劉洪展, 鄭風(fēng)榮, 孫修勤, 唐學(xué)璽, 董雙林

(1. 山東大學(xué) 威海分校, 山東 威海 264209; 2. 國家海洋局 第一海洋研究所, 山東 青島 266061; 3.中國海洋大學(xué), 山東 青島 266003)

氨氮脅迫對(duì)刺參幾種免疫酶活性的影響

劉洪展1, 鄭風(fēng)榮2, 孫修勤2, 唐學(xué)璽3, 董雙林3

(1. 山東大學(xué) 威海分校, 山東 威海 264209; 2. 國家海洋局 第一海洋研究所, 山東 青島 266061; 3.中國海洋大學(xué), 山東 青島 266003)

以養(yǎng)殖刺參(Apostichopus japonicus)為研究對(duì)象, 對(duì)不同濃度的氨氮處理及病菌感染條件下刺參體腔液免疫酶的變化進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果表明： 隨著氨氮處理強(qiáng)度的增加, 刺參體腔液中超氧化物歧化酶(SOD)、堿性磷酸酶(ALP)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)及溶菌酶(LSZ)活性呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),而同時(shí)感染病菌的情況下, 較低質(zhì)量濃度的氨氮脅迫可使SOD、GPX、ALP及LSZ活性上升, 但在較高濃度氨氮處理時(shí), 酶活性的誘導(dǎo)則受到抑制。說明適宜濃度的氨氮處理可增強(qiáng)刺參的免疫力, 從而減輕病菌感染對(duì)刺參造成的免疫功能損傷和提高刺參抗病力。刺參在感染病原菌假交替單胞菌(Pseudoalte- romonassp)的條件下, 3 mg/L、4 mg/L和6 mg/L濃度的氨氮處理第6天, 刺參的累積發(fā)病死亡率分別為44.4%、55.6% 和72.2%, 高于對(duì)照組, 表明較高濃度的氨氮脅迫能夠顯著降低刺參的免疫力, 增加對(duì)病原菌的易感性。因此, 在刺參養(yǎng)殖過程中, 氨氮濃度的調(diào)控具有重要的意義。

氨氮脅迫; 刺參(Apostichopus japonicus); 體腔液酶; 免疫反應(yīng)

氨氮是水產(chǎn)養(yǎng)殖中重要的水體環(huán)境污染指標(biāo)。養(yǎng)殖水體中, 由于養(yǎng)殖動(dòng)物的排泄和殘餌的氨化作用, 造成氨氮、硫化氫以及亞硝酸氮等有不斷積累,影響?zhàn)B殖生物的生長, 甚至發(fā)生毒害, 氨氮已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖系統(tǒng)中最普遍的毒性物質(zhì)。其中, 亞硝態(tài)氮是氨轉(zhuǎn)化成硝態(tài)氮過程的中間產(chǎn)物, 硝態(tài)氮是氨氮在水體中有氧環(huán)境下的最終產(chǎn)物, 可以被浮游植物直接吸收利用[1]。Cheng等[2]和 Wang等[3]的研究表明氨態(tài)氮和亞硝態(tài)氮污染是導(dǎo)致免疫能力降低、疾病發(fā)生的重要外部因子之一, 并可引起生理生化因子、組織結(jié)構(gòu)及免疫抗病能力有關(guān)酶類的活性的改變。Schuytema等[4]研究則認(rèn)為氨氮脅迫也會(huì)影響動(dòng)物的生長和免疫功能。

刺參(Apostichopus japonicus), 也稱仿刺參, 屬于棘皮動(dòng)物門(Echinodermata), 具有極高的營養(yǎng)和藥用價(jià)值, 是我國北方海水養(yǎng)殖的重要經(jīng)濟(jì)種類,為沿海地區(qū)創(chuàng)造了十分可觀的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益[5]。但由于近年來刺參養(yǎng)殖的過速發(fā)展和養(yǎng)殖環(huán)境的惡化, 導(dǎo)致了刺參病害問題的日趨嚴(yán)重, 因此, 進(jìn)行環(huán)境污染對(duì)刺參免疫酶活性的研究, 有利于深層次了解其抵抗不良環(huán)境的能力。

