劉亞麗 閆 靜 關(guān)曉蕾 艾軍紅 謝正德

Epstein-Barr 病毒(EBV) 屬于皰疹病毒科γ亞科，在人群中廣泛傳播，90%以上的成人血清EBV抗體陽(yáng)性。6歲以下兒童原發(fā)性EBV感染大多表現(xiàn)為無(wú)癥狀感染或僅表現(xiàn)為上呼吸道癥狀等非特異性表現(xiàn)，但在兒童期和青少年期，約50%的原發(fā)性EBV感染可表現(xiàn)為傳染性單核細(xì)胞增多癥(IM)[1]。中國(guó)關(guān)于兒童EBV感染的流行病學(xué)研究較少。20 世紀(jì)80 年代天津的相關(guān)研究顯示，3～5 歲兒童血清EBV感染(CA-IgG抗體陽(yáng)性)率為80.7%～100%，10 歲兒童的陽(yáng)性率為100%[2]。2008年，北京杜海軍等[3]的EBV流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，0～14歲兒童EBV感染率為83.6%，其中<3歲為71%，～6歲為82.5%。2011年重慶汪洋等[4]的調(diào)查結(jié)果顯示，各年齡段EBV感染率低于北京地區(qū)[3]。 有研究顯示，EBV感染與社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平和生活習(xí)性密切相關(guān)，發(fā)達(dá)國(guó)家原發(fā)性EBV感染的高峰年齡在20歲左右，但在發(fā)展中國(guó)家>6歲兒童EBV感染率接近100%[5]。中國(guó)歷經(jīng)30余年經(jīng)濟(jì)的高速發(fā)展，EBV的感染特征是否會(huì)有所變化，是值得研究的課題。為此，本文分析首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京兒童醫(yī)院(我院)2010年外科住院患兒的EBV感染情況，并與前期中國(guó)EBV感染的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果比較，分析EBV感染近年來(lái)的變遷特征。

1 方法

1.1 研究設(shè)計(jì)及倫理 本研究為研究生課題的一部分，研究生課題經(jīng)過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過(guò)。考慮到外科擇期手術(shù)患兒一般狀態(tài)較好，感染的可能性較低，因此作為本研究對(duì)象。同時(shí)考慮到課題時(shí)間的安排，定于9～12月收集標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)EBV抗體水平，并分析EBV感染的年齡、性別、城區(qū)和郊區(qū)差異。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) ①我院2010年9～12月行外科擇期手術(shù)的住院患兒；②年齡0～17歲，性別不限；③近期無(wú)發(fā)熱、咽峽炎、淋巴結(jié)及肝脾腫大等EBV 感染表現(xiàn)。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) ①嚴(yán)重免疫功能缺陷或應(yīng)用相關(guān)免疫抑制劑患兒；②近期有輸血制品史；③EBV血清抗體檢測(cè)為可疑陽(yáng)性者；④居住地信息不詳者。

1.4 EBV抗體檢測(cè)方法 取患兒生化檢測(cè)后的剩余血清進(jìn)行檢測(cè)。采用間接酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清中EBV抗體。試劑為北京歐蒙生物技術(shù)有限公司的抗EBV衣殼抗原IgG(CA-IgG)抗體檢測(cè)試劑盒，抗EBV衣殼抗原IgM(CA-IgM)抗體檢測(cè)試劑盒，抗EBV核抗原IgG(NA-IgG)抗體檢測(cè)試劑盒，按說(shuō)明書(shū)操作。按樣品的吸光度值/標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值的比值判斷結(jié)果,比值<0.8為陰性，～1.1為可疑，≥1.1為陽(yáng)性。

1.5 分組考慮 鑒于中國(guó)關(guān)于兒童EBV感染的流行病學(xué)調(diào)查較少，為便于與國(guó)內(nèi)相關(guān)研究比較EBV感染的變遷，本研究參照文獻(xiàn)[2]的分組方法分為<1、～5、～10和～17歲組。

