摘要：采用ＥＬＩＳＡ方法對從民和縣范圍內(nèi)收集的４９５份肉牛血清進(jìn)行了肺炎支原體抗體監(jiān)測。結(jié)果從采集的４９５份牛血清中檢出牛肺炎支原體陽性血清１０７份，陽性率為２１．６２％。該結(jié)果表明，民和縣范圍內(nèi)肉牛中存在支原體的感染和流行。

關(guān)鍵詞：牛肺炎支原體；ＥＬＩＳＡ；血清學(xué)調(diào)查

中圖分類號：Ｓ８５８．２３文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B文章編號：１００７－２７３Ｘ（２０11）09-0026-02

青海省是傳統(tǒng)的畜牧大省，由于其獨(dú)特的自然地理情況和草地資源，也是我國肉牛養(yǎng)殖的主要區(qū)域。自２０世紀(jì)９０年代初國家強(qiáng)調(diào)發(fā)展以節(jié)糧型草食牲畜為主的畜牧業(yè)以來，全省肉牛產(chǎn)業(yè)得到快速發(fā)展。與此同時(shí)，各種疫病對肉牛養(yǎng)殖業(yè)的制約作用也日益凸顯。在這些動物疫病中，牛呼吸道疾病綜合征（Ｂｏｖｉｓ rｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ dｉｓｅａｓｅ cｏｍｐｌｅｘ，ＢＲＤＣ）是危害養(yǎng)牛業(yè)最為嚴(yán)重的一大類疾病。而引起ＢＲＤＣ的病原中，支原體感染是其中重要的一類。支原體亦稱霉形體，最早由Ｎｏｃａｒｄ和Ｒｏｕｘ由牛傳染性胸膜肺炎病例中分離得到［１］。支原體家族中成員非常多，引起牛肺疫的絲狀支原體亞種曾經(jīng)在我國大面積流行，并導(dǎo)致嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。哈爾濱獸醫(yī)研究所研制成功的牛傳染性胸膜肺炎弱毒疫苗經(jīng)廣泛使用，結(jié)合封鎖、消毒等措施徹底控制了該病，我國也于１９９６年對外宣布消滅牛傳染性胸膜肺炎。養(yǎng)牛業(yè)支原體疫病也一度銷聲匿跡。然而，自辛九慶等［２］報(bào)道國內(nèi)首次從患肺炎的犢牛肺臟中分離到了牛支原體（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ Ｂｏｖｉｓ）以來，該病已在十多個省市流行，奶牛、肉牛中均有報(bào)道。因此，本次從全縣范圍內(nèi)廣泛采集肉牛血清樣本，對牛支原體進(jìn)行抗體監(jiān)測，目的在于搞清楚牛支原體在我縣肉牛中的發(fā)生流行情況，為制定該病綜合防范措施，確保肉牛產(chǎn)業(yè)安全健康生產(chǎn)提供基礎(chǔ)資料。

１材料和方法

１．１材料

牛支原體ＥＬＩＳＡ檢測試劑盒（ＢＩＯ－Ｘ ＭＹＣＯＰＬＡＳＭＡ ＢＯＶＩＳ ＥＬＩＳＡ ＫＩＴ Ｋ２６０）。被檢血清共４９５份，采自青海省民和縣各肉牛養(yǎng)殖企業(yè)和散養(yǎng)戶，采樣地點(diǎn)覆蓋全縣各主要牛場。

