郝 穎（綜述），付秀華（審校）

（內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，呼和浩特 010059）

肺癌是威脅人類生命的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和病死率乃居惡性腫瘤之首，其中非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）病例占全部肺癌病例的80%。近些年，針對(duì)肺癌綜合治療的研究已取得較大成績，但肺癌總的5年生存率仍只有13%，即使Ⅰ、Ⅱ期 NSCLC患者，術(shù)后5年生存率也只有 40% ～ 70%［1，2］，其主要限制因素為肺癌的復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，故及早發(fā)現(xiàn)NSCLC患者是否有微轉(zhuǎn)移存在對(duì)疾病的診斷分期、治療方案的選擇及預(yù)后評(píng)價(jià)有積極意義。

1 LunX mRNA與肺癌微轉(zhuǎn)移

肺特異性X蛋白（lungspecific X protein，LunX）mRNA是日本學(xué)者Iwao等運(yùn)用差異顯示技術(shù)通過對(duì)人體13種不同組織中分離出來的RNA，該基因定位于20p11.1～ q12，全長 1015 bp，包括一個(gè)編碼 26 個(gè)氨基酸的768個(gè)核苷酸的開放式讀碼框。由它所合成的人LunX的相對(duì)分子質(zhì)量為26.7×103。研究表明，LunX基因僅在肺組織中特異表達(dá)，而在肺外組織不表達(dá)［3］。LunX的生理功能暫不明確。微轉(zhuǎn)移是指惡性腫瘤在發(fā)展過程中，播散并存活于血循環(huán)、淋巴道、骨髓及各組織器官中，尚未形成轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)，無臨床表現(xiàn)，CT、B超、骨掃描等常規(guī)檢測(cè)方法和臨床病理檢查都難以檢測(cè)發(fā)現(xiàn)的一種微量轉(zhuǎn)移。微轉(zhuǎn)移是腫瘤多階段、多步驟中的過程之一，最終轉(zhuǎn)移病灶的形成受到脫落癌細(xì)胞的自身生物學(xué)特性、機(jī)體免疫狀況、局部血供形成等各方面的影響［4］。選擇恰當(dāng)?shù)陌谢蚴菦Q定檢測(cè)結(jié)果是否可靠的重要因素，有研究認(rèn)為，LunX mRNA對(duì)肺癌外周血及區(qū)域淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移具有較高的敏感性和特異性［5，6］，且目前研究發(fā)現(xiàn)的其他肺癌特異性基因較少，因此組織特異性mRNA常被用于檢測(cè)肺癌的微轉(zhuǎn)移［7］。

2 LunX mRNA檢測(cè)技術(shù)及取材部位

反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)可在106～107個(gè)正常細(xì)胞中檢出1～10個(gè)腫瘤細(xì)胞，檢測(cè)微轉(zhuǎn)移的靈敏度比傳統(tǒng)的免疫細(xì)胞化學(xué)方法高出10～100倍，是目前用于診斷NSCLC微轉(zhuǎn)移的最常用技術(shù)。熒光實(shí)時(shí)反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)實(shí)現(xiàn)了基因表達(dá)定量檢測(cè)，其中，絕對(duì)定量準(zhǔn)確，但操作過程繁瑣;相對(duì)定量操作相對(duì)簡單，但定量不夠準(zhǔn)確［8］，這成為限制LunX mRNA檢測(cè)在臨床廣泛應(yīng)用的瓶頸，有待一種定量更精準(zhǔn)、操作更簡易、價(jià)格更經(jīng)濟(jì)的檢測(cè)技術(shù)的問世。肺癌的微轉(zhuǎn)移研究的常規(guī)取材部位包括區(qū)域淋巴結(jié)、外周血、骨髓及胸膜腔微轉(zhuǎn)移，多數(shù)報(bào)道是對(duì)NSCLC的外周血及淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的研究，國內(nèi)對(duì)骨髓、胸腔積液的實(shí)驗(yàn)研究尚不多。Cheng等［9］在NSCLC患者外周血及胸腔積液中均檢測(cè)到LunX mRNA的表達(dá)，且是良惡性胸腔積液唯一顯著不同的檢測(cè)指標(biāo)。

