張 漫 李志榮 王 輝

（1天津市獸藥飼料監(jiān)察所，天津市 300402；2天津市畜牧獸醫(yī)局，天津市 300384）

人畜共患寄生蟲病的研究進展

張 漫1李志榮2王 輝1

（1天津市獸藥飼料監(jiān)察所，天津市 300402；2天津市畜牧獸醫(yī)局，天津市 300384）

人畜共患寄生蟲病是危害極大的疾病，其危害主要包括三方面：一是人類健康的大敵；二是嚴重危害公共衛(wèi)生安全；三是給畜牧業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失。為此對人畜共患寄生蟲病的研究具有十分重要的意義。本文僅以血吸蟲病、弓形蟲病、豬帶絳蟲病、瘧疾及旋毛蟲病等5種重要的人畜共患寄生蟲病為例，論述人類對人畜共患寄生蟲病的研究進展。

人畜共患寄生蟲?。谎x?。还蜗x病；豬帶絳蟲??；瘧疾；旋毛蟲病

人畜共患寄生蟲病是指由人畜共患寄生蟲引起的寄生蟲病。包括原蟲病、蠕蟲?。ň€蟲病、吸蟲病、絳蟲病和棘頭蟲?。?、蜘蛛昆蟲病三種，其中對人類危害比較大、通常意義上被認為比較重要的人畜共患寄生蟲病有日本血吸蟲病、豬囊蟲病、棘球蚴病、旋毛蟲病、弓形蟲病、隱孢子蟲病和肉孢子蟲病等。

寄生蟲是危害人畜健康的3大主要病原生物 （病毒、細菌和寄生蟲）之一。統(tǒng)計結(jié)果顯示，在眾多的人畜共患傳染病中，67%的病原是寄生蟲。我國自建國以來雖然在寄生蟲病防制方面做了大量工作，但仍是世界上寄生蟲病流行非常嚴重的國家之一。其中的人畜共患寄生蟲病危害極大，它是人類健康的大敵，嚴重危害公共衛(wèi)生安全，給畜牧業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失，為此人類對人畜共患寄生蟲病的研究從來沒有停止過。下面僅以血吸蟲病、弓形蟲病、豬帶絳蟲病、瘧疾及旋毛蟲病等5種重要的人畜共患寄生蟲病為例，論述人類對人畜共患寄生蟲病的研究進展。

1 血吸蟲病

血吸蟲病在我國流行范圍達200萬平方公里，感染人群1100多萬，受威脅人群1億多。主要流行于湖北、湖南、江西、安徽、浙江、江蘇、云南、福建、廣東、四川、廣西和上海等12個?。ㄊ校┲械?13個市縣。

隨著基因測序技術(shù)在人畜共患寄生蟲病研究中的應(yīng)用，依據(jù)對血吸蟲線粒體NADH脫氫酶和細胞色素氧化酶的基因測序，將我國血吸蟲分離株分為山地型（云南、 四川等地）、 湖泊型（湖南、江西等地）和其他型（湖北等地）。近年的研究顯示，30%～40%的血吸蟲基因在進化上呈保守性，1/3的基因可能僅為血吸蟲所特有。血吸蟲還含有與宿主體內(nèi)高度同源的激素受體，如性激素受體、胰島素受體、神經(jīng)肽受體及細胞因子受體等，存在著利用宿主體內(nèi)激素等物質(zhì)促進自身生長發(fā)育。

1.1 血吸蟲病的診斷

血吸蟲病診斷方面已取得一定研究成果，目前血吸蟲實驗室診斷常用ELISA、PCR擴增技術(shù)及銀增強膠體金免疫分析技術(shù)等檢測。其中全血ELISA診斷血吸蟲病，具有快速、簡單、價廉的特點，主要用于流行病學(xué)調(diào)查和臨床的快速診斷；PCR擴增技術(shù)用血吸蟲線粒體DNA為標志物，檢測血吸蟲感染；銀增強膠體金免疫分析技術(shù)是將銀染與膠體金免疫分析技術(shù)相結(jié)合。以上幾種診斷技術(shù)的應(yīng)用可滿足臨床需求。

