徐新蕾，蔡德亮

氧化應(yīng)激指標(biāo)與血管性癡呆的關(guān)系研究

徐新蕾，蔡德亮

目的探討氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)丙二醛(MDA)、同型半胱氨酸(Hcy)、Ca2+及對氧磷酶－1(PON－1)活性與血管性癡呆(VD)的關(guān)系。方法選取2010—2011年在我院神經(jīng)內(nèi)科確診為VD的住院患者41例(VD組)及我院體檢中心體檢健康的老年志愿者30例(對照組)。對兩組進(jìn)行簡易精神狀態(tài)檢查評分(MMSE)和血清MDA、Hcy、Ca2+濃度及PON－1活性檢測，并對檢測結(jié)果進(jìn)行比較分析。結(jié)果VD組血清MDA和Hcy濃度及PON－1活性與對照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。VD組血清PON－1活性與MMSE呈正相關(guān)(r=0.25，P=0.03)，血清Hcy濃度與MMSE呈負(fù)相關(guān)(r=－0.57，P=0.000)，PON－1活性與Hcy濃度亦呈負(fù)相關(guān)(r=－0.32，P=0.02)，MDA濃度與MMSE無相關(guān)性(r=0.68，P=0.48)。結(jié)論血清MDA、Hcy濃度及PON－1活性的變化可協(xié)助診斷VD，且Hcy及PON－1尚可提示病情的進(jìn)展程度。

癡呆，血管性;氧化應(yīng)激;丙二醛;同型半胱氨酸;對氧磷酶－1

血管性癡呆(vascular dementia，VD)是迄今為止惟一可防治的癡呆類型，如果早期發(fā)現(xiàn)并治療可避免發(fā)展到不可逆的VD晚期階段［1］。近年來氧化應(yīng)激在VD中的病理損傷作用越來越受到重視，氧自由基通過過氧化損傷神經(jīng)元細(xì)胞膜中的不飽和脂肪酸，改變細(xì)胞膜表面Na+－K+－ATP泵活性，以及修飾N－甲基－D－門冬氨酸(NMDA)受體表達(dá)，從而損傷神經(jīng)元［2］。本研究通過研究VD患者血清丙二醛(malondialdehyde，MDA)、同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)、Ca2+濃度及對氧磷酶－1(paraoxonase－1，PON－1)活性的變化情況，旨在探討氧化應(yīng)激指標(biāo)與VD的關(guān)系，為VD的早期診斷及抗氧化治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2010—2011年在我院神經(jīng)內(nèi)科確診為VD的住院患者41例(VD組)及我院體檢中心體檢健康的老年志愿者30例(對照組)。VD組中男27例，女14例;年齡61～80歲，平均(72.1±7.8)歲;簡易精神狀態(tài)檢查評分(MMSE)為17～27分，平均(19.1±2.9)分。對照組中男19例，女11例;年齡60～82歲，平均(69.3±7.6)歲;MMSE為27～30分，平均(29.2±1.6)分。所有受檢者既往無降脂藥及維生素類藥物服用史。兩組的性別程度、年齡、體質(zhì)指數(shù)、文化程度比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05，見表1)，具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)VD診斷依據(jù)美國國家神經(jīng)系統(tǒng)疾病與卒中研究所－瑞士神經(jīng)科學(xué)研究國際協(xié)會(NINDS－AIREN)標(biāo)準(zhǔn)［3］，VD組均經(jīng)顱腦CT或MRI影像學(xué)證實(shí)，并排除其他原發(fā)性神經(jīng)或精神疾病病史、糖尿病病史、乙醇病史、酒精及藥物依賴史、甲狀腺功能減低史、維生素B12及葉酸缺乏相關(guān)性疾病史等。對照組無神經(jīng)和精神疾病史，無卒中史及癡呆家族史。