1.6 相關(guān)分析指標(biāo)的定義 累計(jì)感染率：(該年齡組總?cè)藬?shù)-該年齡組CA-IgG 及CA-IgM 抗體均陰性人數(shù))/該年齡組總?cè)藬?shù)；新發(fā)感染率：CA-IgM抗體陽(yáng)性人數(shù)/(該年齡組總?cè)藬?shù)-該年齡組僅CA-IgG抗體陽(yáng)性人數(shù))。

1.7 資料截取 根據(jù)本研究目的截取年齡、性別和居住地、CA-IgG、CA-IgM 和NA-IgG抗體檢測(cè)結(jié)果等數(shù)據(jù)用于本文分析。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用Excel 2003 建立數(shù)據(jù)庫(kù)，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，率的顯著性采用χ2檢驗(yàn)或精確概率法。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 一般情況 共有750例患兒檢測(cè)了EBV血清抗體，其中CA-IgG、CA-IgM 和NA-IgG抗體可疑陽(yáng)性分別為9、3和3例，居住地信息不詳2例而被排除，733例患兒進(jìn)入分析，其中男414例，女319例；城區(qū)367例，郊區(qū)366例。<1歲306例，～5歲193例，～10歲147例，～17歲87例。

2.2 EBV抗體陽(yáng)性率 表1顯示，CA-IgG、NA-IgG和CA-IgM抗體的陽(yáng)性率分別為70.4%、68.5%和0.7%；<1歲組CA-IgG和NA-IgG的陽(yáng)性率最低，分別為54.2%和51.3%，之后隨年齡增長(zhǎng)均呈增高趨勢(shì)(χ2分別為75.373和81.843，均P<0.05)，～17歲組最高(均為90.8%)。

<1、～5、～10和～17歲組累計(jì)感染率分別為54.2%、74.6%、86.4%和90.8%，各年齡組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=75.373，P<0.000 1)；新發(fā)感染率分別為2.1%、2.0%、0和11.1%，各年齡組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.372，P=0.71)。

表1 各年齡組兒童EBV抗體檢測(cè)結(jié)果及感染率[n(%)]

Notes There was significant difference in the CA-IgG positive rate among 4 age groups,χ2=75.373，P<0.000 1; The NA-IgG positive rate significantly differed among 4 age groups,χ2=81.843，P<0.000 1. The cumulative infection rates significantly differed among 4 age groups,χ2=75.373，P<0.000 1. The recent infection rate was not significantly different among 4 age groups,χ2=7.372，P=0.71

2.3 EBV感染性別差異 表2顯示，男女性CA-IgG抗體陽(yáng)性率、累計(jì)感染率均隨年齡增長(zhǎng)呈增高趨勢(shì)(P<0.05)；各年齡組CA-IgG陽(yáng)性率、累計(jì)感染率的性別差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由于新發(fā)感染的例數(shù)較少，未行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2.4 EBV感染的城區(qū)和郊區(qū)差異 表3顯示，城區(qū)和郊區(qū)兒童CA-IgG抗體陽(yáng)性率、累計(jì)感染率均隨年齡增長(zhǎng)呈增高趨勢(shì)(P<0.05)；各年齡組CA-IgG抗體陽(yáng)性率和累計(jì)感染率均呈現(xiàn)城區(qū)高于郊區(qū)的趨向，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 各年齡組男女童EBV抗體檢測(cè)結(jié)果及感染率[n/N(%)]

Notesvsmale,1)χ2=0.1175，P=0.732; 2)χ2=1.633，P=0.202; 3)χ2=0.290，P=0.590; 4)χ2=1.436，P=0.231

表3 各年齡組城鄉(xiāng)EBV抗體檢測(cè)結(jié)果及感染率[n/N(%)]

Notesvsmale,1)χ2=0.0441，P=0.834; 2)χ2=3.766，P=0.0523; 3)χ2=1.693，P=0.193; 4)χ2=0.0723，P=0.7881

