桃仁以不飽和脂肪酸為主，櫻桃仁中單不飽和脂肪酸36.24%，多不飽和脂肪酸44.04%。櫻桃仁中四種脂肪酸含量：亞油酸＞油酸＞棕櫚酸＞硬脂酸。

櫻桃仁；外標(biāo)法；峰面積歸一法；氣質(zhì)聯(lián)用；脂肪酸

櫻桃為薔薇科櫻桃屬落葉喬木果樹。由于櫻桃成熟期早，果實(shí)營養(yǎng)豐富，具有上市早、單位面積產(chǎn)值高、市場需求量大的優(yōu)勢(shì)。在《滇南本草圖說》、《本草再新》等中醫(yī)藥專著中,認(rèn)為櫻桃果核仁具有發(fā)表透疹、消瘤去瘢、行氣止痛等功能。櫻桃仁中含有多種藥用活性成分，脂肪酸就是其中之一。脂肪酸是人體不可缺少的營養(yǎng)成分之一，與健康密切相關(guān)[1-3]。已有報(bào)道用峰面積歸一法分析櫻桃仁中的脂肪酸含量[3，4]，本文用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的外標(biāo)法與峰面積歸一法兩種方法分別對(duì)櫻桃仁中的脂肪酸含量進(jìn)行定量分析。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器和試劑

GCMS-QP2010氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（日本島津SHIMADZU制作所）；101型電熱鼓風(fēng)干燥箱（北京科偉永興儀器有限公司）；Sartorius CP124S電子天平（Max 120g，d=0.1mg）；10μL微量進(jìn)樣器（澳大利亞SGE）；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海嘉鵬科技有限公司）；20～200μL移液器（ThermoFinnpipette）；SHB-IIIA循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）；索氏提取器；SB4200DTD超聲波清洗機(jī)（寧波新芝生物科技股份有限公司）；DF-101S集熱式恒溫加熱磁力攪拌器（河南省予華儀器有限公司）；標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)篩（40目，孔徑0.45mm）；HR7625飛利浦食品加工機(jī)。

櫻桃仁，乙醚，正己烷，KOH，甲醇，H2SO4，棕櫚酸，油酸，亞油酸，硬脂酸。

所用試劑均為分析純，水為二次蒸餾水。

1.2 分析條件

氣相色譜條件：J&W DB-WAX彈性石英毛細(xì)管色譜柱（30m×0.25mm×0.25μm）；載氣為高純He，純度≥99.999%；進(jìn)樣口溫度250℃；分流比1∶30，柱前壓84.6kPa，柱流量1.00mL·min-1；柱溫：130～240℃。柱初溫130℃，保持1 min，以20℃·min-1升溫至230℃，保持5min，再以20℃·min-1升溫至240℃，保持6.5min，共18.00min。用微量進(jìn)樣器進(jìn)樣1.0μL。

質(zhì)譜條件：EI離子源，質(zhì)量掃描范圍29～450m·z-1，質(zhì)譜檢測起測時(shí)間1.7min，溶劑峰切除時(shí)間1.6min。GC-MS接口溫度200℃，離子源溫度200℃，電子倍增器電壓0.97kV，電子能量70eV[3]。

1.3 櫻桃仁油的提取

將櫻桃仁烘干粉碎，過40目篩。稱取樣品，移入濾紙筒內(nèi)，以乙醚作溶劑，采用索式提取器，30℃恒溫水浴回流3h。倒出上清液，抽濾，將濾液放置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，蒸干乙醚后，得到櫻桃仁油樣品。

1.4 峰面積歸一法

樣品的甲酯化：準(zhǔn)確稱量櫻桃仁油于50mL圓底燒瓶中，準(zhǔn)確加入正己烷-乙醚（2∶1）溶液10.0mL，再加0.5mol·L-1KOH-甲醇溶液6.0mL，振蕩，60℃恒溫水浴回流進(jìn)行酯化反應(yīng)20min。加水至25mL，振蕩并靜置，吸取上層脂肪酸甲酯，進(jìn)行GC-MS分析。

1.5 外標(biāo)法

1.5.1 脂肪酸的甲酯化準(zhǔn)確稱量脂肪酸或樣品于25mL比色管中，準(zhǔn)確加入1%H2SO4-甲醇溶液2.0mL，于70℃水浴加熱60min。再加正己烷定容至10mL，加水至25 mL，振蕩，靜置24h，吸取上層脂肪酸甲酯，進(jìn)行GC-MS分析。

1.5.2 脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制選取常見的4種脂肪酸：棕櫚酸，油酸，亞油酸，硬脂酸。準(zhǔn)確稱量4種脂肪酸的7份標(biāo)準(zhǔn)系列于25mL比色管中，按1.5.1配制成標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行GC-MS分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 峰面積歸一法分析結(jié)果