3 LunX mRNA與NSCLC的病理分型

LunX mRNA在不同病理類型NSCLC患者的陽性表達(dá)各家報(bào)道不一。莊翔等［10］通過對(duì)60例Ⅰ～Ⅲ期手術(shù)肺癌患者、20例肺部良性病變手術(shù)患者及10例健康人外周血LunX mRNA檢測(cè)后認(rèn)為，不同病理類型肺癌患者外周血的LunX基因陽性表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，可以避免由于肺癌病理類型較多而導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的假陰性，獲得較好的敏感性。馮斌等［11］的實(shí)驗(yàn)得出同樣結(jié)果，外周血LunX mRNA表達(dá)情況在不同病理類型之間差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明在中晚期NSCLC患者中不論是腺癌或鱗癌，外周血微轉(zhuǎn)移發(fā)生的機(jī)會(huì)可能相似。姚舒洋等［12］的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，LunX mRNA的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與肺癌病理組織類型無關(guān)。但也有研究認(rèn)為NSCLC患者LunX mRNA的表達(dá)與病理類型有相關(guān)性。劉宏偉等［13］通過對(duì)54例NSCLC患者、50例肺良性病變和25例健康者外周血的研究發(fā)現(xiàn)，腺癌患者外周血LunX mRNA的陽性率高于非腺癌患者，由此可以預(yù)測(cè)腺癌更容易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移;低分化患者外周血微轉(zhuǎn)移的陽性率高于中分化和高分化患者，說明外周血LunX mRNA的陽性率與患者的細(xì)胞分化程度有關(guān)，分化程度越低，癌細(xì)胞的惡性程度越高，外周血LunX mRNA的陽性檢出率越高。黃同海等［14］的實(shí)驗(yàn)結(jié)果也顯示，LunX mRNA在肺腺癌中表達(dá)的陽性率高于鱗癌中的陽性表達(dá)。

4 LunX mRNA與NSCLC的分期

多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，LunX mRNA表達(dá)與TNM分期密切相關(guān)。姚舒洋等［12］認(rèn)為，LunX mRNA表達(dá)隨著TNM分期的升高而增多，提示LunX mRNA與肺癌的微轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。劉宏偉等［13］在研究后發(fā)現(xiàn)，Ⅲ期和Ⅳ期患者LunX mRNA的檢出率明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期患者，TNM分期越高，LunX mRNA的陽性率越高。馮斌等［11］作了更加細(xì)致的分析:實(shí)驗(yàn)病例中，Ⅳ期患者陽性率顯著高于Ⅲ期，提示肺癌患者分期越晚，腫瘤負(fù)荷越大，轉(zhuǎn)移越廣泛，外周血癌細(xì)胞檢測(cè)陽性率越高，為腫瘤的進(jìn)一步轉(zhuǎn)移提供條件。莊翔等［10］的研究結(jié)果表明，Ⅰ期和Ⅱ期肺癌患者的LunX mRNA表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Ⅲ期患者與Ⅰ期、Ⅱ期患者的LunX mRNA表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示LunX mRNA用于檢測(cè)早期肺癌微轉(zhuǎn)移以區(qū)別Ⅰ期與Ⅱ期的敏感性不夠，但對(duì)中晚期肺癌患者的微轉(zhuǎn)移診斷有幫助。朱廣迎等［15］也有同樣的報(bào)道，但Mitas等［5］對(duì)24例Ⅰ～Ⅳ期肺癌患者的研究后認(rèn)為，LunX mRNA的表達(dá)與肺癌分期的關(guān)系并不密切。

5 LunX mRNA與NSCLC患者的治療

通過檢測(cè)NSCLC患者LunX mRNA的表達(dá)以明確是否有微轉(zhuǎn)移的存在，從而可對(duì)治療方案的制訂提供重要依據(jù)。余小琴等［16］對(duì)NSCLC治療前和常規(guī)化療或手術(shù)治療后的病例分別進(jìn)行LunX mRNA檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)治療前病例陽性率約為0.87%，治療后病例陽性率為0.47%，兩者陽性率有明顯差別，說明LunX mRNA有可能成為考核臨床治療效果，尤其是化療效果的重要參考指標(biāo)。如上所述，劉宏偉等［13］認(rèn)為，低分化患者外周血LunX mRNA的陽性率高于中分化和高分化患者，建議臨床上要對(duì)病理檢查為細(xì)胞分化程度低的NSCLC患者進(jìn)行全身性化療，防止微轉(zhuǎn)移的發(fā)生。馮斌等［11］對(duì)不同客觀療效的亞組分析發(fā)現(xiàn)，化療療效與外周血LunX mRNA表達(dá)顯著相關(guān)，部分緩解組和穩(wěn)定組患者陽性率均較化療前顯著降低，分別為23.81%、26.09%，而進(jìn)展組患者陽性率無明顯降低，與化療前相似，提示化療可使有效或穩(wěn)定患者的外周血癌細(xì)胞數(shù)量顯著下降，而對(duì)病情進(jìn)展患者的作用不大;化療過程中多次監(jiān)測(cè)外周血中循環(huán)癌細(xì)胞的LunX mRNA表達(dá)情況:化療1周期后外周血LunX mRNA陽性表達(dá)率即顯著下降，繼續(xù)化療2周期后陽性率未發(fā)現(xiàn)繼續(xù)降低，提示在全身化療的初始階段，外周血循環(huán)癌細(xì)胞的變化情況已經(jīng)可以預(yù)示化療的客觀療效。Sher等［17］也認(rèn)為，循環(huán)癌細(xì)胞的檢測(cè)為快速判定治療效果和改善預(yù)后提供了一種新的方法，特別是外周血LunX mRNA表達(dá)轉(zhuǎn)陰的患者從后續(xù)化療中獲益更大，而化療后外周血循環(huán)癌細(xì)胞檢測(cè)仍陽性的患者提示療效較差，可能從原方案的后續(xù)化療中獲益機(jī)會(huì)不大，腫瘤細(xì)胞可能存在繼發(fā)或原發(fā)耐藥，需要重新制訂治療計(jì)劃以充分獲益。

