于夕雯 周亞濱

（黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，黑龍江哈爾濱150040）

養(yǎng)心湯是出自明·王肯堂所著的《證治準(zhǔn)繩》，具有益氣養(yǎng)血、通絡(luò)止痛、寧心安神之功效，主治心虛血少，心神不寧。腫瘤壞死因子-α（TNF-α）是具有多種生物功能的一種促炎癥細(xì)胞因子。它能通過活化內(nèi)皮細(xì)胞從而促進(jìn)黏附分子的表達(dá)，在炎癥細(xì)胞聚集上起作用。還可促進(jìn)二級促炎癥細(xì)胞因子和趨化細(xì)胞因子的產(chǎn)生，由TNF-α刺激產(chǎn)生的相關(guān)炎癥因子在動脈粥樣硬化的形成中起著非常重要的作用。在心血管疾病中，例如冠心病、高血壓等TNF-α存在著嚴(yán)重的紊亂［1］。所以筆者通過對TNF-α的測定分析其在不穩(wěn)定型心絞痛中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選取黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院2010年11月至2011年12月門診患者80例，至結(jié)束研究時(shí)共有75例完成臨床試驗(yàn)。西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參照1979年國際心臟病學(xué)會協(xié)會及世界衛(wèi)生組織關(guān)于臨床命名標(biāo)準(zhǔn)化聯(lián)合專題組報(bào)告《缺血性心臟病的命名及診斷標(biāo)準(zhǔn)》［2］而定，即排外典型的穩(wěn)定型勞力型心絞痛之外的所有心絞痛類型。中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參2002年《中藥新藥治療胸痹（冠心病心絞痛）的臨床研究指導(dǎo)原則》［3］。西醫(yī)診斷均為不穩(wěn)定型心絞痛。中醫(yī)診斷為胸痹，氣血虧虛證。其中男性41例，女性34例；年齡（45～63）歲，平均（58.30±4.40）歲；病程1.5～11年，平均（5.10±2.40）年。隨機(jī)分為觀察組38例與對照組37例。兩組資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 治療方法 兩組均給予常規(guī)治療：擴(kuò)冠藥物、抗血小板聚集藥物、調(diào)脂及抗凝藥物。觀察組在基礎(chǔ)治療上加服養(yǎng)心湯：炙黃芪50 g，茯神15 g，制半夏15 g，當(dāng)歸15 g，川芎15 g，遠(yuǎn)志20 g，酸棗仁30 g，辣桂8 g，柏子仁20 g，五味子15 g，人參15 g，炙甘草15 g。加10倍的水浸泡2 h后煎煮2 h，再經(jīng)過濾加入8倍的水煮1.5 h，再經(jīng)過濾，加入6倍量的水繼續(xù)煎煮1 h經(jīng)過濾，將3次濾液混勻待服，長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥劑室制備，每日1劑，每次150 mL，分2次服。療程為4周。

1.3 TNF-α檢測應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)，操作均有同一人完成。在8︰00時(shí)前所有觀察對象均空腹抽取肘靜脈血5 mL，經(jīng)3000 r/min，速度離心10 min，分離上層血清1 mL。精密吸取200 μL血清置于具塞離心管中，加入800 μL甲醇，震蕩30 s后，4℃、13000 rpm離心15 min，取上清液置于Waters進(jìn)樣小瓶中，備UPLC-MS分析。將患者血漿分4組，分別為觀察組療前、療后；對照組療前、療后。分別提取血漿中總RNA。初步評價(jià)總RNA的質(zhì)量可以通過目測28S和18S的亮度比例，判定總RNA的質(zhì)量較好一般認(rèn)為28S/18S≥2。分光光度計(jì)分析，測定總RNA的OD260/OD280值，其比值均≥1.8。TNF是一種管家基因，穩(wěn)定表達(dá)在正常組織中，以此作為TNF-α內(nèi)對照，進(jìn)行相對拷貝數(shù)的內(nèi)對照。在瓊脂糖凝膠電泳膠紫外燈下，RT-PCR產(chǎn)物均可見：電泳條帶亮度各組Gapdh一致，擴(kuò)增片斷均為486 bp。在瓊脂糖凝膠電泳膠紫外燈下RT-PCR產(chǎn)物可見：各組IGFBP-2電泳條帶亮度在不同的組內(nèi)表達(dá)不同，擴(kuò)增片斷均325 bp。用電泳圖像分析系統(tǒng)及凝膠掃描對其進(jìn)一步分析，對電泳凝膠片用IGFBP-2/Gapdh mRNA RT-PCR電泳產(chǎn)物灰度掃描，比值經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算。1.4療效標(biāo)準(zhǔn)顯效：（1）Ⅰ、Ⅱ級或輕、中度心絞痛癥狀消失或基本消失，不用硝酸甘油；（2）原有Ⅲ級或較重度心絞痛發(fā)作程度較治療前降低2級以上。有效：（1）Ⅰ級或輕度心絞痛較治療前發(fā)作次數(shù)、程度及持續(xù)時(shí)間有明顯減輕；（2）Ⅱ級、Ⅲ級或中度、較重度心絞痛治療前心絞痛分級減少1級或1度。無效：較治療前心絞痛發(fā)作程度不變。加重：較治療前心絞痛發(fā)作加重1級或1度以上。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件。采用t檢驗(yàn)及χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床療效比較見表1。結(jié)果 示觀察組總有效率明顯高于對照組（P＜0.05）。