目前還未見到國內(nèi)外有關(guān)氨氮脅迫對(duì)養(yǎng)殖刺參免疫功能影響的研究報(bào)道, 基于此, 本試驗(yàn)在實(shí)驗(yàn)室條件下通過觀測(cè)刺參在不同濃度的氨氮連續(xù)作用下的若干非特異性免疫指標(biāo)的變化,初步探討了養(yǎng)殖環(huán)境中氨氮污染對(duì)刺參免疫力的影響, 以期為刺參養(yǎng)殖的環(huán)境生理和免疫機(jī)制以及養(yǎng)殖水環(huán)境調(diào)控提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)刺參購自青島李村海產(chǎn)品批發(fā)市場(chǎng), 為當(dāng)天捕撈大小基本一致的成體活刺參, 平均體質(zhì)量為62g±1g, 平均體長為 15cm±0.5cm。試驗(yàn)用氯化銨為國產(chǎn)分析純。

1.2 試驗(yàn)方法

挑選完好無損、健康活躍、規(guī)格基本一致的刺參用于試驗(yàn), 刺參在試驗(yàn)室用自然沉降過濾海水暫養(yǎng) 3 d, 暫養(yǎng)期間持續(xù)充氧, 每天投餌 1次, 不完全換水1次, 及時(shí)清除水體中的排泄物及剩余餌料, 自然水溫保持在19～21℃, pH 7.9～8.2, 鹽度29～31。

試驗(yàn)設(shè)計(jì)分對(duì)照組和試驗(yàn)組A組和B組, 以自然海水(NH4+-N低于0.05 mg/L)作為對(duì)照組, 設(shè)計(jì)3個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)A組養(yǎng)殖水體添加NH4C1溶液, 未感染細(xì)菌, 根據(jù)預(yù)試驗(yàn), 銨態(tài)氮的濃度梯度為1.0、2.0、3.0、4.0、6.0mg/L(以水體中的氨氮終濃度表示), 每個(gè)梯度設(shè)置3個(gè)重復(fù), 試驗(yàn)水體為10L, 每個(gè)重復(fù)刺參6只, 所有組的鹽度、水溫、餌料等養(yǎng)殖條件與暫養(yǎng)相同, 充氣量也保持一致。試驗(yàn)期間, 每天定時(shí)用奈氏試劑法測(cè)定氨氮的濃度, 及時(shí)調(diào)整養(yǎng)殖水體中的氨氮濃度, 試驗(yàn)條件同暫養(yǎng)期條件。預(yù)試驗(yàn)結(jié)果表明, 在第6天時(shí), 氨氮濃度為6.0 mg/L試驗(yàn)組的刺參開始出現(xiàn)發(fā)病現(xiàn)象, 因此, 本試驗(yàn)以 5d作為氨氮脅迫的持續(xù)時(shí)間(各試驗(yàn)組均未出現(xiàn)死亡現(xiàn)象)。分別在處理1、3、5d后用無菌注射器抽取刺參體腔液, 其中每頭刺參收集體腔液 0.2 mL, 將分別收集的各濃度梯度的每個(gè)重復(fù)組的刺參體腔液混合后立即放入-80℃冰箱中備用, 待全部取完樣后立即測(cè)定各酶活性。試驗(yàn)B組為感染細(xì)菌組, 濃度梯度設(shè)置同試驗(yàn)A組, 于每個(gè)整理箱中加入本實(shí)驗(yàn)室分離的刺參皮膚潰爛、圍口部腫脹病害的病原菌假交替單胞菌Pseudoalteromonas sp., 使水體中Pseudoalteromonas sp.終濃度為 3.5×108個(gè)/mL[6]。試驗(yàn)條件同暫養(yǎng)期間條件, 分別于處理后1、2、4 d取刺參體腔液, 同試驗(yàn)A組。