1.2 血吸蟲病的防治

血吸蟲病防制方面的大量研究顯示，將從檳榔中提取的生物堿與氯硝柳胺等化學(xué)滅螺藥一起使用，能起到降低化學(xué)滅螺藥使用劑量的目的，從而減輕滅螺藥對魚苗的傷害，并能抑制釘螺上爬，滅螺效果也不錯。

為阻斷血吸蟲病的傳播與流行，有效避免滅螺藥對環(huán)境造成的不良影響，人們在血吸蟲病疫苗研究方面做了大量工作，主要經(jīng)歷了全蟲疫苗到分子疫苗的發(fā)展過程，其中全蟲疫苗主要包括死疫苗、活疫苗、同種致弱活疫苗和異種活疫苗，分子疫苗主要包括基因工程亞單位疫苗、合成肽疫苗和核酸疫苗。隨著生物高新技術(shù)的發(fā)展，血吸蟲疫苗候選抗原分子或抗原基因不斷被發(fā)現(xiàn)和鑒定，分子疫苗已成為主要研究方向。合成肽疫苗方面的研究成果顯示，根據(jù)谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶基因（Sm28GST）序列，已合成了（P26）4-MAP 和（P116）4-MAP兩種多肽， 免疫后能顯著降低蟲體負荷和蟲卵數(shù)。核酸疫苗方面的研究成果顯示，免疫刺激序列（CpG）、IL-12與膜蛋白Sj23基因構(gòu)建的核酸疫苗，增強免疫效果明顯。其他分子疫苗方面的研究成果包括：用表達曼氏血吸蟲抗原Sm14的減毒沙門氏菌口服免疫小鼠，可使特異性IgG水平升高；已研究出抗血吸蟲雌蟲產(chǎn)卵、抗蟲卵發(fā)育的分子疫苗，應(yīng)用結(jié)果顯示，可顯著降低宿主糞便中的成熟蟲卵的數(shù)量，有效切斷傳播途徑。

2 弓形蟲病

弓形蟲病是由剛地弓形蟲引起的一種人畜共患寄生蟲病。弓形蟲的卵囊、包囊或假包囊被貓科動物吞食后發(fā)育成卵囊，隨糞便排出后感染中間宿主。臨床上表現(xiàn)為呼吸困難、發(fā)熱、貧血、流產(chǎn)，胎兒畸形等癥狀。

弓形蟲病在我國各?。▍^(qū)、市）均有感染報導(dǎo)，20世紀末在我國弓形蟲感染人群達5%～10%，到2000年全國有6000萬人感染弓形蟲病，其中新生兒童中每1萬名中就有13名先天感染者。

大量文獻均顯示，IFN-γ是宿主抗弓形蟲的重要細胞因子，可從多種途徑參與對抗弓形蟲感染。弓形蟲通過蟲體表面的黏附素MIC2與細胞內(nèi)的黏附分子1（ICAM-1）相互作用，由細胞旁路穿過宿主的生物屏障，不改變宿主細胞生物屏障的完整性?；畹南x體能誘導(dǎo)STAT3磷酸化和抑制LPS激發(fā)的TNF和IL-12的產(chǎn)生，而死亡的細胞則可以限制細胞內(nèi)蟲體的復(fù)制和調(diào)整宿主免疫應(yīng)答。

2.1 弓形蟲病的診斷

目前弓形蟲病診斷方法主要包括血清學(xué)診斷方法和PCR診斷方法。

2.1.1 血清學(xué)診斷方法

血清學(xué)診斷方法包括以下內(nèi)容：弓形蟲特異IgG和IgM化學(xué)發(fā)光免疫診斷技術(shù)、免疫磁性分離技術(shù)、檢測IgG和IgM抗體的血吸蟲病快速診斷試紙條（DDIA） 技術(shù)。

