[摘要] 目的 利用瘧原蟲(chóng)感染后患者血常規(guī)參數(shù)及散點(diǎn)圖變化規(guī)律，探索快速簡(jiǎn)便發(fā)現(xiàn)瘧原蟲(chóng)感染的方法。方法 對(duì)15例瘧疾患者的血常規(guī)參數(shù)及散點(diǎn)圖進(jìn)行分析，總結(jié)出瘧原蟲(chóng)感染散點(diǎn)圖的變化規(guī)律。結(jié)果 瘧疾患者外周血在Sysmex XE2100的DIFF散點(diǎn)圖和白細(xì)胞/嗜堿性粒細(xì)胞散點(diǎn)圖中嗜酸性粒細(xì)胞、不典型淋巴細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等特定區(qū)域出現(xiàn)異常散點(diǎn)圖，并伴有不同程度的血細(xì)胞減少。 結(jié)論 分析血細(xì)胞分析儀的DIFF散點(diǎn)圖和白細(xì)胞/嗜堿性粒細(xì)胞散點(diǎn)圖時(shí)，疑有瘧原蟲(chóng)感染，進(jìn)行血涂片鏡檢，將提高瘧原蟲(chóng)檢出率。

[關(guān)鍵詞] 瘧原蟲(chóng)；散點(diǎn)圖；血液分析儀

[中圖分類號(hào)] R254.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2011）36-80-02

The Application Value of Hematology Analyzer Scattergram in Malaria Diagnosis

WANG Xiaoou CHEN Xiaojian SHU Kuangyi LI Mianmian LI Fang

Department of Clinical Laboratory，the Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College，Wenzhou 325027，China

[Abstract] Objective To explore a quick and feasible method of screening malaria parasite by the alarm information of complete blood cell analysis and scattergram for patients with malarial parasite infected. Methods Analyzed complete blood counts and scattergram in 15 malaria patient，and summarized their changes. Results Abnormal scattergram in definite region of Sysmex XE2100 DIFF and WBC/basophile such as eosinophil，atypical lymphocytes and basophile were found in peripheric blood of patients with reduction of blood cell in different degree. Conclusion Microscopic review is used when scattergram of hematology DIFF analysis and WBC/basophile shows possibly malarial parasite infected，the rate of detection will be greatly improved.

[Key words] Malarial Parasite；Scatter；Hematology analyzer

瘧疾是熱帶病中最嚴(yán)重的一種寄生蟲(chóng)病，分布遍及全球。瘧疾的確診取決于瘧原蟲(chóng)的找到與否，顯微鏡血涂片觀察對(duì)查找瘧原蟲(chóng)至關(guān)重要?，F(xiàn)在各家醫(yī)院自動(dòng)化血液分析儀的應(yīng)用普及，大大減輕了檢驗(yàn)人員的工作量，但同時(shí)檢驗(yàn)工作者也忽視了血液的血涂片顯微鏡檢查。由于血涂片顯微鏡鏡檢復(fù)查率減少或者對(duì)分析儀分析過(guò)程中出現(xiàn)的警告提示和異常散點(diǎn)圖圖像不夠重視，使散發(fā)病例誤診漏診機(jī)會(huì)大為增加。本文對(duì)近兩年本院發(fā)現(xiàn)的15例瘧疾病例進(jìn)行分析，利用瘧原蟲(chóng)感染后血常規(guī)參數(shù)及散點(diǎn)圖變化規(guī)律，探索快速簡(jiǎn)便發(fā)現(xiàn)瘧原蟲(chóng)感染的方法，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料和方法

1.1 病例資料

2009年2月～2010年10月期間本院確診的瘧疾病例共15例，其中間日瘧原蟲(chóng)感染13例，男性9例，女性4例，年齡14～50歲；惡性瘧原蟲(chóng)感染2例，均為男性，年齡29～44歲。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

日本Olympus CH20雙目光學(xué)顯微鏡，用于血涂片顯微鏡鏡檢分析；Sysmex XE-2100五分類血細(xì)胞分析儀和原裝配套試劑，由日本希森美康公司提供；血涂片用瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液進(jìn)行染色，染液按陸永綏主編的《臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程》第二版的要求配制[1]。