超氧化物歧化酶(SOD)活性的測(cè)定參考常雅寧[7]的連苯三酚自氧化法, 按照以下公式計(jì)算SOD活力：酶活力(U/mL)=[(1-樣品氧化速率/自氧化速率)/0.5]×4.5×100; 谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)活性的測(cè)定參考鄧修惠等[8]的改良 DTNB比色法, 以每升體液37℃每分鐘催化1μmol GSH氧化的酶量為一個(gè)酶活性單位, 計(jì)算公式為 GSH-Px(U/L)=(A對(duì)照－A測(cè)定)/A對(duì)照×0.4×1000÷5/0.4=(A對(duì)照－A測(cè)定)/A對(duì)照×200; 堿性磷酸酶(ALP)活性的測(cè)定參考磷酸苯二鈉為底物的金氏法[9], 磷酸酶活性定義為100 mL體液在37℃與底物作用30min產(chǎn)生1mg酚為1個(gè)金氏單位, 酶活性(金氏單位)=測(cè)定管吸光值/標(biāo)準(zhǔn)管吸光值×酚含量×稀釋倍數(shù); 溶菌酶(LSZ)活性的測(cè)定參考 Hultmark等[10]的溶壁微球菌粉法, 溶菌活力 UL按(A0－A)/A式計(jì)算。

在氨氮脅迫后第6天和第10天, 根據(jù)每個(gè)處理的病參數(shù)目占試驗(yàn)用參的比例計(jì)算累計(jì)死亡率。

1.3 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析

實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(M±SD)表示, 運(yùn)用SPSS 16.0軟件進(jìn)行單因素方差分析統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)刺參超氧化物歧化酶活性的影響

由圖1可知, 在未病菌感染的處理中, 在處理后1 d, 隨著氨氮濃度的增加, 刺參體腔液SOD活性增加, 但隨著處理時(shí)間的延長, SOD活性則隨著氨氮處理濃度的增加呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì), 處理后第3天不同濃度的氨氮處理刺參體腔液SOD活性分別比對(duì)照組高26.7%、63.4%、58.5%、51.8%和26.7%, 差異顯著(P＜0.05); 而處理后第5天不同濃度的氨氮處理刺參體腔液的SOD活性分別為對(duì)照組的130.2%、139.2%、135.3%、115.5%和84.0%, 1、2和3 mg/L氨氮處理組 SOD 活性與對(duì)照組相比差異顯著(P＜0.05)。在有病菌感染的處理中, 刺參體腔液中SOD 活性均隨氨氮處理的增加呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì), 隨著處理時(shí)間的延長, SOD 活性也有所下降, 處理后第 3天不同濃度的氨氮處理刺參體腔液的 SOD活性分別為對(duì)照組的 117.6%、156.0%、143.9%、111.9%和 79.9%; 處理后第 5天不同濃度的氨氮處理刺參體腔液的SOD活性分別為對(duì)照組的122.8%、162.1%、143.0%、104.5%和 78.7%。說明高濃度氨氮處理抑制SOD活性, 而適當(dāng)病菌感染可誘導(dǎo)SOD活性。

圖1 不同濃度的氨氮處理對(duì)刺參體腔液超氧化物歧化酶活性的影響Fig. 1 Effect of ammmonia-N concentrations on superoxide dismutase activity in the coelomic fluid of sea cucumbers

2.2 對(duì)刺參谷胱甘肽過氧化物酶活性的影響

由圖2可知, 在未病菌感染的處理中, 隨著處理時(shí)間的延長, 體腔液 GPx活性表現(xiàn)為逐漸升高的趨勢(shì), 但高濃度氨氮處理則導(dǎo)致 GPx活性下降, 處理后第 5天, 不同濃度的氨氮處理刺參體腔液的 GPx活性分別為對(duì)照組的 212.7%、266.3%、202.4%、133.3%和 79.1%, 差異顯著(P＜0.05); 在病菌感染的處理中, 隨著處理時(shí)間的延長, GPx活性也表現(xiàn)為逐漸升高的趨勢(shì), 處理后第5天, 不同濃度的氨氮處理刺參體腔液的 GPx活性分別為對(duì)照組的 170.4%、189.9%、178%、148.7%和 77.4%, 差異顯著(P＜0．05)。說明在較低濃度氨氮處理時(shí), 可促進(jìn)刺參的 GPx活性, 而病原菌感染則抑制了氨氮脅迫對(duì) GPx活性的誘導(dǎo)作用。

圖2 不同濃度的氨氮處理對(duì)刺參體腔液谷胱甘肽過氧化酶活性的影響Fig.2 Effect of ammmonia-N concentrations on glutathione peroxidase activity in the coelomic fluid of sea cucumbers