臨床證實(shí)，依據(jù)以往的NSCLC TNM分期制訂的治療方案已經(jīng)不能滿足治療需要運(yùn)用分子生物學(xué)的方法發(fā)現(xiàn)早期肺癌微轉(zhuǎn)移，有助于更準(zhǔn)確地進(jìn)行TNM分期，對(duì)指導(dǎo)肺癌多學(xué)科綜合治療、監(jiān)測(cè)治療療效有重要的指導(dǎo)意義。［18］

6 LunX mRNA與NSCLC患者預(yù)后評(píng)價(jià)

莊翔等［10］提出，由于LunX基因在2001年才被發(fā)現(xiàn)，LunX的生物學(xué)行為尚不明確，目前缺乏長期隨訪的研究來證實(shí)其臨床價(jià)值。在短期的隨訪中，朱廣迎等［15］通過6～16個(gè)月隨訪LunX基因表達(dá)陽性組復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移率為52%，陰性組復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移率為18%（其缺乏統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能與病例數(shù)較少有關(guān)），提示LunX mRNA陽性表達(dá)與轉(zhuǎn)移有較為密切的關(guān)系。牛瑞等［19］對(duì)74例NSCLC患者進(jìn)行3年的隨訪觀察發(fā)現(xiàn)，年齡、營養(yǎng)指數(shù)、3年內(nèi)的復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移率與手術(shù)切除區(qū)域淋巴結(jié)LunX mRNA檢出率之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的相關(guān)性，可能為患者年齡的增高、機(jī)體營養(yǎng)狀況差而導(dǎo)致免疫狀況減低，腫瘤細(xì)胞容易形成遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移?；颊叩纳鏁r(shí)間與LunX mRNA的表達(dá)亦有相關(guān)性，對(duì)評(píng)估預(yù)后及個(gè)體化治療策略具有重要臨床意義，但存在淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移并非最終一定形成顯性轉(zhuǎn)移，還與癌細(xì)胞自身生物學(xué)特性、機(jī)體免疫狀況、局部微環(huán)境等多因素有關(guān)，提示微轉(zhuǎn)移的發(fā)生為多基因、多因素、多步驟綜合作用的結(jié)果。

7 結(jié)語

NSCLC的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多因素參與的復(fù)雜過程，LunX與NSCLC存在有密切關(guān)系，其機(jī)制尚不清楚，LunX有望成為早期診斷NSCLC的理想分子標(biāo)志物。目前，免疫組化技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于臨床，多是對(duì)癌組織、淋巴結(jié)等實(shí)體組織的檢測(cè)，患者必須經(jīng)過有創(chuàng)操作才能獲取標(biāo)本，甚至手術(shù)。反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)對(duì)標(biāo)本取材部位的要求較低，可以選擇外周血、骨髓、淋巴結(jié)、癌組織等多種組織為標(biāo)本，但因該技術(shù)假陰性或假陽性的發(fā)生率較高，限制了其在臨床診斷性檢驗(yàn)的推廣。故能夠發(fā)明一種取材方便、操作簡易、檢測(cè)快捷準(zhǔn)確、廉價(jià)的新型技術(shù)將成為腫瘤研究的新方向。然而，探究LunX與NSCLC預(yù)后的關(guān)系具有著重大意義。當(dāng)前與NSCLC相關(guān)的分子標(biāo)志物的研究各家報(bào)道不一，LunX能否成為NSCLC的一個(gè)獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo)還值得繼續(xù)研究，有待更多循證醫(yī)學(xué)證據(jù)支持。

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