弓形蟲特異IgG和IgM化學(xué)發(fā)光免疫診斷技術(shù)：該技術(shù)是以化學(xué)發(fā)光和結(jié)合到磁性微粒上的抗原為基礎(chǔ)，能快速準確檢測弓形蟲的特異抗體。

免疫磁性分離技術(shù)，它是用針對卵囊壁的單克隆抗體（3G4和 4B6）建立起的診斷技術(shù)，該技術(shù)能有效回收弓形蟲卵囊，可用于水生樣品的弓形蟲檢測，對檢測弓形蟲循環(huán)抗原具有早期診斷價值。

檢測IgG和IgM抗體的DDIA技術(shù)：該技術(shù)是使用一種膠體染料D-1標記羊抗人IgG和兔抗人IgM作為可肉眼觀察的試劑，用弓形蟲速殖子可溶性抗原作為檢測抗原，染料標記的抗人抗體通過免疫層析被俘獲到硝酸纖維素膜上，該方法僅需15分鐘即可完成，使用該方法簡單、廉價，不需任何儀器，尤其適于野外應(yīng)用。

2.1.2 PCR 診斷方法

當臨床癥狀不明顯或血清學(xué)診斷失敗時，PCR方法優(yōu)勢明顯，它能有效避免血清學(xué)診斷造成的漏診或誤診，高敏感度的實時定量PCR診斷技術(shù)能定量檢測血清單核細胞中的弓形蟲B1基因和慢殖子特異性基因（SAG-1，MAG-1）。

2.2 弓形蟲病的防治

2.2.1 弓形蟲病的預(yù)防

在弓形蟲病預(yù)防方面，重點是搞好環(huán)境衛(wèi)生，加強人畜糞便管理，防止水源及食物污染，對于特殊人群應(yīng)避免接觸貓、狗等動物，并定期采血進行血清學(xué)檢測。

疫苗預(yù)防方面，人們研制出了弓形蟲疫苗。其中英特威公司研制的弓形蟲DNA疫苗，通過滴鼻方式免疫，可達到預(yù)防綿羊弓形蟲病的效果。有關(guān)弓形蟲核酸疫苗的研究還在進行當中，還有報道稱，用粗制弓形蟲棒狀體蛋白結(jié)合免疫刺激復(fù)合物作為疫苗免疫豬，可部分保護豬形成組織包囊；用減毒的沙門氏菌載體表達霍亂毒素亞基A2B上的SAG1和SAG2，作為弓形蟲疫苗，口服能誘導(dǎo)機體產(chǎn)生對抗弓形蟲感染的保護反應(yīng)。

2.2.2 弓形蟲病的治療

在弓形蟲病治療方面，目前有效的藥物包括：乙胺嘧啶、磺胺嘧啶或磺胺二甲基嘧啶、螺旋霉素、氯林可霉素等。

3 豬帶絳蟲病

豬帶絳蟲病是一種在世界范圍內(nèi)廣泛分布的人畜共患寄生蟲病，其中主要流行于亞、非、拉美等洲的一些國家和地區(qū)。

豬帶絳蟲成蟲寄生于人體小腸中，當孕節(jié)隨糞便排出后，經(jīng)2～3天發(fā)育，蟲卵的成熟率顯著提升。當中間宿主經(jīng)口感染蟲卵后，在肌肉等組織發(fā)育為幼蟲即囊尾蚴。囊尾蚴及其分泌/代謝產(chǎn)物還有抑制、降低宿主免疫應(yīng)答的作用，后期幼蟲能通過分泌某些物質(zhì)來逃避補體對它的破壞。

3.1 豬帶絳蟲病的診斷

對囊尾蚴病的診斷和流行病學(xué)調(diào)查通常應(yīng)用ELISA法。試驗證明，以硝酸纖維素薄膜（NC）代替聚苯乙烯反應(yīng)板，能顯著提高免疫診斷的靈敏性和特異性，具有快速、靈敏、特異和簡便的特點。