2.3 對(duì)刺參溶菌酶活性的影響

圖3 不同濃度的氨氮處理對(duì)刺參體腔液溶菌酶活性的影響Fig. 3 Effect of ammmonia-N concentrations on lysozyme activity in the coelomic fluid of sea cucumbers

由圖 3可知, 處理初期, 在未病菌感染的處理中, 體腔液中 LSZ的活性呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì), 但隨著處理時(shí)間的延長和氨氮處理濃度的增加, 體腔液LSZ活性表現(xiàn)為先上升后下降的趨勢(shì), 處理后第5天, 不同濃度的氨氮處理刺參體腔液的 LSZ活性分別為對(duì)照組的 102.9%、109.6%、115.5%、77.0%和66.5%, 4 mg/L和63 mg/L氨氮處理組SOD 活性與對(duì)照組相比差異顯著(P＜0.05); 在病菌感染的處理中,隨著處理時(shí)間的延長和氨氮處理濃度的增加, 刺參體腔液 LSZ活性呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì), 處理后第 5天, 活性分別為對(duì)照組的 110.7%、121.5%、107.9%、90.4%和70.7%。說明高濃度氨氮處理強(qiáng)度可降低 LSZ活性, 而適宜濃度氮處理可提高病菌感染情況下的LSZ活性。

2.4 對(duì)刺參堿性磷酸酶活性的影響

由圖4可知, 在未病菌感染的處理中, 隨著處理時(shí)間的延長和氨氮處理濃度的增加, 體腔液 ALP活性先增加后降低, 較高濃度氨氮處理導(dǎo)致ALP 活性的降低; 在病菌感染的處理中, 隨著處理時(shí)間的延長和氨氮處理濃度的增加, ALP活性先上升后下降的趨勢(shì)更加明顯, 處理后第5天, 不同濃度氨氮處理的刺參體腔液的ALP 活性分別為對(duì)照組的104.3%、138.8%、119.1%、76.3%和70.9%。說明高濃度氨氮脅迫處理降低了 ALP活性, 而適宜濃度的氮處理可促進(jìn)病菌感染誘導(dǎo)的ALP活性。

2.5 對(duì)刺參發(fā)病情況的影響

在有病原菌感染的情況下, 隨著處理氨氮處理濃度升高和處理時(shí)間的延長, 發(fā)病刺參的癥狀表現(xiàn)為排臟, 觸手伸縮活力下降, 腹部管足出現(xiàn)潰瘍狀病斑, 然后圍口處潰爛, 最終導(dǎo)致刺參死亡。由圖 5可知, 在處理后第6天, 隨著處理強(qiáng)度的增加, 刺參的累計(jì)發(fā)病死亡率明顯上升, 3、4和6 mg/L的氨氮脅迫下刺參死亡率比對(duì)照組增加了11.1%、22.3%和40.9% , 4和6 mg/L的氨氮脅迫下刺參死亡率與對(duì)照組差異顯著(P＜0.05), 在處理后第12天, 4和6 mg/L的氨氮脅迫下刺參死亡率均比對(duì)照組增加了 22.2%,差異顯著(P＜0.05); 在沒有病菌感染的情況下, 只有4和6 mg/L濃度的氨氮處理組的刺參發(fā)病死亡, 死亡率為 11.1%和 33.3%; 而在病原菌感染的情況下,刺參從較低濃度氨氮處理組就開始出現(xiàn)發(fā)病癥狀, 并且隨著氮源濃度升高發(fā)病死亡率增加。

圖4 不同濃度的氨氮處理對(duì)刺參體腔液堿性磷酸酶活性的影響Fig. 4 Effect of ammmonia-N concentrations on alkaline phosphatase activity in the coelomic fluid of sea cucumbers

圖5 不同濃度的氨氮處理對(duì)刺參發(fā)病情況的影響Fig. 5 Effect of ammmonia-N concentrations on the infection incidence of sea cucumbers