1.3 檢測(cè)方法

在患者高熱寒戰(zhàn)期，用美國(guó)BD公司生產(chǎn)的乙二胺四乙酸二鉀鹽真空抗凝管（Vacutainer EDTA-K2）采集靜脈血2mL，應(yīng)用Sysmex XE-2100全自動(dòng)血液分析儀進(jìn)行血液常規(guī)分析。

1.4 瘧疾確診

患者高熱寒戰(zhàn)期，取靜脈血做血涂片，瑞氏-姬姆薩染色后，油鏡下觀察，找到各期瘧原蟲(chóng)即可確診。

2 結(jié)果

2.1 13例間日瘧患者血常規(guī)基本參數(shù)情況

白細(xì)胞計(jì)數(shù)偏低9例，占69.2%；紅細(xì)胞計(jì)數(shù)偏低6例，占46.2%；血紅蛋白值偏低3例，占23.1%；紅細(xì)胞壓積偏低10例，占76.9%；血小板計(jì)數(shù)13例病人均偏低。

2.2 間日瘧的散點(diǎn)圖特征

DIFF通道顯示：5例提示出現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)增加的患者，在橘紅色嗜酸性粒細(xì)胞散點(diǎn)圖的左側(cè)出現(xiàn)異常分布的橘紅色點(diǎn)；6例嗜酸性粒細(xì)胞與中性粒細(xì)胞無(wú)法區(qū)分，在兩個(gè)區(qū)域融合出現(xiàn)異常白色點(diǎn)；2例白細(xì)胞無(wú)法分類，在上述同區(qū)域同樣出現(xiàn)異常白色點(diǎn)。綜上所述，13例瘧疾患者散點(diǎn)圖均在（圖1B）可疑區(qū)域出現(xiàn)異常點(diǎn)圖，并在另一箭頭所示提示有碎片增多（圖1B）。WBC/BASO通道顯示：未見(jiàn)明顯變化。PLT圖顯示：出現(xiàn)不同程度的異常拖尾現(xiàn)象（圖2）。

2.3 惡性瘧患者血常規(guī)基本參數(shù)變化

與臨床正常參考值比較，2例惡性瘧患者均出現(xiàn)白細(xì)胞計(jì)數(shù)減少、紅細(xì)胞壓積降低和血小板計(jì)數(shù)減少，其中一例出現(xiàn)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)減少。惡性瘧的散點(diǎn)圖特征提示異淋或嗜堿性粒細(xì)胞增多，并提示細(xì)胞碎片增多（圖1C箭頭所示），血小板直方圖也出現(xiàn)異常拖尾現(xiàn)象（圖2）。

3 討論

Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀應(yīng)用半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞原理結(jié)合細(xì)胞化學(xué)熒光染色技術(shù)對(duì)外周血進(jìn)行檢測(cè)，使用WBC/BASO和WBC的DIFF檢測(cè)通道，并可得到白細(xì)胞散點(diǎn)圖（X軸表示側(cè)向散射光強(qiáng)度，Y軸表示前向散射光強(qiáng)度）和直方圖表示。血細(xì)胞分析儀用半導(dǎo)體激光照射標(biāo)本，并根據(jù)各個(gè)血細(xì)胞特點(diǎn)產(chǎn)生結(jié)果，側(cè)向熒光反映細(xì)胞中核糖核酸（RNA）和脫氧核糖核酸（DNA）的含量，側(cè)向散射光反映細(xì)胞內(nèi)涵物，前向散射光反映細(xì)胞體積，如細(xì)胞核和胞漿內(nèi)含的顆粒，從而保證了白細(xì)胞分類的質(zhì)量[2，3]。

患者感染瘧原蟲(chóng)以后，紅細(xì)胞遭到紅細(xì)胞內(nèi)期瘧原蟲(chóng)的直接破壞，是瘧疾患者發(fā)生貧血的原因之一。脾臟中巨噬細(xì)胞增多，吞噬有瘧原蟲(chóng)感染的紅細(xì)胞，宿主產(chǎn)生特異性抗體后，易形成抗原抗體復(fù)合物附著于正常成熟紅細(xì)胞，從而引起免疫性溶血。瘧疾發(fā)作次數(shù)越頻繁，病程越長(zhǎng)，將導(dǎo)致貧血越嚴(yán)重[4]，所以多例病人表現(xiàn)為紅細(xì)胞減少。瘧疾發(fā)作期，紅細(xì)胞內(nèi)瘧原蟲(chóng)成熟裂殖體脹破紅細(xì)胞膜，裂殖子和瘧原蟲(chóng)的代謝產(chǎn)物、變性和殘留的血紅蛋白及紅細(xì)胞碎片等一同流入血流，形成大量紅細(xì)胞碎片，這是引起DIFF散點(diǎn)圖中細(xì)胞碎片增多的原因。

