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        降低仙客來組培苗成本的研究初報(bào)

        2017-09-15 12:48:20伊萬偉李方華張永久崔興林
        上海蔬菜 2017年4期
        關(guān)鍵詞:培苗廉價(jià)白砂糖

        伊萬偉 李方華 張永久 崔興林

        (酒泉職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物工程系,甘肅酒泉 735000)

        降低仙客來組培苗成本的研究初報(bào)

        伊萬偉 李方華 張永久 崔興林

        (酒泉職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物工程系,甘肅酒泉 735000)

        以仙客來種子無菌培養(yǎng)獲得的葉片為外植體,研究了培養(yǎng)基成分的廉價(jià)替代、培養(yǎng)基成分含量的降低對(duì)仙客來組織培養(yǎng)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明,用食用白砂糖替代分析純蔗糖,用自來水替代蒸餾水,培養(yǎng)基大量元素含量降低1/2,其培養(yǎng)效果和常規(guī)MS培養(yǎng)基效果基本相似,而成本可大幅降低。

        仙客來;組織培養(yǎng);成本降低

        仙客來(Cyclamen persicum)是報(bào)春花科仙客來屬半耐寒多年生球莖類草本植物,花色艷麗,花期長(約6個(gè)月),深受人們喜愛,具有較高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。目前,用植物組織培養(yǎng)的方法對(duì)仙客來進(jìn)行繁殖能夠保持其優(yōu)良性狀并具有較高繁殖率[1],但是,在仙客來組培快繁過程中,芽的誘導(dǎo)率低、污染率高和培養(yǎng)基成本大等原因,造成組培成本較高,嚴(yán)重制約了仙客來組培苗工廠化生產(chǎn)的發(fā)展。本試驗(yàn)從降低仙客來組織培養(yǎng)成本入手,分析培養(yǎng)基成分的廉價(jià)替代和成分含量的降低對(duì)仙客來繼代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)的影響,以期降低仙客來組培苗的成本,為仙客來組培苗工廠化生產(chǎn)提供技術(shù)支撐。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)材料

        仙客來種子(蘭州昶榮園林有限公司提供)用流水沖洗20min,然后在35~40℃無菌水中浸泡12h,取出后用70%酒精浸泡1min,再用無菌水沖洗3次,然后用0.1%升汞溶液浸泡并震蕩8min,最后用無菌水沖洗6次。將處理過的種子用無菌濾紙吸干水分,接入MS培養(yǎng)基(3%蔗糖、0.5%瓊脂,pH值5.6~5.8)上,每瓶培養(yǎng)基接種3粒種子。培養(yǎng)溫度15~20℃,經(jīng)過45d培養(yǎng)后,90%種子長出白色小根,70d后,植株長大,展開2片葉片,獲得無菌苗。

        1.2 試驗(yàn)方法

        1.2.1 培養(yǎng)基成分的廉價(jià)替代

        組織培養(yǎng)過程中,分別用食用白糖和自來水代替分析純蔗糖和蒸餾水來配制繼代培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基,以常規(guī)配制的MS培養(yǎng)基為對(duì)照,研究廉價(jià)替代后的培養(yǎng)基對(duì)仙客來繼代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)的影響。

        1.2.2 培養(yǎng)基成分量的降低

        在繼代培養(yǎng)階段,用1/2MS、1/3MS培養(yǎng)基[2]進(jìn)行仙客來的增殖培養(yǎng),觀察增殖情況,分析培養(yǎng)基成分量的降低對(duì)增殖培養(yǎng)的影響。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 培養(yǎng)基成分的廉價(jià)替代

        由表1可知,在仙客來繼代培養(yǎng)階段,用食用白砂糖代替分析純蔗糖,芽的增殖倍數(shù)為4.1倍,用自來水代替蒸餾水,芽的增殖倍數(shù)為4.4倍,而常規(guī)MS培養(yǎng)基則為4.6倍。由表2可知,在仙客來生根培養(yǎng)階段,用食用白砂糖代替分析純蔗糖,仙客來發(fā)根率為79.3%;用自來水代替蒸餾水,發(fā)根率為79.0%;常規(guī)MS培養(yǎng)基發(fā)根率為80.0%。試驗(yàn)結(jié)果表明,在仙客來繼代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)階段,用食用白砂糖代替分析純蔗糖和用自來水代替蒸餾水,培養(yǎng)效果基本相似。

        表1 培養(yǎng)基成分廉價(jià)替代對(duì)仙客來繼代培養(yǎng)的影響

        表2 培養(yǎng)基成分廉價(jià)替代對(duì)仙客來生根培養(yǎng)的影響

        2.2 培養(yǎng)基成分量的降低

        由表3可知,在仙客來繼代培養(yǎng)過程中,1/2MS培養(yǎng)基芽的增殖倍數(shù)為4.4,且芽長勢(shì)良好,1/3MS培養(yǎng)基芽的增殖倍數(shù)為2.5,MS培養(yǎng)基芽的增殖倍數(shù)為4.6。試驗(yàn)結(jié)果表明,在培養(yǎng)基大量元素降低情況下,1/2MS培養(yǎng)基的繼代培養(yǎng)效果和MS培養(yǎng)基基本相同,而1/3MS培養(yǎng)基不論芽增殖倍數(shù)還是其生長情況都有所下降。

        表3 培養(yǎng)基成分量的降低對(duì)仙客來繼代培養(yǎng)的影響

        3 結(jié)論與討論

        試驗(yàn)結(jié)果表明,培養(yǎng)基成分的改變和含量的降低可有效降低仙客來組織培養(yǎng)的成本。用食用白砂糖替代分析純蔗糖,用自來水替代蒸餾水,將培養(yǎng)基大量元素含量降低1/2,仙客來培養(yǎng)的效果和常規(guī)MS培養(yǎng)基效果基本相似,而成本可大幅降低。然而,造成仙客來組培成本高的原因還有高污染、低誘導(dǎo)率等,因此,系統(tǒng)的降低組培成本需要在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步探尋可能的措施或方法。

        [1]余會(huì)寧.仙客來的離體無性試管繁殖研究[J].氨基酸和生物資源,2001,23(3):21~23。

        [2]龔一富.植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].北京:科學(xué)出版社,2011∶15~36.

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