3 討論

刺參同其他棘皮動(dòng)物一樣, 進(jìn)化地位較低, 不具備專門的免疫組織、器官和特異性免疫系統(tǒng), 主要依賴由細(xì)胞免疫和體液免疫組成的非特異性免疫系統(tǒng)來預(yù)防疾病。體液性免疫因子對(duì)無脊椎動(dòng)物機(jī)體的免疫防御反應(yīng)具有極為重要的作用, 體液性免疫因子包括天然形成的或誘導(dǎo)產(chǎn)生的各種生物活性分子, 以及各種免疫活性的酶類。超氧化物歧化酶是生物體內(nèi)抗氧化防御性功能的酶, 是活性氧自由基的天然消除劑。研究證明, 周圍環(huán)境的污染物質(zhì)量濃度升高可導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)活性氧的增加[11-12], 而超氧化物歧化酶可消除體內(nèi)多余的自由基, 使自由基的形成與消除處于動(dòng)態(tài)平衡之中, 進(jìn)而免除對(duì)生物體的傷害, 因此, 超氧化物歧化酶與生物體的免疫水平密切相關(guān), 對(duì)增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的防御能力和機(jī)體的免疫功能具有重要作用[13]。本試驗(yàn)中, 2、3和4 mg/L濃度的氨氮處理組的SOD活性最高, 而同時(shí)病原菌感染的情況下, SOD活性被進(jìn)一步誘導(dǎo), 并且隨著感染時(shí)間的延長, SOD活性增加的趨勢(shì)愈加明顯(圖1)但較高濃度的氨氮處理下, SOD活性增加趨勢(shì)減弱, 這表明適宜濃度的氮可以減輕活性氧對(duì)刺參造成的機(jī)體損傷, 也能促進(jìn)刺參的免疫水平, 從而提高對(duì)病原的免疫防御能力。谷胱甘肽過氧化物酶能保護(hù)生物膜和生物大分子結(jié)構(gòu)免受氧化損傷, 而且可以清除由活性氧和·OH誘發(fā)的脂質(zhì)過氧化物, 保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性, 還具有抑制細(xì)菌的作用[14]。本試驗(yàn)中, 水體中的氮處理誘導(dǎo) GPx活性, 其中 2和3 mg/L濃度氮處理組促進(jìn)GPx活性的作用最強(qiáng),在高濃度氮處理同時(shí)感染病原菌的情況下, GPx活性明顯受到抑制, 而病原菌卻增強(qiáng)了較低濃度氨氮處理下的GPx活性(圖2), 這表明氮處理可以減輕活性氧對(duì)刺參造成的細(xì)胞膜損傷, 而只有適宜濃度的氨氮才能促進(jìn)刺參體腔液的抑菌作用。

刺參由于缺乏特異性免疫反應(yīng), 機(jī)體只能依靠各種非特異性免疫細(xì)胞或體液免疫因子來清除異物,在多種體液因子中, 溶菌酶、磷酸酶等常被用做衡量免疫活力高低的參照指標(biāo)。表現(xiàn)溶菌活性的因子主要是溶菌酶[15], 溶菌酶是由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和嗜中性細(xì)胞產(chǎn)生的能溶解細(xì)胞壁、具有抗氧化作用的酶, 在非特異性免疫中起著重要作用, 有文獻(xiàn)推測(cè)脅迫強(qiáng)度可能對(duì)溶菌酶活性的變化有影響[16]。血清中的溶菌酶(LSZ)主要由吞噬細(xì)胞釋放, 故可作為吞噬系統(tǒng)功能的指標(biāo)。本試驗(yàn)中, 較低濃度的氨氮處理可促進(jìn)溶菌酶活性的升高, 而同時(shí)病原菌感染的情況下, 溶菌酶活性增加明顯, 但 3mg/L以上濃度會(huì)較快地降低溶菌酶活力, 且隨著時(shí)間的延長, 其活力降低的幅度越明顯(圖 3), 表明在氨氮脅迫初期,刺參受到較強(qiáng)應(yīng)激, 溶菌酶活力因此而升高, 而此后刺參機(jī)體則產(chǎn)生了一定的耐受性, 溶菌酶活力趨于降低, 該結(jié)果也表明刺參在高濃度氨氮環(huán)境或長期處于較低氨氮環(huán)境下, 均會(huì)降低其血清溶菌酶活力, 溶菌酶活力的下降可能是導(dǎo)致吞噬細(xì)胞吞噬活性降低的重要因素之一。