1.3 檢測方法所有受檢者禁食12 h，于清晨采集肘靜脈血液，離心分離血漿并保存在－80℃冰箱備生化檢查。硫代巴比妥酸法檢測MDA，結(jié)果以μmol/g表示。化學(xué)發(fā)光免疫法檢測血清Hcy濃度。離子選擇電極間接法檢測Ca2+濃度。乙酸苯酯法測定PON－1活性，PON－1活性單位用U/ml表示，1 U為對氧磷酶每分鐘水解1 μmol的乙酸苯酯。反應(yīng)緩沖液為含2 mmol/L CaCl2的50 mmol/L Tris－醋酸，pH值為8.0。將乙酸苯酯用無水乙醇以1∶10稀釋后，取該稀釋液6 μl與1 ml反應(yīng)緩沖液混勻組成底物液。取血清標(biāo)本1.5 μl與150 μl底物液反應(yīng)，其后使用酶標(biāo)儀于270 nm比色，測定5 min內(nèi)吸收值的變化為OD270。用OD270乘以克分子消光系數(shù)即求出酶的活性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所有數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0處理。計(jì)量資料以(±s)表示，組間比較采用students't檢驗(yàn)，相關(guān)性檢驗(yàn)采用Pearson檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組氧化應(yīng)激指標(biāo)比較VD組血清MDA、Hcy濃度及PON－1活性與對照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);而兩組血清Ca2+濃度比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05，見表2)。

2.2 氧化應(yīng)激指標(biāo)相關(guān)性分析經(jīng)Pearson檢驗(yàn)，VD組血清PON－1活性與MMSE呈正相關(guān)(r=0.25，P=0.03)，血清Hcy濃度與MMSE呈負(fù)相關(guān)(r=－0.57，P=0.000)，PON－1活性與Hcy濃度呈負(fù)相關(guān)(r=－0.32，P=0.02)，MDA濃度與MMSE無相關(guān)性(r=0.68，P=0.48)。

3 討論

VD是指由各類腦血管疾病引起的癡呆，即一種獲得性高級認(rèn)知功能障礙綜合征。VD實(shí)際上是由于一系列血管因素導(dǎo)致腦動脈硬化，腦組織灌流量降低，進(jìn)而導(dǎo)致腦組織結(jié)構(gòu)受損，而氧化應(yīng)激尤其是脂質(zhì)過氧化在這一過程中發(fā)揮著重要作用［4－6］。

MDA是脂質(zhì)代謝產(chǎn)物，可反映機(jī)體脂質(zhì)過氧化的速率及強(qiáng)度，并間接反映組織受自由基損傷的程度。國內(nèi)外多項(xiàng)研究表明，MDA濃度在VD患者中明顯升高［7－8］。Gustaw－Rothenberg等［8］研究發(fā)現(xiàn)，MDA濃度在阿爾茨海默病(AD)及VD患者中均升高，但在VD患者中升高更明顯，并認(rèn)為AD患者中MDA濃度升高實(shí)際上反映了AD發(fā)病的血管因素。本研究結(jié)果顯示，VD患者血清MDA濃度較對照組明顯升高，與文獻(xiàn)報(bào)道一致，VD患者血清MDA濃度與MMSE無明顯相關(guān)性。

表1 兩組一般資料比較Table 1 Comparison of general information between two groups

表2 VD組與對照組血清MDA、Hcy、Ca2+濃度及PON－1活性比較(±s)Table 2 Comparison of serum concentration of MDA，Hcy，Ca2+and PON－1 activity between two groups

表2 VD組與對照組血清MDA、Hcy、Ca2+濃度及PON－1活性比較(±s)Table 2 Comparison of serum concentration of MDA，Hcy，Ca2+and PON－1 activity between two groups

注:MDA=丙二醛，Hcy=同型半胱氨酸，PON－1=對氧磷酶－1

對照組300.10±0.0210.4±2.99.34±1.25165.2±38.2 VD組410.78±0.2513.6±3.910.78±1.48143.4±32.4 t 值0.0000.0060.0620.017 3.922.871.892.43 P值