１．２方法

常規(guī)抗體ＥＬＩＳＡ檢測方法，具體操作參照試劑盒說明。

２結(jié)果

本次試驗(yàn)中采用ＥＬＩＳＡ方法共檢測了４９５份牦牛血清樣品，其中檢出陽性１０７份，陽性率為２１．６２％。

３討論和分析

牛支原體是一種容易被忽視的病原，目前國內(nèi)尚無有效的血清學(xué)鑒別診斷方法，對牛支原體的毒力因子及免疫機(jī)理研究也相對滯后，缺乏其相應(yīng)的疫苗和快速診斷檢測方法，加之牛支原體對大部分抗生素不敏感，這給臨床防治帶來很大的困難。該病在我國的諸多流行病學(xué)資料也不明晰，缺乏系統(tǒng)的流行病學(xué)資料，目前尚無商品化的疫苗用于該病防治，使綜合防制面臨非常大的困難。此次對民和縣境內(nèi)的大樣本量的牛支原體抗體監(jiān)測，結(jié)果顯示牛支原體在民和縣境內(nèi)已經(jīng)有較高的陽性率，雖尚未見大面積支原體性肺炎發(fā)病的報(bào)道，但是高陽性的感染率也是疫病暴發(fā)的高風(fēng)險(xiǎn)因素。

牛支原體主要引起牛的肺炎、關(guān)節(jié)炎、乳房炎、角膜結(jié)膜炎等。該病原于１９６１年首次在美國患有乳房炎的病牛中分離得到［３］。在呼吸道感染的病牛中，至少有１／４～１／３是由牛支原體引起的［４］。牛支原體已經(jīng)在歐美的很多國家流行，引起牛呼吸道疾病并造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。近些年我國部分地區(qū)肉牛調(diào)運(yùn)過程中導(dǎo)致一些牛群出現(xiàn)嚴(yán)重的肺炎癥狀，臨床癥狀和病理解剖結(jié)果與牛肺疫非常相似，經(jīng)哈爾濱獸醫(yī)研究所診斷為牛支原體病原后，支原體引起的牛病再次引起國內(nèi)獸醫(yī)工作者的高度重視。此次對全縣境內(nèi)肉牛進(jìn)行牛支原體血清學(xué)摸底調(diào)查，全縣內(nèi)共采集４９５份牛血清，采樣地點(diǎn)覆蓋全縣各主要牛場和散養(yǎng)戶，結(jié)果共檢出１０７份牛支原體陽性血清，陽性率高達(dá)２１．６２％。此次結(jié)果表明全縣范圍內(nèi)肉牛中存在牛支原體的感染和流行。

３．１病原及發(fā)病原因分析

牛支原體肺炎是一種條件性致病病原，常在牛呼吸道中存在，在牛群健康及飼養(yǎng)管理良好的情況下不產(chǎn)生臨床癥狀。目前的研究表明牛支原體在牛群中分布廣泛，可引起地方流行性疫病，肉牛和奶牛均高度敏感，極少感染水牛和小型反芻動物。牛群一旦感染發(fā)病或青年牛潛伏感染后很難被清除［５］。在引種、補(bǔ)欄、貿(mào)易販運(yùn)活動頻繁，動物長途運(yùn)輸后免疫力低下、應(yīng)激反應(yīng)以及氣溫劇烈變化時(shí)常造成該病的發(fā)生。養(yǎng)殖環(huán)境衛(wèi)生狀況欠佳，糞便及殘留飼草墊料發(fā)酵產(chǎn)生的有毒有害氣體也是誘發(fā)該病的主要原因。

３．２臨床癥狀分析

近一段時(shí)間以來在某些鄉(xiāng)鎮(zhèn)養(yǎng)牛合作社和個別養(yǎng)殖大戶從外引進(jìn)和區(qū)內(nèi)調(diào)運(yùn)肉牛進(jìn)行飼養(yǎng)過程中，在隔離暫養(yǎng)還未混群時(shí)就發(fā)現(xiàn)個別牛精神沉郁，食欲不振，咳嗽頻繁，體溫升高（４０～４１℃）。后迅速蔓延至全群牛，發(fā)病率可達(dá)５０％，死亡率也高達(dá)２０％左右，小牛犢發(fā)病率和死亡率甚至更高（分別達(dá)８０％和５０％以上）。牛群臨床表現(xiàn)以劇烈咳嗽為主，尤其是在清晨和采食后咳嗽表現(xiàn)更為突出，干咳和濕咳均有；個別牛呼吸急迫，甚至有胸、腹式呼吸交替的表現(xiàn)；病程初期眼角分泌物非常多，以黃白色膿性分泌物為主，小部分病牛流清亮漿液性分泌物導(dǎo)致眼角持續(xù)長時(shí)間濕潤；鼻腔分泌物表現(xiàn)各異，有的為凝乳塊膿性分泌物、有的為豆腐渣樣分泌物，也有漿液性鼻液和鼻漏表現(xiàn)的病牛；絕大部分牛胸部叩診無疼痛避讓表現(xiàn)，但聽診幾乎都表現(xiàn)為濕啰音或摩擦音。剖檢部分死亡病例發(fā)現(xiàn)病理變化主要集中在胸腔和肺部，肺臟廣泛性出血性壞死，偶爾可見肺臟與胸膜粘連，剪開氣管可見大量分泌物附著，心包積液嚴(yán)重、呈淡黃色，少部分病牛可見腸道少量出血病變。發(fā)病病例采用抗生素治療效果不明顯。

