王 波， 王 磊， 羅艷秋

(昆明學(xué)院醫(yī)學(xué)院， 云南 昆明 650214)

血栓閉塞性脈管炎((Thromboangiitis Obliter-ans，TAO)是我國最常見的一種慢性血管疾病，即在周圍血管的炎性疾病的基礎(chǔ)上伴有神經(jīng)病變，多發(fā)生在下肢的中小動脈和靜脈，主要表現(xiàn)為患者下肢缺血、疼痛、活動受限，重者可發(fā)生肢端壞死，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[1]，目前尚無有效的治療方法。近年來筆者運(yùn)用中藥“龍發(fā)傷科七味片”觀察血栓閉塞性脈管炎大鼠，取得了較好療效，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑 Wistar大鼠72只，雄性，體重400 g～550 g，昆明學(xué)院醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室提供；月桂酸鈉(化學(xué)純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號20100409)復(fù)方丹參注射液(昆明興中制藥有限責(zé)任公司，國藥準(zhǔn)字Z53020576)龍發(fā)傷科七味片(云南龍發(fā)制藥有限公司，國藥準(zhǔn)Z53020479)。LBY-N6型旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)(北京普利生科學(xué)儀器公司)，HC216型臺式高速離心機(jī)(武漢科學(xué)儀器廠)。

1.2 方法

1.2.1 大鼠造模及分組 Wister大鼠72只，隨機(jī)分為6組，即N組(N組)、假手術(shù)組(A組)、病理模型組(B組)、復(fù)方丹參對照組(C組)、龍發(fā)傷科七味片低劑量組(D組)和龍發(fā)傷科七味片高劑量組(E組)，每組12只，用上述制模的方法制備血栓閉塞性脈管炎大鼠模型。術(shù)前均留取血清標(biāo)本，參照文獻(xiàn)方法稍加改進(jìn)[2～3]，制作大鼠血栓閉塞性脈管炎模型。假手術(shù)組給予蒸餾水灌胃，復(fù)方丹參對照組灌胃復(fù)方丹參片懸液，低劑量組灌胃臨床等效劑量的龍發(fā)傷科七味片，高計(jì)量組灌胃2倍低劑量組的龍發(fā)傷科七味片。各組按1 mL/200 g體重劑量灌胃，連續(xù)1個月。按照造模及給藥時(shí)間分批處死，處死前留取術(shù)后血清標(biāo)本，并取左右后肢造模處周圍肌肉組織。

1.2.2 血液流變學(xué)的檢測 實(shí)驗(yàn)開始時(shí)和第12周末各測1次全血黏度(ηb，低切10s-1，高切120s-1)、血漿黏度(ηP，120s-1)、紅細(xì)胞聚集指數(shù)(RIA)、紅細(xì)胞變形指數(shù)(EDI)和全血還原黏度(ηre，低切10s-1，高切120s-1)，換算指標(biāo)由微機(jī)程序計(jì)算[3]。

1.2.3 病理學(xué)變化 采用石蠟切片法制作切片，觀察大鼠下肢組織細(xì)胞壞死及修復(fù)情況。

2 結(jié)果

2.1 TAO模型大鼠的體征變化 各造模組大鼠均出現(xiàn)左后肢缺血表現(xiàn)，依造模時(shí)間增加而逐漸加重，假手術(shù)組、病理模型組均有左后肢缺血、腫脹、足趾發(fā)黑表現(xiàn)。1周時(shí)缺血表現(xiàn)加重、壞死范圍擴(kuò)大至踝部。2周時(shí)出現(xiàn)干性壞疽、壞死范圍至膝部，局部炎癥反應(yīng)明顯，3周時(shí)有壞死肢體脫落表現(xiàn)，嚴(yán)重者有肢體干性壞疽，甚至肢體脫落。

2.2 TAO模型大鼠的病理變化 組織病理切片示：炎癥反應(yīng)明顯，炎癥細(xì)胞聚集，肌肉組織失去正常紋理結(jié)構(gòu)，假手術(shù)組、病理模型組股動脈內(nèi)可見節(jié)段性閉塞，廣泛血管內(nèi)血栓形成，并伴有大量新生毛細(xì)血管。大鼠體征變化及病理切片結(jié)果證實(shí)，大鼠血栓閉塞性脈管炎模型建立成功。

2.3 龍發(fā)傷科七味片對TAO模型大鼠的療效觀察 以TAO模型大鼠肢體病變范圍進(jìn)行分級(LAC)：0級：正常；I級：病變局限于趾甲部；II級：病變局限于趾部；III級：病變局限于足爪部；IV級：病變局限于膝關(guān)節(jié)以下；V級：病變發(fā)展到膝關(guān)節(jié)以上。觀察治療前后病變級別的變化作為判定療效的依據(jù)。治療前，C組、D組和E組的肢體病變分級(LAC)與正常大鼠組比較具有顯著性差異(P<0.05)；治療6周末，C組、D組和E組的LAC與同組治療前比較具有顯著性差異(P<0.05)，C組分別與D組和E組比較有顯著性差異(P<0.05)；治療12周末，C組、D組和E組的LAC與同組治療前比較具有顯著性差異(P<0.05)；但以上3組的LAC與同組治療6周末比較無顯著性差(P>0.05)，C組分別與D組和E組比較有顯著性(P<0.05)。D組與E組比較無顯著性(P>0.05)。結(jié)果見表1。

