郝志欣，安東臣，黃 芬

(大連民族學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院學(xué)生遼寧大連 116605)

螺旋藻多糖提取優(yōu)選工藝條件的研究

郝志欣，安東臣，黃 芬

(大連民族學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院學(xué)生遼寧大連 116605)

本研究以杭州螺旋藻為研究材料，對(duì)浸提pH值、溫度、浸提固液比以及浸提次數(shù)作為單因素進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，通過(guò)方差分析得到螺旋藻水溶性多糖浸提工藝的優(yōu)選組合，進(jìn)而獲得最大浸提率，為螺旋藻的深度開發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源及處理

(1)樣品來(lái)源:實(shí)驗(yàn)樣品為杭州螺旋藻。將樣品研碎，干燥，密封在干燥器內(nèi)待用。

(2)樣品處理:準(zhǔn)確稱取0.5 g樣品于250 mL燒杯中，每份加水150 mL，依實(shí)驗(yàn)確定的4個(gè)因素見表1。分別浸提1h，過(guò)濾，濾渣加150 mL水浸提，過(guò)濾，濾液合并，濃縮至10 mL，用5%三氯乙酸調(diào)pH值到中性(因?yàn)閴A性條件下多糖易分解，不易保存)，取3 mL濃縮液加入3倍體積(即9 mL)的95%乙醇，在3 000 r·s－1離心20 min，收集沉淀得粗多糖。

表1 正交實(shí)驗(yàn)因素水平表

1.2 測(cè)定及標(biāo)準(zhǔn)曲線

將蒽酮－濃硫酸試劑(0.1 g蒽酮加50 mL的濃硫酸，現(xiàn)用現(xiàn)配)按下表處理標(biāo)準(zhǔn)樣品，加完蒽酮－濃硫酸后立即蓋蓋并放入冰水中，冷卻約1 min后放入沸水浴中，加熱10 min后取出冷卻至室溫，用紫外分光光度計(jì)在620 nm處比色測(cè)定，每組實(shí)驗(yàn)做3個(gè)平行，結(jié)果見表2。由測(cè)定結(jié)果得出標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程:

A=0.0069 C － 0.002，R2=0.999

其中，A為吸光度值;C為葡萄糖濃度μg·mL－1。

表2 多糖含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線

2 結(jié)果

通過(guò)對(duì)單因素梯度實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)的結(jié)果分析，得到螺旋藻多糖的最佳浸提工藝條件:pH值為11，溫度為80℃，固液比1:30，浸提次數(shù)為2次，每次浸提1 h。對(duì)螺旋藻多糖浸出率影響最大的因素是浸提次數(shù)，其次是pH值、固液比，而浸提溫度沒(méi)有顯著影響。經(jīng)醇沉及脫蛋白處理后的螺旋藻多糖浸出率最高可達(dá)4.213%。

3 討論

通過(guò)對(duì)螺旋藻多糖提取過(guò)程中各環(huán)節(jié)的最佳條件的探討，找到了一條提取螺旋藻多糖較好的工藝方法。應(yīng)用柱層層析或氣相色譜等方法測(cè)定多糖組分，有待于進(jìn)一步深入研究。

［1］于紅，張學(xué)成.螺旋藻多糖抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.高新技術(shù)，2003(7):83－87.

［2］孫建光，謝應(yīng)先.螺旋藻多糖的組成與功能及影響藻類多糖生成的因素［J］.海洋科技，1997(4):14－17.

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［4］高向東，吳梧桐.螺旋藻多糖抗腫瘤作用的研究［J］.中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，31(6):458－461.

R282.4

A

(責(zé)任編輯 劉敏)

1009－315X(2011)05－0543－01

2010－06－12;最后

2011－03－28

大連民族學(xué)院太陽(yáng)鳥計(jì)劃資助項(xiàng)目(20080330)。

指導(dǎo)教師:楊寶靈(1969－)，女，內(nèi)蒙古通遼人，高級(jí)實(shí)驗(yàn)師，主要從事細(xì)胞生物學(xué)研究。