ALP是溶酶體的標(biāo)志酶之一, 可通過改變細(xì)菌表面結(jié)構(gòu)而增強(qiáng)其異己性, 起調(diào)理素的作用, 從而加速吞噬細(xì)胞的吞噬和異物的降解速度[17]。本試驗(yàn)中, 水體低濃度的氨氮脅迫明顯可誘導(dǎo) ALP活性的產(chǎn)生, 同時(shí)病原菌感染的情況下, ALP增加趨勢(shì)更加明顯, 但在氨氮濃度為4 mg/L和6 mg/L的脅迫下,ALP活性則降低(圖4), 說明當(dāng)氨氮濃度大于3 mg/L時(shí), 超過了刺參機(jī)體的調(diào)節(jié)范圍。因此適宜濃度的氨氮可增強(qiáng)刺參體腔液對(duì)病原的殺滅作用以減輕組織受損。刺參體腔液免疫酶的變化表明, 較低濃度的氨氮脅迫處理對(duì)刺參免疫性刺激最強(qiáng), 然而在菌感染的情況下刺參發(fā)病癥狀在脅迫解除后可恢復(fù), 較高濃度氨氮處理的情況在脅迫解除后很難恢復(fù)(圖 5),這表明刺參組織損傷相對(duì)于體腔液酶活變化有一定的滯后性, 適宜濃度氮處理刺激的免疫性增強(qiáng)需要一定時(shí)間才表現(xiàn)出抗病性。

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Effect of exposure to ammonia nitrogen stress on immune enzyme of holothurianApostichopus japonicus

LIU Hong-zhan1, ZHENG Feng-rong2, SUN Xiu-qin2, TANG Xue-xi3,DONG Shuang-lin3
(1．Marine College of Shandong University at Weihai, Weihai 264209, China; 2. First Institute of Oceanography SOA, Qingdao 266061, China; 3. College of Marine Life Sciences of Ocean University of China, Qingdao 266003,China)

Nov.,27,2011

ammonia nitrogen stress; holothurian; enzyme of coelomic fluid; immune response

The change of immune enzyme in the coelomic fluid of holothurianApostichopus japonicusunder ammonia treatment and pathogen-infected condition was investigated. The results indicated that with the increase of ammonia-N concentration, the activities of superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx), alkaline phosphatase (ALP) and lysozyme (LYZ) were first increased and then decreased. In the presence of bacteria infection, lower concentrations of ammonia nitrogen could increase the activities of SOD, GPX, ALP and LSZ, but higher concentrations of ammonia nitrogen treatment inhibited the enzyme activities. This suggested that moderate aquatic ammonia nitrogen stresses may enhance the immunity of sea cucumber, reduce the immune damage caused by bacteria infection, and promote the disease resistance ability of sea cucumber. The cumulative mortality of sea cucumber were 44.4%, 55.6% and 72.2% in the presence of pathogen (Pseudoalteromonassp.) infection and 3, 4 and 6 mg/L ammonia nitrogen treatment, which were higher than that of control group, suggesting that higher concentrations of ammonia nitrogen stress can significantly reduce the immunity of the sea cucumber, increase susceptibility to pathogens. Therefore, regulation and control of ammonia nitrogen concentration are very important during sea cucumber cultivation.

S91

A

1000-3096(2012)08-0047-06

2011-11-27;

2012-02-22

海洋公益專項(xiàng)(200905020); 國家海洋局海洋生物活性物質(zhì)與現(xiàn)代分析技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放基金項(xiàng)目(MBSMAT-2011-06)

劉洪展(1975-), 男, 講師, 山東濰坊人, 從事細(xì)胞毒理學(xué)研究, E-mail： hongzhan2002@163.com; 鄭風(fēng)榮, 通信作者, 副研究員, 從事海洋生物病害與免疫學(xué)研究, 電話： 15192602616, E-mail：zhengfr@fio.org.cn; 孫修勤, 通信作者, 研究員, 從事海洋生物學(xué)研究,電話： 13608964893, E-mail： xiuqin_sun@fio.org.cn

梁德海)