圖1 為櫻桃仁中脂肪酸分析的GC-MS總離子流圖，對(duì)譜圖進(jìn)行鑒定和定量分析,應(yīng)用SHIMADZU GCMSsolution Release 2.10專業(yè)分析軟件。

圖1 櫻桃仁中脂肪酸分析的GC-MS總離子流圖Fig.1TIC of GC-MS of fatty acids from the cherry kernel

根據(jù)質(zhì)譜圖計(jì)算機(jī)檢索數(shù)據(jù)庫NIST 147數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，通過對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)譜圖，及質(zhì)譜碎片對(duì)峰的分析，確定每一個(gè)組分的化學(xué)結(jié)構(gòu)[3]。采用計(jì)算機(jī)檢索與人工解析各峰相應(yīng)的質(zhì)譜圖，用峰面積歸一法測定了脂肪酸的相對(duì)含量，結(jié)果見表1。

表1 櫻桃仁中脂肪酸的組成Tab.1The composition of fatty acids from the cherry kernel

2.2 外標(biāo)法分析結(jié)果

2.2 .1 四種脂肪酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2 為4種脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)品的GC-MS總離子流圖。繪制4種脂肪酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

圖2 4 種脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)品的GC-MS總離子流圖Fig.2TIC of GC-MS of the four standard substance of fatty acids

2.2 回收率與精密度

準(zhǔn)確稱取樣品（5份）于25mL比色管中，分別加入棕櫚酸、油酸、亞油酸、硬脂酸標(biāo)準(zhǔn)品，按1.5.1配制溶液，進(jìn)行分析。表2是櫻桃仁樣品中4種脂肪酸含量的回收率與精密度。

表2 4 種脂肪酸的回收率與精密度Tab.2Recovery and precision of four fatty acids

2.3 樣品分析結(jié)果

圖3 為櫻桃仁中脂肪酸分析的GC-MS總離子流圖。

圖3 櫻桃仁中脂肪酸分析的GC-MS總離子流圖Fig.3The TIC of GC-MS of fatty acids from the cherry kernel

表3為櫻桃仁中4種脂肪酸的含量。

表3 櫻桃仁中4種脂肪酸的含量Tab.3The content of four fatty acids from the cherry kernel

3 討論

對(duì)比外標(biāo)法與峰面積歸一法兩種方法分析櫻桃仁中的脂肪酸含量，峰面積歸一法較簡單易行，是相對(duì)定量，櫻桃仁以不飽和脂肪酸為主，櫻桃仁中單不飽和脂肪酸36.24%，多不飽和脂肪酸44.04%。外標(biāo)法是絕對(duì)定量，需要標(biāo)準(zhǔn)樣品，做標(biāo)準(zhǔn)曲線，準(zhǔn)確度較高，櫻桃仁中4種脂肪酸含量：亞油酸＞油酸＞棕櫚酸＞硬脂酸。

［1］魏永生，鄭敏燕，耿薇，等.常用動(dòng)、植物食用油中脂肪酸組成的分析［J］.食品科學(xué)，2012,33（16）：188-193.

［2］吳惠勤，黃曉蘭，林曉珊，等.脂肪酸的色譜保留時(shí)間規(guī)律與質(zhì)譜特征研究及其在食品分析中的應(yīng)用［J］.分析化學(xué)，2007，35（7）：998-1003.

［3］鄭敏燕，寧建剛，耿薇，等.兩種不同酯化方法分析櫻桃仁中的脂肪酸成分［J］.應(yīng)用化工,2010,39（1）：133-135.

［4］姚宏亮，蔣勝慧，劉成花.櫻桃仁油的提取工藝研究及其脂肪酸成分分析［J］.糧食與食品工業(yè)，2012，19（1）:30-32.

Fatty acid analysis of cherry kernel*

GENG Wei，ZHENG Min-yan，SHANG Yong-hui，ZHANG Jun-cai
（School of Chemistry and Chemical Engineering,Xianyang Normal University,Xianyang 712000，China）

This article analyzed the fatty acid in cherry kernel by GC-MS，comparing external standard method and peak area normalisation method to analyze quantitatively.There are different kinds of fatty acid in cherry kernel.The main kind is unsaturated fatty acid.The cherry kernel had 36.24%unsaturated fatty acid and 44.04%polyunsaturated fatty acid.The content of the four fatty acids in cherry kernel:linoleic acid＞oleic acid＞palmitic acid＞stearic acid.

cherry kernel；external standard method；peak area normalization method；GC-MS；fatty acid

O657.7

A

10.16247/j.cnki.23-1171/tq.20150318

2014-11-12

咸陽師范學(xué)院專項(xiàng)科研基金項(xiàng)目（14XSYK017）

耿薇（1982-），女，碩士，工程師，主要從事分析測試方面的研究工作。