表1 各組大鼠肢體病變例數(shù)的比較(n=12)

2.4 龍發(fā)傷科七味片對TAO模型大鼠血液流變學(xué)的影響 治療前，C組、D組和E組的血液流變學(xué)指標(biāo)與N組比較具有顯著性差異(P<0.05)；治療12周末，C組、D組和E組的血液流變學(xué)指標(biāo)與同組治療前比較具有顯著性差異(P<0.05)；D組和E組分別與C組組間比較有顯著性差異(P<0.05)。結(jié)果見表2。

表2 各組治療前后血液流變學(xué)指標(biāo)的變化( ±s ，n=12)

3 討論

TAO是一種以周圍血管炎癥和閉塞為特點(diǎn)的疾病，主要累及四肢中、小動靜脈。以下肢為甚，屬于祖國醫(yī)學(xué)的“脫疽”范疇。本病雖見于世界各地，但以亞洲為高發(fā)區(qū)，我國北方地區(qū)發(fā)病率較高。TAO為世界難治性疾病，其病勢纏綿，經(jīng)久不愈，截肢致殘率高達(dá)28%[4]。所以世界各國對TAO的基礎(chǔ)及臨床研究相當(dāng)重視，投入了大量的人力和物力。

目前認(rèn)為TAO其機(jī)制可能與血液高凝狀態(tài)之間有著最直接的聯(lián)系。TAO病最基本的病理改變就是中小動及靜脈壁有炎癥改變，血管腔內(nèi)有血栓形成。根據(jù)國內(nèi)外學(xué)者的實(shí)驗(yàn)研究，TAO患者確有血液高凝狀態(tài)存在，李生偉等[5]報(bào)道，全血比黏度(高低切變)增高，紅細(xì)胞沉降率升高。肝素沉淀的纖維蛋白原(HTP)，血小板黏附性試驗(yàn)及血小板聚集性試驗(yàn)升高，而抗凝血酶降低。綜合以上報(bào)道，可以看出機(jī)體的血管免疫功能紊亂所致的血管內(nèi)皮細(xì)胞非細(xì)菌性炎癥，由此引發(fā)血液高凝狀態(tài)及血栓形成是TAO的基本病理過程。目前較確切有效的藥物是前列腺素類，其他藥物如激素、抗生素、血管擴(kuò)張劑、抗血小板、抗凝和祛聚藥物尚未得到廣泛肯定。同時(shí)可能存在導(dǎo)致出血、骨質(zhì)疏松癥、血小板減少癥等風(fēng)險(xiǎn)[6]，效果也不盡理想。按中醫(yī)理論，TAO應(yīng)歸屬于“脈痹”范疇。筆者根據(jù)活血化瘀、行氣通絡(luò)、消腫止痛的辨證施治原則，通過TAO大鼠模型觀察龍發(fā)傷科七味片對血液流變學(xué)的影響，結(jié)果表明龍發(fā)傷科七味片能有效改善TAO大鼠的肢體病變分級(LAC)，降低全血黏度(ηb，低切10s-1，高切120s-1)、血漿黏度(ηP，120s-1)、紅細(xì)胞聚集指數(shù)(RIA)、紅細(xì)胞變形指數(shù)(EDI)和全血還原黏度(ηre，低切10s-1，高切120s-1)，優(yōu)于復(fù)方丹參組(P<0.05)?？赡芘c該方同時(shí)具有抗凝作用和抑制炎性反應(yīng)有關(guān)。如方中的紅花兼具抑制血小板激活因子(PAF)[7～9]，延長凝血時(shí)間和凝血酶原時(shí)間，增加血漿中組織纖溶酶原激活劑(tPA)活性[10]，降低靜脈內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)鈣濃度[11]等作用，可同時(shí)從抑制血小板活性、抗凝、促纖溶作用和保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞4個方面防止DVT形成。另外，三七[12]、血竭[13]、馬錢子[14]均具有不同程度的抗血小板聚集、抗凝、纖溶或保護(hù)靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的作用，但機(jī)理不盡相同。在抑制炎癥反應(yīng)方面，大黃可拮抗炎性因子(TNFα、IL1、IL6、IL8)和補(bǔ)體[15]；三七可通過升高中性粒細(xì)胞內(nèi)的環(huán)磷酸腺苷(cAMP)含量，抑制超氧陰離子(O-2)釋放，減輕脂質(zhì)過氧化損傷等途徑發(fā)揮抗炎作用[16]。紅花[17]、血竭[13]、馬錢子[18]亦可不同程度抑制炎癥反應(yīng)。但就本方而言，其干預(yù)TAO的具體機(jī)理尚待進(jìn)一步研究。

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