３．３及早診斷

可根據(jù)臨床經(jīng)驗(yàn)結(jié)合肉牛發(fā)病的臨床表現(xiàn)和病理解剖結(jié)果以及施治情況進(jìn)行綜合判斷［２，６］，經(jīng)采集部分病牛的肺臟組織送交哈爾濱獸醫(yī)研究所支原體國家參考實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病原分離及支原體種間ＰＣＲ鑒別診斷，最后確診引起本次牛群發(fā)病的病原為牛支原體。血清學(xué)診斷結(jié)果也印證了病原分離鑒定的檢測結(jié)果。支原體分離培養(yǎng)比較困難，營養(yǎng)要求和培養(yǎng)條件比較苛刻，并且需注意與無乳支原體的鑒別診斷。

３．４搞好綜合防控措施

“早確診、早治療”是有效控制該病的基本原則，選用支原體敏感的抗生素如四環(huán)素，環(huán)丙沙星等有一定的治療效果，另據(jù)報(bào)道早期使用泰樂菌素類（泰樂菌素、替米考星、瑞可新）和泰妙菌素類抗菌藥物（支原凈、沃尼妙林）也有一定效果。采用抗生素治療的同時(shí)一定要注意不同流行區(qū)域內(nèi)菌株藥敏差異性和支原體耐藥性因素，并且保證劑量和療程要足夠。筆者在臨床施治過程中，采用環(huán)丙沙星和四環(huán)素兩種抗生素交替使用，足量靜注，同時(shí)注意搞好其他繼發(fā)疾病的對癥治療和部分重癥病例的支持治療，７ｄ為一個療程，３個療程為一個階段，通常３個療程后病牛普遍好轉(zhuǎn)，長勢良好，再未見新發(fā)病例。

縱觀牛支原體在我國的發(fā)病情況報(bào)道，長途調(diào)運(yùn)、輸入性的引種和販買活動是該病發(fā)生的外部因素，做好動物及其產(chǎn)品的流通監(jiān)管，嚴(yán)格防疫檢疫是有效防控該病的強(qiáng)有力手段。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，減少應(yīng)激因素，加強(qiáng)牛群引進(jìn)管理，不從疫區(qū)或發(fā)病區(qū)引進(jìn)牛只，分群隔離飼養(yǎng)，保證日糧的全價(jià)營養(yǎng)，適當(dāng)補(bǔ)充精料與維生素及礦物質(zhì)，嚴(yán)格環(huán)境消毒處理，嚴(yán)密監(jiān)控牛群健康是防制該病的主要方法。

參考文獻(xiàn)：

［１］李媛，辛九慶，高玉龍，等．動物支原體［Ｊ］．畜牧獸醫(yī)科技信息，２００４（9）：１６－１７．

［２］辛九慶，李媛，郭丹，等． 國內(nèi)首次從患病的犢牛肺臟中分離到牛支原體［Ｊ］．中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，２００８，３０（９）：６６１－６６５．

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［５］胡長敏，石磊，龔瑞，等．牛支原體病研究進(jìn)展［Ｊ］．動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，２００９，３０（８）：７３－７７．

［６］石磊，龔瑞，尹爭艷，等．肉牛傳染性牛支原體肺炎流行的診斷［Ｊ］．華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，２００８，２７（５）：６２９－６３３．