我國研制開發(fā)出的囊蟲IgG膠體金診斷試劑盒（層析法），其敏感性和特異性均達到很高要求?？焖倜庖呓饾B濾法（dot-immuogold filtration assay， DIGFA）用于檢測患者循環(huán)抗原，具有簡便、快速、無交叉反應(yīng)的特點。目前基于重組抗原的ELISA試劑盒和金標試紙條正在研制中。

3.2 豬帶絳蟲病的治療

對囊尾蚴病的治療方案通常為:對高發(fā)區(qū)的豬進行疫苗免疫，對絳蟲患者進行藥物驅(qū)蟲。傳統(tǒng)疫苗所用抗原有全囊尾蚴抗原、分泌/代謝（E/S）抗原、異源抗原以及六鉤蚴抗原，但這些抗原的來源非常有限。

隨著基因工程技術(shù)的不斷發(fā)展，誕生了羊帶絳蟲45W基因工程重組抗原疫苗，掀開了豬囊尾蚴病免疫預(yù)防的新篇章。試驗證明，豬囊尾蚴DNA疫苗能有效降低蟲體負荷、降低囊尾蚴數(shù)量。目前用于預(yù)防囊尾蚴病的基因工程重組疫苗研究已獲成功，能起到很好的免疫保護作用，同時具有跨種保護的重要特性。

今后，多抗原、多抗原表位、多基因間組合將是豬囊蟲高效疫苗的發(fā)展方向。

4 瘧疾

瘧疾俗名 “冷熱病”、 “打擺子”，是由瘧原蟲引起的、主要通過瘧蚊傳播的人畜共患寄生蟲病，該病遍及世界90多個國家和地區(qū)。2002年全球約有5億多瘧疾感染者，在非洲每年超過100萬兒童死于瘧疾，是當?shù)貎和念^號殺手。寄生于人體的瘧原蟲有間日瘧、三日瘧、惡性瘧和卵形瘧4種?；颊叱霈F(xiàn)間歇性發(fā)作的寒戰(zhàn)、高熱，繼而大汗等癥狀，嚴重時甚至危及生命，一般人感染瘧疾的潛伏期為14天左右。在我國，2004年報告病例37000例，死亡30余例；2005年報告39000例，死亡40余例。其中惡性瘧主要分布于云南和海南等地，間日瘧主要分布于安徽、河南和湖北等淮河流域。

4.1 瘧疾的診斷

對瘧疾的診斷主要包括顯微鏡檢查法、ELISA法和PCR法。

4.1.1 顯微鏡檢查法

顯微鏡檢時，采用熒光染色顯微鏡檢查可提高瘧原蟲的檢出率。

4.1.2 免疫診斷法

在應(yīng)用ELISA法診斷時，利用單克隆抗體作包被抗體的ELISA診斷試劑盒，不僅對惡性瘧的敏感性和特異性很高，還具有鑒別蟲體死活、評價藥效及預(yù)測復(fù)發(fā)等優(yōu)點。應(yīng)用惡性瘧原蟲富組蛋白Ⅱ單克隆抗體制作的試紙條，具有敏感性高、特異性強、操作簡便等特點，應(yīng)用前景很好。

4.1.3 PCR 法

在應(yīng)用PCR法診斷時，由于該診斷方法具有極高的檢測敏感性和特異性，特別適用于大規(guī)模流行病學(xué)研究以及用于評價藥物效果、疫苗免疫效果和混合感染程度等。對于PCR檢測濾紙的使用，能更方便快捷地實施診斷，特別適用于邊遠地區(qū)的瘧疾診斷。對于能同時診斷4種瘧原蟲感染的PCR診斷技術(shù)更拓寬了檢測范圍，該診斷技術(shù)已研發(fā)成功，并已達到一定的診斷水平。

