柳愛華 宋奉俠 郝明革 孫文芝 馮光 儲(chǔ)穆庭 張莉

（遼寧省沈陽(yáng)市婦女兒童保健中心 遺傳室，遼寧 沈陽(yáng) 110032）

出生缺陷是我國(guó)圍產(chǎn)兒死亡的主要原因之一，其中染色體病是先天性多發(fā)畸形、智力低下及身體發(fā)育遲緩的重要原因。本中心自2004年開始在全市范圍進(jìn)行孕中期母血清產(chǎn)前篩查，至2011年共篩查153 910例，現(xiàn)將高風(fēng)險(xiǎn)病例進(jìn)行羊水診斷的結(jié)果分析如下。

1 對(duì)象與方法

1．1 對(duì)象 自2004年7月至2011年9月在本中心產(chǎn)前門診及各區(qū)縣婦保所，在知情同意的情況下，妊娠15～20＋6周的孕婦，參加產(chǎn)前篩查，以末次月經(jīng)計(jì)算孕周，月經(jīng)不規(guī)律則以超聲檢查胎齡為準(zhǔn)，孕婦平均年齡在27．76歲。

1．2 方法

1．2．1 空腹抽取非抗凝靜脈血2 ml，分離血清后－20℃凍存。各區(qū)縣婦保所標(biāo)本每周派專人收集轉(zhuǎn)運(yùn)。

1．2．2 儀器和試劑 采用時(shí)間分辨免疫熒光法（AUTODELFIA 1235，Wallac），雙標(biāo)試劑盒（AFP／Freeβ－HCG）（美國(guó)Perkin Elmer公司），嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作。

1．2．3 高風(fēng)險(xiǎn)病例判斷標(biāo)準(zhǔn) 所有測(cè)定值采用中位數(shù)倍數(shù)（MOM）表示，根據(jù)年齡、孕周、體重、血清測(cè)定值等，由2T－risk分析軟件判斷風(fēng)險(xiǎn)概率。21－三體高風(fēng)險(xiǎn)切割值為1∶270，≥1∶270為高風(fēng)險(xiǎn)；18－三體高風(fēng)險(xiǎn)切割值為1∶350，≥1∶350為高風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)高風(fēng)險(xiǎn)病例的孕婦進(jìn)行電話通知，到本中心遺傳咨詢門診進(jìn)行咨詢。經(jīng)核實(shí)孕周和超聲測(cè)定胎兒大小，再次核實(shí)篩查結(jié)果，仍是高風(fēng)險(xiǎn)的孕婦在知情同意的情況下進(jìn)行羊膜腔穿刺、細(xì)胞培養(yǎng)及染色體核型分析。

1．2．4 羊水細(xì)胞培養(yǎng)及核型分析 將30 ml羊水分裝到2個(gè)15 ml無(wú)菌離心管中，1500 r／min，離心8 min，去上清，注入5 ml培養(yǎng)基（BIO－AMF－2，以色列），混勻制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)（Nunc，丹麥），放置在37℃，5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)開放式培養(yǎng)。靜置7天換液，鏡下觀察，適時(shí)收獲。標(biāo)本制片后80℃，2 h老化，胰酶消化，Giemsa染色。常規(guī)，計(jì)數(shù)30個(gè)分裂相，常規(guī)分析3～4個(gè)分裂相，如有異常加倍分析。

2 結(jié) 果

2．1 產(chǎn)前篩查結(jié)果 共對(duì)153 910名孕婦進(jìn)行母血清產(chǎn)前篩查，21－三體和18－三體高風(fēng)險(xiǎn)者共8559例，占篩查總?cè)藬?shù)的5．56%。按知情同意的原則，其中3546例進(jìn)行羊膜腔穿刺和細(xì)胞培養(yǎng)，經(jīng)核型分析發(fā)現(xiàn)異常核型76例，比率為2．14%。

2．2 產(chǎn)前診斷結(jié)果 76例異常核型中，47，XX（XY），＋21共21例，其中易位型21－三體1例；47，XX（XY），＋18共15例，性染色體異常11例，發(fā)現(xiàn)1例三倍體，其他異常核型28例（表1）。