3 討論

本文數(shù)據(jù)顯示，兒童EBV-CA-IgG抗體的陽(yáng)性率為70.4%，略低于2008年北京杜海軍等[3]報(bào)道的83.6%，可能與樣本的選擇不同有關(guān)，本研究為外科擇期手術(shù)患兒，一般情況較好，合并感染的可能性較低，而文獻(xiàn)[3]未提及標(biāo)本的具體來(lái)源。本研究還顯示，EBV感染高峰集中在1～5歲組，各年齡組累計(jì)感染率較2011年重慶汪洋等[4]調(diào)查略高，同時(shí)CA-IgM抗體陽(yáng)性檢出率低于汪洋等[4]報(bào)道的水平。提示EBV感染的血清流行病學(xué)可能存在地域差異。此外，目前認(rèn)為EBV 的感染無(wú)性別差異[4]，本研究結(jié)果支持上述結(jié)論。

EBV的主要傳播方式是唾液傳播，兒童EBV原發(fā)感染與社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平相關(guān)。日本城市5～9 歲兒童EBV感染率從1990 年的80%降至1995至1999 年的59%[6]。本研究EBV感染率～5歲組為74.6%，～10歲組為86.4%，均較1986年天津[2]報(bào)道的數(shù)據(jù)有所降低；～17歲組EBV感染率為90.8%，低于1992年北京陸華等[7]報(bào)道13～15歲組的97.7%。2008年北京杜海軍等[3]的調(diào)查結(jié)果[3]顯示，EBV感染率城區(qū)低于郊區(qū)，本研究各年齡組均表現(xiàn)為EBV感染率城區(qū)低于郊區(qū)的趨向，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，考慮與樣本量較小有關(guān)。這種EBV感染率降低的趨勢(shì)，提示與社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平有一定關(guān)系。此外，不同國(guó)家和地區(qū)EBV感染流行病調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，印度尼西亞1970年6～9歲兒童EBV感染率為96%[8]；1984年中國(guó)臺(tái)北市7歲兒童EBV感染率為91.8%[9]，1975年新加坡5～9歲兒童EBV感染率為91%[10]；而美國(guó)1970年17～18歲青少年EBV感染率為26%～28%[11]，英國(guó)1995至1996年5～9歲兒童EBV感染率為46%[12]，法國(guó)5～9歲兒童EBV感染率為65%[13]。上述EBV感染率的不同除考慮地域因素外，社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的作用也不容忽視。此外，家庭成員和生活習(xí)慣也對(duì)兒童EBV的感染有重要影響，如西方的分餐制較中國(guó)的合餐制不利于EBV傳播。但地域、經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平和生活方式哪個(gè)因素起主導(dǎo)作用，尚無(wú)定論，有待進(jìn)一步研究。

本研究和多項(xiàng)相關(guān)報(bào)道均顯示，EBV的感染率隨年齡的增長(zhǎng)呈增高趨勢(shì)。本研究顯示，CA-IgG抗體陽(yáng)性率<1歲組為54.2%，后逐漸增高。IgG是唯一可以通過(guò)胎盤(pán)屏障的抗體，一般認(rèn)為<3個(gè)月嬰兒的CA-IgG抗體大部分來(lái)自母親，隨著年齡的增長(zhǎng)，來(lái)自母體的CA-IgG 逐漸消失。因此<1歲組較高的CA-IgG抗體陽(yáng)性率與這一時(shí)期父母與嬰兒的接觸方式及照護(hù)導(dǎo)致EBV 的傳播有關(guān)，但此時(shí)并不是IM的好發(fā)年齡，大多數(shù)患兒感染后無(wú)明顯癥狀，可能與此時(shí)免疫系統(tǒng)尚不成熟，未引起免疫病理?yè)p害有關(guān)。