表1 兩組臨床療效比較（n）

2.2 兩組治療前后TNF-α水平比較見表2。兩組治療后TNF-α表達(dá)水平均明顯降低（P＜0.01）；觀察組下降程度優(yōu)于對照組（P＜0.05）。

3 討論

冠心病不穩(wěn)定型心絞痛歸屬于中醫(yī)學(xué)“胸痹”、“心痛”范疇，病機(jī)屬于本虛標(biāo)實(shí)。在本虛為氣血陰陽虧虛，在標(biāo)實(shí)為痰濁、氣滯、瘀血等，均使心脈痹阻發(fā)為本病?！端貑枴づe痛論》曰“寒氣入經(jīng)而稽遲泣而不行，客于脈外則血少，客于脈中則氣不通，故卒然而痛”?！端貑枴っ}要精微論》云“脈者血之府也，澀則心痛”。《素問·評熱病論》云“邪之所湊，其氣必虛……”以上皆說明冠心病的發(fā)病主要病因是心脈的瘀阻，但氣為血之帥，陽氣的虛衰或痹阻則可最終導(dǎo)致血液的運(yùn)行不暢而致瘀阻，不通則痛；而冠心病氣虛的患者也因氣虛無力鼓動血脈運(yùn)行，血行緩慢而致脈道失充，不榮則痛。養(yǎng)心湯正是從此為出發(fā)確立了益氣養(yǎng)血，養(yǎng)心安神的治療方法 ，是以黃芪、人參為君藥；以補(bǔ)養(yǎng)五臟之氣，滋養(yǎng)心氣，使得心氣旺，鼓動有力，氣為血之帥，氣充則行血有力，氣血運(yùn)行則脈道通暢。茯神、白茯苓、川芎、當(dāng)歸為臣藥；川芎、當(dāng)歸活血、行血、養(yǎng)血。茯苓茯神安心神、健脾氣。君臣相配使得補(bǔ)而不滯，補(bǔ)中有通，氣血行，則心火散。同時(shí)川芎、當(dāng)歸性溫可以助參芪溫陽化氣之妙，半夏、酸棗仁、辣桂、遠(yuǎn)志、柏子仁、五味子為佐藥；五味子、柏子仁、酸棗仁味酸性平，與甘草合為酸甘化陰，助參芪歸斂心氣，養(yǎng)心陰益肝血安神養(yǎng)心；半夏、遠(yuǎn)志、辣桂味辛，配甘草辛甘養(yǎng)陽。炙甘草為使藥。本方合用使得氣血充足，陰陽平衡，脈道通暢。

TNF-α是具有多種生物功能的一種促炎癥細(xì)胞因子［4］，能通過活化內(nèi)皮細(xì)胞從而促進(jìn)黏附分子的表達(dá)，在炎癥細(xì)胞聚集上起作用，還可促進(jìn)二級促炎癥細(xì)胞因子和趨化細(xì)胞因子的產(chǎn)生，由TNF-α刺激產(chǎn)生的相關(guān)炎癥因子在動脈粥樣硬化的形成中起著非常重要的作用。本研究是在基礎(chǔ)治療的同時(shí)應(yīng)用養(yǎng)心湯治療不穩(wěn)定型心絞痛，結(jié)果 顯示觀察組總有效率明顯高于對照組，提示在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用養(yǎng)心湯效果明顯。同時(shí)在兩組血漿TNF-α的表達(dá)上治療前后發(fā)生明顯變化，觀察組療后與對照組療后比較差異顯著，說明在調(diào)節(jié)血漿TNF-α上具有明顯的作用，考慮養(yǎng)心湯在治療不穩(wěn)定型心絞痛上效果明顯可能與調(diào)節(jié)血清TNF-α有關(guān)，其具體的機(jī)理還需要進(jìn)一步的研究。

表2 兩組血漿TNF-α、RT-PCR電泳產(chǎn)物灰度掃描比值（s）

表2 兩組血漿TNF-α、RT-PCR電泳產(chǎn)物灰度掃描比值（s）

與本組治療前比較，*P＜0.05；與對照組治療后比較，△P＜0.05。

組別nIGFBP-2/Gapdh觀察組治療前2.88±0.06（n＝38）治療后1.31±0.08*△對照組治療前2.88±0.02（n＝37）治療后1.99±0.07*

［1］ 田海玲，王國宏.血漿腫瘤壞死因子和白細(xì)胞介素Ⅱ與冠心病關(guān)系的臨床研究［J］.中國全科醫(yī)學(xué)雜志，2000，3（6）：437-439.

［2］ 國際心臟病學(xué)會和協(xié)會及世界衛(wèi)生組織臨床命名標(biāo)準(zhǔn)化聯(lián)合專題組.缺血性心臟病的命名及診斷標(biāo)準(zhǔn)［J］.中華心血管病雜志，1981，9（1）：75.

［3］ 中華人民共和國衛(wèi)生部.中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2002：68-73.

［4］ 董歡，呂崇山.炎癥、毒邪與動脈硬化［J］.亞泰傳統(tǒng)醫(yī)藥，2009，5（7）：136-137.