患者感染瘧原蟲(chóng)后脾功能亢進(jìn)，淋巴巨噬細(xì)胞增生，吞噬能力增強(qiáng)，不僅吞噬受瘧原蟲(chóng)感染的細(xì)胞，還吞噬未受感染的或受損的細(xì)胞以及血小板，從而使PLT降低[5]。也有人認(rèn)為瘧原蟲(chóng)作為抗原刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生血小板相關(guān)抗體，血小板和相關(guān)抗體結(jié)合后經(jīng)過(guò)脾臟紅髓時(shí)，與巨噬細(xì)胞接觸充分，大量血小板通過(guò)FC受體被巨噬細(xì)胞吞噬[6]，故外周血液中血小板顯著減少[7]。血小板減低、細(xì)胞碎片的增多等原因?qū)е略谘“逯狈綀D上表現(xiàn)為拖尾及尾部抬高現(xiàn)象（圖2）。

瘧原蟲(chóng)寄生于紅細(xì)胞后，胞內(nèi)出現(xiàn)異常內(nèi)容物，被寄生的紅細(xì)胞被儀器檢測(cè)出有顆粒及DNA（或RNA），從而被誤認(rèn)為是白細(xì)胞或其他異常細(xì)胞。間日瘧感染的紅細(xì)胞胞體脹大，內(nèi)容物較多、較大，細(xì)胞類似于嗜酸性粒細(xì)胞，在DIFF散點(diǎn)圖中出現(xiàn)中性粒細(xì)胞與嗜酸性粒細(xì)胞圖形分界不清晰，在此區(qū)域形成散點(diǎn)濃染或者灰色圖；惡性瘧感染的紅細(xì)胞胞體不變或偏小且內(nèi)容物相對(duì)較少、較小，細(xì)胞類似于嗜堿性粒細(xì)胞，在DIFF散點(diǎn)圖和WBC/BASO散點(diǎn)圖上表現(xiàn)為不典型淋巴細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞區(qū)域有散點(diǎn)圖存在并且增多而散在（圖1）。

綜上所述，在Sysmex XE-2100血液自動(dòng)分析儀中，被瘧原蟲(chóng)感染的紅細(xì)胞易被誤認(rèn)為白細(xì)胞或其他非紅系的異常細(xì)胞，且在DIFF散點(diǎn)圖中嗜酸性粒細(xì)胞、細(xì)胞碎片、不典型淋巴細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等特定區(qū)域出現(xiàn)異常。如散點(diǎn)圖中提示有大量細(xì)胞碎片，且在圖1B箭頭所示細(xì)胞碎片和嗜酸性粒細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)異常，則高度懷疑為間日瘧原蟲(chóng)感染，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[8]；如散點(diǎn)圖中提示有大量細(xì)胞碎片，且在圖1C箭頭所示不典型淋巴細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)異常，則高度懷疑為惡性瘧原蟲(chóng)感染。這種情況下，檢驗(yàn)人員應(yīng)主動(dòng)聯(lián)系臨床醫(yī)生或者患者，了解患者的臨床癥狀和表現(xiàn)，了解患者的流行病學(xué)，并嚴(yán)格按照操作規(guī)程在患者高熱寒戰(zhàn)期采取靜脈血做血液常規(guī)及血涂片檢查以提高檢出陽(yáng)性率。

總之，在分析血細(xì)胞分析儀的DIFF散點(diǎn)圖和白細(xì)胞/嗜堿性粒細(xì)胞散點(diǎn)圖時(shí)，發(fā)現(xiàn)懷疑有瘧原蟲(chóng)感染的異常散點(diǎn)圖，可以進(jìn)行血涂片仔細(xì)鏡檢，提高瘧原蟲(chóng)檢出率。

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（收稿日期：2011-09-27）