4.2 瘧疾的防治

4.2.1 藥物治療和預(yù)防

在瘧疾的治療和預(yù)防方面，抗瘧藥是十分重要的手段。其中氯喹啉、奎寧、甲氟喹、青蒿素、蒿甲醚、新藥馬拉隆均有治療和預(yù)防瘧疾的作用，但長期、大量甚至過量地使用抗瘧藥可以使瘧原蟲產(chǎn)生耐藥性，嚴重影響防治效果。在眾多抗瘧藥中，目前還沒有一種能對瘧原蟲各生活環(huán)節(jié)都具有殺滅作用的藥物。

目前的研究顯示，用瘧原蟲半胱氨酸蛋白酶的特異性抑制劑可以阻止瘧原蟲入侵宿主紅細胞，該特性為研制開發(fā)新抗瘧藥指明了方向。

有最新研究報道應(yīng)用維生素B6的合成途徑，有望為新藥開發(fā)提供作用靶位，實現(xiàn)應(yīng)用生化的方法治療瘧疾的目的。

4.2.2 疫苗預(yù)防

在瘧疾預(yù)防方面，最有效的辦法就是注射疫苗，目前疫苗研究已取得一定進展，我國科學(xué)家已發(fā)現(xiàn) “傳播阻斷候選瘧疾抗原”，為瘧疾疫苗的研制和生產(chǎn)打下基礎(chǔ)。研究發(fā)現(xiàn)，干擾肝細胞產(chǎn)生一種肝細胞生長因子的干擾因子具有使肝臟免受瘧疾侵襲的特性，因此這種干擾因子的研究也將是預(yù)防瘧疾的一個研究方向。此外，轉(zhuǎn)基因蚊子也被證明具有降低瘧疾傳播的特性，但對轉(zhuǎn)基因物種的研究需謹慎。

5 旋毛蟲病

旋毛蟲病是由旋毛蟲寄生于哺乳動物而引起的人畜共患寄生蟲病，在家畜中以豬的患病率最高。本病在美國、法國、西班牙、意大利、加拿大、黎巴嫩以及我國的15個省（區(qū)、市）均有病例報告。至2002年，我國已暴發(fā)流行性人旋毛蟲病500余起，發(fā)病2萬余人，死亡200余人，主要分布于云南、廣西、河南、湖北、吉林、西藏等具有生食或半生食肉類習慣的地區(qū)。

5.1 旋毛蟲病的診斷

對旋毛蟲病的診斷采用目檢和鏡檢方法比較繁瑣，ELISA和IFA法具有敏感性和特異性的優(yōu)勢。有研究表明，單抗細胞株能有效減蟲。我國研制成功的快速診斷試紙條，具有簡便、快速、準確率高的特點。旋毛蟲幼蟲冷凍切片抗原間接熒光抗體試驗 （IFAT）法和DNA重組抗原可提高早期旋毛蟲的檢出率。隨著對成蟲、肌幼蟲和新生幼蟲表達序列標簽（ESTs）和各階段 cDNA文庫的建立，為進一步研究旋毛蟲病診斷工作奠定了基礎(chǔ)。

5.2 旋毛蟲病的防治

目前治療旋毛蟲病無特效藥，因此預(yù)防工作意義重大。隨著研究的深入，豬旋毛蟲病重組抗原疫苗和DNA疫苗有望研制成功。

在人類歷史上，人畜共患寄生蟲病始終與人類如影同行。隨著時代發(fā)展和社會進步，新發(fā)病不斷出現(xiàn)，舊病存在卷土重來的危險，因此人類同人畜共患寄生蟲病的斗爭將長久地持續(xù)下去。隨著免疫學(xué)、基因組學(xué)和分子生物學(xué)等高新技術(shù)在人畜共患寄生蟲病研究領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用，寄生蟲疫苗將在人畜共患寄生蟲病防制中發(fā)揮更加重要的作用。大量研究結(jié)果表明，接種疫苗能使機體產(chǎn)生保護性免疫，但遺憾的是，目前研制的疫苗大多尚未達到令人滿意的保護效果。為此，抗原分離篩選、基因克隆重組及高效表達、提高疫苗免疫保護率等仍將是今后的研究重點。

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C

1673-4645（2012）11-0043-03

2012-08-13