原發(fā)性EBV感染的臨床表現(xiàn)與感染時(shí)年齡密切相關(guān)。有研究顯示[13]，原發(fā)性EBV 感染發(fā)生在1～5 歲時(shí)常無(wú)特異性疾病，原發(fā)性EBV 感染所致的IM常見(jiàn)于10～20 歲時(shí)感染EBV的患者。Gao等[14]報(bào)道IM的臨床表現(xiàn)與年齡密切相關(guān)，<6歲組肝、脾腫大和皮疹的發(fā)生率高于≥6歲組，肝酶異常升高的程度低于≥6歲組。本研究顯示，兒童EBV感染的年齡較1986年有所延遲，且有可能進(jìn)一步延遲，其對(duì)EBV相關(guān)疾病發(fā)生和臨床表現(xiàn)的影響有待進(jìn)一步研究。

本研究的不足之處和局限性：①標(biāo)本來(lái)自1家醫(yī)院，其代表性尚有欠缺；②采集標(biāo)本的時(shí)間為9～12月份，未能全年采樣，忽略了季節(jié)的影響，對(duì)本研究結(jié)果有一定影響。

[1]Xie ZD(謝正德). EB病毒相關(guān)噬血淋巴組織細(xì)胞增生癥. Chinese Journal of Practical Pediatrics(中國(guó)實(shí)用兒科雜志),2010,25(8):580-582

[2]Wang PS，Evans AS. Prevalence of antibodies to Epstein-Barr virus and cytomegalovirus in sera from a group of children in the People's Republic of China. J Infect Dis，1986，153(1):150-152

[3]Du HJ(杜海軍), Zhou L, Liu HT, et al. A serological survey of Epstein-Barr virus infection in children in Beijing. Chin J Exp Clin Virol(中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志), 2008，22(1)：30-32

[4]Wang Y(汪洋), Xu HM. Seroepidemiological study of Epstein-Barr virus infection in children under 12 years old. Journal of Chongqing Medical University(重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào))，2011，36(12)：1510-1512

[5]Lorenzetti MA, Gutiérrez MI, Altcheh J, et al. Epstein-Barr virus BZLF1 gene promoter variants in pediatric patients with acute infectious mononucleosis: its comparison with pediatric lymphomas.J Med Virol, 2009 ,81(11):1912-1917

[6]Takeuchi K，Tanaka-Taya K，Kazuyama Y，et al. Prevalence of Epstein-Barr virus in Japan：trends and future prediction. Pathol Int，2006，56(3)：112-116

[7]Lu H(陸華), Li Y, Gu SH, et al.15 歲以下小兒EB 病毒感染狀況的調(diào)查.Chin J Exp Clin Virol(中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志), 1992，6( 3) ：238-242

[8]Ito Y, Ishimoto A, Hosokawa T, et al. Anti-EB virus antibody titer in sera collected from human subjects of Surabaja, Indonesia, in 1968. Kobe J Med Sci,1970,16(4): 261-265

[9]Tsai WS, Chang MH, Chen JY, et al. Seroepidemiological study of Epstein-Barr virus infection in children in Taipei. Zhonghua Min Guo Xiao Er Ke Yi Xue Hui Za Zhi, 1989,30(1): 81-86

[10]de-Thé G, Day NE, Geser A, et al.Sero-epidemiology of the Epstein-Barr virus: preliminary analysis of an international study - a review.IARC Sci Publ,1975,(11 Pt 2):3-16

[11]Niederman JC, Evans AS, Subrahmanyan L, et al. Prevalence, incidence and persistence of EB virus antibody in young adults. N Engl J Med,1970, 282(7): 361-365

[12]Morris MC, Edmunds WJ, Hesketh LM, et al. Sero-epidemiological patterns of Epstein-Barr and herpes simplex (HSV-1 and HSV-2) viruses in England and Wales. J Med Virol, 2002,67(4): 522-527

[13]Luzuriaga K，Sullivan JL. Infectious mononucleosis. N Engl J Med，2010，362(21)：1993-2000

[14]Gao LW, Xie ZD, Liu YL, et al. Epidemiologic and clinical characteristics of infectious mononucleosis associated with Epste-in-Barr virus infection in children in Beijing, China. World J Pediatr, 2011, 7(1): 45-49