表1 產(chǎn)前篩查高風(fēng)險(xiǎn)病例產(chǎn)前診斷異常情況

續(xù)表

3 討 論

近年來(lái)，利用妊娠中期聯(lián)合母血清AFP和Freeβ－HCG進(jìn)行產(chǎn)前篩查，已成為歐美一些發(fā)達(dá)國(guó)家推薦的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目［1］。篩查高風(fēng)險(xiǎn)的孕婦，必須進(jìn)一步做產(chǎn)前診斷才能確定胎兒染色體是否異常。羊水細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行產(chǎn)前診斷是降低出生缺陷的有效途徑之一。

21－三體綜合征是最常見的染色體病，占新生兒全部染色體病的95%。其發(fā)生具有隨機(jī)性，無(wú)明顯家族史，各個(gè)年齡段的孕婦均有生出患兒的可能。18－三體綜合征又稱Edwards綜合征，是產(chǎn)前診斷中另一種常見的三體綜合征，該綜合征患者存在嚴(yán)重的智力低下和多種生理缺陷。

本研究對(duì)153 910例孕15～20＋6周的孕婦進(jìn)行母血清產(chǎn)前篩查的回顧性分析，高風(fēng)險(xiǎn)病例進(jìn)行產(chǎn)前診斷染色體核型分析中發(fā)現(xiàn)21例21－三體綜合征，其中1例為易位型。過(guò)去常單純將年齡≥35歲的孕婦劃為高風(fēng)險(xiǎn)人群，本研究發(fā)現(xiàn)的21例21－三體病例中，母親年齡≥35歲的10例，其余11例孕婦年齡均小于35歲。所以僅依據(jù)母親年齡確定是否會(huì)生育患兒遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，必須綜合孕婦各方面的情況考慮風(fēng)險(xiǎn)。另外還發(fā)現(xiàn)11例性染色體異?；颊摺?jù)Saller［2］報(bào)道，有性染色體異常的胎兒也可通過(guò)篩查的方法被發(fā)現(xiàn)，通常表現(xiàn)為21－三體高風(fēng)險(xiǎn)。本文發(fā)現(xiàn)5例平衡易位患者，均為21－三體高風(fēng)險(xiǎn)。在21－三體高風(fēng)險(xiǎn)中發(fā)現(xiàn)19例9號(hào)臂間倒位。篩查18－三體高風(fēng)險(xiǎn)患者進(jìn)行產(chǎn)前診斷，發(fā)現(xiàn)15例18－三體綜合征。據(jù)報(bào)道，母血清篩查可使90%的18－三體綜合征被檢出［3］。國(guó)內(nèi)相關(guān)分析顯示，國(guó)內(nèi)18－三體發(fā)生率高于國(guó)外。同時(shí)18－三體篩查高風(fēng)險(xiǎn)病例中發(fā)現(xiàn)1例三倍體患兒，據(jù)報(bào)道三倍體患者通常會(huì)表現(xiàn)18－三體高風(fēng)險(xiǎn)，母血清AFP和Freeβ－HCG值極低。

普通人群染色體異常發(fā)生率為5‰，新生兒高達(dá)8‰，本文研究結(jié)果顯示，對(duì)篩查高風(fēng)險(xiǎn)人群進(jìn)行羊膜腔穿刺，染色體異常發(fā)生率為2．14%，遠(yuǎn)高于普通人群及新生兒。通過(guò)測(cè)定母血清AFP和Freeβ－HCG，應(yīng)用產(chǎn)前篩查結(jié)合產(chǎn)前診斷可以更大范圍診斷出染色體異常兒，有效減少染色體異?；純旱某錾Ｒ虼?，提高產(chǎn)前篩查及診斷的覆蓋率，有助于提高出生人口素質(zhì)，是婦幼保健工作者今后的工作方向。

［1］ Jodi SD，Diane MT，Rigoberto SR，et al．Alpha－fetoprotein detection of neural tube defects and the impact of standard ultrasound［J］．Am J Obstet Gyneclo，2006，195：1623－1628．

［2］ Saller DN，Canick TA，Schwartz S，et al．Multiple marker screening in pregnancies with hydropic and mon－h(huán)ydropic Turner syndrome［J］．Am J Obstet Gynecol，1992，167：1021－1041．

［3］ Saller DN，Canick JA．Maternal screening for Down’s syndrome：the detection of other pathologies［J］．Clin Obstet Gynecol，1996，39：739－800．