PON－1是一種由肝臟合成的鈣離子依賴性芳香酯酶，能通過多種途徑降低體內(nèi)的氧化應(yīng)激狀態(tài)和脂質(zhì)過氧化損傷并具有抗動脈粥樣硬化作用［9］。Ng等［10］研究發(fā)現(xiàn)，PON－1基因敲除小鼠血管抗黏附能力下降、血管內(nèi)皮氧化應(yīng)激損害加重及血栓形成增加。黃建敏等［11］研究發(fā)現(xiàn)，合并動脈粥樣硬化的腦梗死患者血清對PON活性降低及氧化應(yīng)激增強(qiáng)。本研究結(jié)果顯示，VD患者血清PON－1活性較對照組明顯降低，且與MMSE呈正相關(guān)，說明PON－1活性減弱可能參與VD的發(fā)病過程，推測自由基所致的損傷和機(jī)體抗氧化系統(tǒng)保護(hù)功能的減弱可能在VD病理過程中起重要作用。

高同型半胱氨酸血癥是認(rèn)知障礙的獨(dú)立危險(xiǎn)因素［12］。Sachdev等［13］研究表明，高同型半胱氨酸血癥可通過導(dǎo)致動脈粥樣硬化及其造成的腦缺血壞死、腦白質(zhì)疏松癥、腦萎縮等導(dǎo)致VD。Hcy引起的動脈硬化及血管內(nèi)皮損傷的機(jī)制與Hcy在體內(nèi)生成同型半胱氨酸硫內(nèi)酯(homocysteine thiolactone，HTL)，增強(qiáng)氧化應(yīng)激［14－15］和抑制PON－1活性有關(guān)［16］。本研究結(jié)果顯示，VD患者血清Hcy濃度升高，與PON－1活性呈負(fù)相關(guān)，與MMSE亦呈負(fù)相關(guān)，進(jìn)一步說明高Hcy可能參與VD的發(fā)病，而抗氧化酶PON－1是VD的保護(hù)因素。但高Hcy影響PON－1活性的原因及其參與血管病變的確切機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

宋博毅等［17］研究觀察了AD患者血清Ca2+濃度與氧化應(yīng)激的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)老年AD組血清Ca2+濃度及超氧化物歧化酶濃度明顯降低，MDA水平明顯升高。本研究中亦將血清Ca2+濃度作為反映氧化應(yīng)激的參數(shù)進(jìn)行比較，結(jié)果提示VD組患者血清Ca2+濃度與對照組相比無差異。

綜上所述，VD患者血清MDA及Hcy濃度均升高，PON－1活性下降，且血清Hcy濃度與PON－1活性均與患者M(jìn)MSE存在相關(guān)性。故筆者認(rèn)為可將MDA、Hcy及PON－1作為協(xié)助診斷VD的指標(biāo)，且Hcy及PON－1尚可提示病情進(jìn)展程度，有助于VD的早期發(fā)現(xiàn)與診斷。但此結(jié)論仍需進(jìn)一步大樣本量的研究統(tǒng)計(jì)加以證實(shí)。本研究結(jié)果也為探討VD的發(fā)病機(jī)制提供了一定參考。

1 Bowler JV．Modern concept of vascular cognitive impairment［J］．Br Med Bull，2007，83(8):291－305．

2 Aybek H，Ercan F，Aslan D，et al．Determination of malondialdehyde，reduced glutathione levels and APOE4 allele frequency in late－onset Alzheimer's disease in Denizli，Turkey［J］．Clin Biochem，2007，40(3/4):172－176．

3 馮濤，王擁軍.血管性癡呆國際診斷標(biāo)準(zhǔn)的解讀與比較［J］.中國卒中雜志，2009，4(1):62－64．

4 郭軒東，常履華.血管性認(rèn)知障礙研究進(jìn)展［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2010，16(9):1379－1381．

5 Gómez－Ramos A，Díaz－Nido J，Smith MA，et al．Effect of the lipid peroxidation product acrolein on tauphosphorylation in neural cells［J］．J Neurosci Res，2003，71(6):863－870．

6 王天俊，郎靜芳，呂佩源，等.血管性癡呆小鼠海馬CA1區(qū)Calpain I表達(dá)的變化［J］.疑難病雜志，2010，9(2):85.

