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        赤水撐綠竹根腐病菌室內(nèi)藥劑篩選

        2012-01-22 06:41:26任春光劉曼倪云躍向準(zhǔn)桑維鈞方洪剛
        中國森林病蟲 2012年2期
        關(guān)鍵詞:綠竹孢菌根腐病

        任春光,劉曼,倪云躍,向準(zhǔn),桑維鈞,方洪剛

        (1.貴州科學(xué)院生物研究所,貴陽 550009;2.貴州大學(xué),貴陽 550025;3.貴州赤天化紙業(yè)公司,赤水 564700)

        撐綠竹是赤水市引進(jìn)的優(yōu)良雜交種,出筍多,生長快,產(chǎn)量高,無性繁殖力強(qiáng),既是紙漿材、紡織材,又是優(yōu)良的筍用竹種。隨著竹業(yè)生產(chǎn)集約化程度的逐漸提高,撐綠竹種植面積不斷擴(kuò)大,病害種類、發(fā)病程度也隨之增多。2008年10月—2010年3月對赤水撐綠竹根腐病進(jìn)行了調(diào)查和鑒定,結(jié)果表明撐綠竹根腐病是撐綠竹的重要病害,病原是尖孢鐮孢菌Fusarium oxysporum Schlecht,主要危害根系,嚴(yán)重時(shí)引起整株枯死[1]。為了有效控制該病的發(fā)生和蔓延,作者采用生長速率法和懸滴法室內(nèi)測定了8種常用殺菌劑對該病原菌菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑制作用,篩選出控制效果較好的殺菌劑,以為田間防治提供理論依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 藥劑對病菌菌絲生長的抑制試驗(yàn)[1-4]

        1.1.1 供試藥劑 藥劑共8種。每種藥劑先配制好比供試濃度高10倍的母液,測定時(shí)按系列稀釋法再配制成所需濃度。各種藥劑劑型、生產(chǎn)廠家及稀釋倍數(shù)見表1。

        表1 供試殺菌劑及使用濃度

        1.1.2 抑菌試驗(yàn) 用8種藥劑配成不同濃度的PDA平板,用打孔器將病菌菌落打成直徑5 mm的菌餅,移到含藥PDA平板上,25℃恒溫培養(yǎng)。另設(shè)清水空白對照。每個(gè)處理重復(fù)3次,7 d后,用十字交叉法測量菌落直徑,計(jì)算相對抑制率。

        相對抑制率(%)=(對照菌落直徑-0.5)-(處理菌落直徑-0.5)/(對照菌落直徑-0.5)×100

        1.1.3 藥劑對病原菌孢子萌發(fā)的抑制試驗(yàn)[1-7]供試菌株在PDA培養(yǎng)基上25℃恒溫黑暗培養(yǎng)箱中培養(yǎng),待有大量分生孢子產(chǎn)生時(shí),加入4%蔗糖溶液使孢子充分懸浮并稀釋(在16×40倍顯微鏡下每視野中有80~100個(gè)分生孢子)。分別吸取50 mL孢子懸浮液及等量的農(nóng)藥稀釋液混合,滴在潔凈的凹玻片上,將玻片放入有濕濾紙的保濕培養(yǎng)皿內(nèi),置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中,以無菌水替代農(nóng)藥作對照,8 h后定時(shí)在顯微鏡下觀察對照孢子萌發(fā)情況。當(dāng)對照孢子萌發(fā)率達(dá)到最大時(shí),檢查各處理孢子萌發(fā)率,每處理重復(fù)3次,每個(gè)重復(fù)檢測300個(gè)孢子。按下式計(jì)算孢子萌發(fā)率和藥劑對孢子萌發(fā)的抑制率。

        孢子萌發(fā)率(%)=(萌發(fā)的孢子數(shù)量/300)×100

        抑菌率(%)=(對照孢子萌發(fā)率-處理孢子萌發(fā)率)/對照孢子萌發(fā)率×100

        1.1.4 毒力測定 將抑制率換算成抑制機(jī)率值,以設(shè)定藥劑濃度的對數(shù)值為橫坐標(biāo),以抑制機(jī)率值為縱坐標(biāo),做回歸直線,分別求出各種藥劑對撐綠竹根腐病病原菌的毒力回歸方程及EC50。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 殺菌劑對尖孢鐮孢菌絲生長的影響 以第7天的菌落直徑作檢驗(yàn),結(jié)果表明,在供試的8種殺菌劑中,以70%敵磺鈉WP、3%廣枯靈AS的抑菌作用最強(qiáng),其次為70%甲基硫菌靈WP、10%苯醚甲環(huán)唑WG,其余4種殺菌劑抑菌效果相對較差,詳見表2。

        2.2 殺菌劑對尖孢鐮孢菌孢子萌發(fā)的影響 顯微鏡觀察表明,在25℃黑暗條件下培養(yǎng)16 h后,對照分生孢子萌發(fā)率為100%;藥劑處理的8種殺菌劑對孢子萌發(fā)均有不同程度的抑制作用。其中70%敵磺鈉WP對孢子萌發(fā)的抑制率95%以上,3%廣枯靈 AS、70%甲基硫菌靈 WP、10%苯醚甲環(huán)唑WG對孢子萌發(fā)的抑制率都在80%以上,剩余幾種相對較差,詳見表3。

        2.3 8種藥劑對尖孢鐮孢菌的毒力 在8種藥劑中以70%敵磺鈉WP對尖孢鐮孢菌的毒力最高,其EC50值最小,僅為0.072 5 μg/mL;其次為3%廣枯靈 AS,EC50值為0.112 6 μg/mL,50%代森錳鋅 WP 毒力最低,EC50值為2 395.521 7 μg/mL,詳見表4。

        表2 不同藥劑對病菌菌絲生長的抑制作用

        3 小結(jié)與討論

        殺菌劑室內(nèi)抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明,供試的8種殺菌劑在不同濃度下對尖孢鐮孢菌的孢子萌發(fā)和菌絲生長均有不同程度的抑制作用。其中,70%敵磺鈉WP、3%廣枯靈 AS對菌絲生長與孢子萌發(fā)的抑制效果都很明顯;而70%甲基硫菌靈 WP、10%苯醚甲環(huán)唑 WG能影響孢子的萌發(fā)但不同時(shí)抑制菌絲的生長,這可能是病原菌在PDA平板上獲得了比蔗糖溶液更好的營養(yǎng),使菌絲能夠生長伸長。經(jīng)過進(jìn)一步室內(nèi)毒力測定表明,供試8種殺菌劑在一定濃度內(nèi)對尖孢鐮孢菌都有不同程度的抑制作用,并且隨著濃度增加抑制作用加強(qiáng)。至于篩選的藥劑對野外竹林的防效如何,有關(guān)試驗(yàn)正在進(jìn)行中。

        表3 不同藥劑對病菌孢子萌發(fā)的影響

        表4 藥劑對根腐病病菌的毒力測定

        [1] 任春光,桑維鈞,劉曼,等.撐綠竹雜交竹根腐病的病原鑒定[J].中國森林病蟲,2011,30(6):5 -7.

        [2] 任春光,劉曼,桑維鈞,等.撐綠竹赤霉病的病原菌鑒定及殺菌劑毒力測定[J].中國森林病蟲,2009,28(4):5 -7.

        [3] 呂康生,陸小妹.撐×綠雜交竹枯死原因研究初報(bào)[J].廣西植保,2004(2):3-6.

        [4] 胡國良,余采珠,樓君芳,等.高節(jié)竹梢枯病發(fā)生規(guī)律及防治試驗(yàn)[J].中國森林病蟲,2005,24(5):38 -41.

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