7 詹雪春，章軍建.血管性認(rèn)知障礙與氧化性損傷的關(guān)系研究［J］.神經(jīng)損傷與功能重建，2006，1(2):91－92．

8 Gustaw－RothenbergK，KowalczukK，Stryjecka－Zimmer M．Lipids'peroxidation markers in Alzheimer's disease and vascular dementia［J］．Geriatr Gerontol Int，2010，10(2):161－166．

9 Kotur－Stevuljevic J，Spasic S，Jelic－Ivanovic Z，et al．PON－1 status is influenced by oxidative stress and inflammation in coronary heart disease patients［J］．Clinical Biochemistry，2008，41:1067－1073．

10 Ng DS，Chu T，Esposito B，et al．Paraoxonase－1 deficiency in mice predisposes to vascularinammation，oxidativestress，and thrombogenicity in the absence of hyperlip idemia［J］．Cardiovasc Pathol，2008，17(4):226－232．

11 黃建敏，黃瑞雅，簡崇東，等.老年腦梗死患者血清對氧磷酶1活性與氧化應(yīng)激的關(guān)系及其在動脈粥樣硬化中的作用［J］.中國動脈硬化雜志，2010，18(11):882－884．

12 Schafer JH，Glass TA，Bolla KI，et al．Homocysteine and cognitive function in a population－based study of older adults［J］．J Am Geriatr Soc，2005，53(3):381－388．

Research on the Relationship between Oxidative Stress Marks and Vascular Dementia

XU Xin－lei，CAI De－liang．Department of Neurology，Wuxi Tongren International Rehabilitation Hospital，Wuxi 214151，China

ObjectiveTo explore the relationship between oxidative stress marks of malondialdehyde(MDA)，paraoxonase－1(PON－1)，homocysteine(Hcy)，Ca2+and vascular dementia(VD)．Methods41 VD patients(VD group)admitted to the neurology department in our hospital from 2010 to 2011 and 30 healthy volunteers(control group)underwent physical examinations were involved into the study．Mini－Mental State Examination(MMSE)scores were graded and the levels of MDA，Hcy，Ca2+and PON－1 activity were detected and compared between the two groups.ResultsThe levels of MDA，Hcy and PON－1 activity between VD group and control group showed statistically significant differences(P＜0.05)．In the VD group，PON－1 was positively correlated with MMSE(r=0.25，P=0.03)，Hcy was negatively correlated with MMSE(r=－0.57，P=0.000)，PON－1 activity was negatively correlated with Hcy(r=－0.32，P=0.02)，and MDA showed no correlation with MMSE(r=0.68，P=0.48)．ConclusionThe determination of MDA，Hcy and PON－1 activity can help diagnose VD，Hcy and PON－1 can serve as indicators of disease progress．

Dementia，vascular;Oxidative stress;Malondialdehyde;Homocysteine;Paraoxonase－1

R 749.1

B

1007－9572(2012)11－3887－03

10.3969/j.issn.1007－9572.2012.11.105

214151江蘇省無錫市同仁國際康復(fù)醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科

徐新蕾，214151江蘇省無錫市同仁國際康復(fù)醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;

E－mail:xinlei－1984@163.com

13 Sachdev P．Homocysteine，cerebrovascular disease and brain atrophy［J］．J Neurol Sci，2004，226(1/2):25－29．

14 Kerkeni M，Tnani M，Chuniaud L，et al．Comparative study on in vitro effects of homocysteine thiolactone and homocysteine on HUVEC cells:evidence for a stronger proapoptotic and proinflammative homocysteine thiolactone［J］．Mol Cell Biochem，2006，291(1/2):119－126．

15 楊旭紅，戴雯，劉立英，等.同型半胱氨酸硫內(nèi)酯致血管內(nèi)皮功能損傷機(jī)制與過氧化體增殖物激活型受體γ的相關(guān)性［J］.中國動脈硬化雜志，2009，17(12):975－979．

16 Ferretti G，Bacchetti T，Marotti E，et al．Effect of homocysteinylation on human highdensity lipoproteins:a correlation with paraoxonase activity［J］．Metabolism，2003，53(2):146－151．

17 宋博毅，張艷梅.老年性癡呆與鈣代謝障礙相關(guān)性的可能機(jī)制［J］.實(shí)用老年醫(yī)學(xué)，2011，25(4):304－305．

2012－03－23;

2012－10－09)

(本文編輯:張小龍)