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        獨(dú)一味環(huán)烯醚萜苷外用止血作用研究

        2011-12-08 03:08:16張泉龍邱建國(guó)李茂星尉麗力何希瑞賈正平
        醫(yī)藥導(dǎo)報(bào) 2011年7期
        關(guān)鍵詞:水提物云南白藥創(chuàng)口

        張泉龍,邱建國(guó),李茂星,尉麗力,何希瑞,賈正平

        (蘭州軍區(qū)總醫(yī)院藥材科,全軍高原環(huán)境損傷防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,蘭州 730050)

        藏藥獨(dú)一味[Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo]為唇形科獨(dú)一味屬植物[1],其具有活血鎮(zhèn)痛、化瘀止血之功效,用于治療各種外科手術(shù)后的刀口疼痛、出血,外傷骨折,筋骨扭傷,風(fēng)濕痹痛以及崩漏、痛經(jīng)、牙齦腫痛、出血等[2-4]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究顯示,獨(dú)一味具有止血、鎮(zhèn)痛、抗炎、促進(jìn)傷口愈合以及保護(hù)神經(jīng)元的作用[5-7],并且發(fā)現(xiàn)獨(dú)一味總環(huán)烯醚萜苷為其止血作用有效部位[8]。目前獲得國(guó)家藥品批準(zhǔn)文號(hào)的獨(dú)一味制劑劑型有片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、分散片、咀嚼片、滴丸劑等口服劑型,獨(dú)一味的外用制劑很少,但臨床已有將獨(dú)一味膠囊外用于治療鼻出血,拔牙后出血的應(yīng)用報(bào)道,且止血療效顯著[9-10]。筆者在本課題組前期研究的基礎(chǔ)上,將獨(dú)一味水提物及其有效部位總環(huán)烯醚萜苷制成外用散劑,考察其外用止血效果,為新型止血藥物的研制提供藥效學(xué)依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 試藥 獨(dú)一味水提物購(gòu)自甘肅省瑪曲縣黃河首曲藥源開(kāi)發(fā)有限公司;獨(dú)一味總環(huán)烯醚萜苷由本實(shí)驗(yàn)室制備,純度>56%;云南白藥(云南白藥集團(tuán)股份有限公司,批號(hào):20040320);淀粉。

        1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠80只,雄性,體質(zhì)量20~25 g,購(gòu)自甘肅省生物制品研究所;健康SD大鼠30只,雄性,體質(zhì)量200~250 g,單籠飼養(yǎng),自由飲水進(jìn)食,由蘭州大學(xué)動(dòng)物中心提供,動(dòng)物合格證號(hào):SCXK(甘)2009-0004。新西蘭大耳白兔,雌雄各半,由蘭州生物制品所提供,動(dòng)物合格證號(hào):SCXK(甘)2009-0012。

        1.2 實(shí)驗(yàn)方法

        1.2.1 小鼠斷尾出血模型 參考文獻(xiàn)[11]的方法。將昆明種小鼠隨機(jī)分為4組,即淀粉組、獨(dú)一味水提物組、總環(huán)烯醚萜苷組、云南白藥組,每組20只。禁食12~16 h后,將小鼠置于固定器中,使其尾部垂直,在距尾尖1 cm處剪斷,待有血流出時(shí),將尾巴插入受試藥散中浸沒(méi)30 s,然后每隔10 s用濾紙輕輕吸去血滴1次,至血液自然停止(濾紙吸時(shí)無(wú)血),計(jì)算從剪斷尾巴至止血的時(shí)間。若出血量多,可以稱(chēng)濾紙的質(zhì)量以計(jì)算出血量。

        1.2.2 兔腹主動(dòng)脈、耳中動(dòng)脈出血模型 參考文獻(xiàn)[12]的方法。將新西蘭大耳白兔隨機(jī)分為4組,即淀粉組、獨(dú)一味水提物組、總環(huán)烯醚萜苷組、云南白藥組,每組8只。將已禁食24 h的動(dòng)物用3%戊巴比妥鈉0.9%氯化鈉溶液9 mL耳緣靜脈麻醉,固定,手術(shù)暴露腹主動(dòng)脈,眼科剪于腹主動(dòng)脈縱向剪開(kāi)創(chuàng)口約2 mm。將藥物粉末0.5 g均勻涂灑在創(chuàng)口表面及四周,上鋪一層紗布5 cm×10 cm,將砝碼200 g外包薄塑料膜壓于創(chuàng)口之上,2 min后移除砝碼,觀察是否止血,若未止血?jiǎng)t繼續(xù)以砝碼壓住創(chuàng)面,直到止血為止,記錄止血時(shí)間。將已禁食24 h的動(dòng)物麻醉后,固定于兔固定架上,固定耳朵并暴露耳中動(dòng)脈,手術(shù)刀割開(kāi)約2 mm長(zhǎng)創(chuàng)口,將藥物粉末0.5 g均勻涂灑在創(chuàng)口表面及四周,上輔一層紗布5 cm×10 cm,將砝碼200 g外包薄塑料膜壓于創(chuàng)口之上,2 min后移除砝碼,觀察是否止血,若未止血?jiǎng)t繼續(xù)以砝碼壓住創(chuàng)面,直到止血為止,記錄止血時(shí)間。

        1.2.3 大鼠肝損傷模型 參考文獻(xiàn)[12]的方法。SD大鼠28只,隨機(jī)分為淀粉組、獨(dú)一味水提物組、總環(huán)烯醚萜苷組、云南白藥組,每組7只。大鼠腹腔注射戊巴比妥鈉40mg·kg-1,麻醉后仰面固定于手術(shù)臺(tái)上。腹部去毛,用酒精棉球消毒。沿腹中線(xiàn)打開(kāi)腹腔,取出肝左下葉,用10號(hào)手術(shù)刀造創(chuàng)面0.8 cm×0.2 cm,擦去血液,立即將藥物0.05 g撒于創(chuàng)口,不進(jìn)行任何處理,觀察10 min,以不再滲血為“止血”,記錄止血時(shí)間。

        2 結(jié)果

        2.1 小鼠斷尾出血時(shí)間 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,獨(dú)一味總環(huán)烯醚萜苷組停止出血時(shí)間為(64.8±25.0)s,獨(dú)一味水提物組為(97.2±44.0)s,云南白藥組為(105.1±65.0)s,淀粉對(duì)照組為(124.8±43.2)s。獨(dú)一味總環(huán)烯醚萜能明顯縮短小鼠斷尾出血時(shí)間,與淀粉對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),獨(dú)一味水提物組和云南白藥組與淀粉對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0.05)。

        2.2 兔腹主動(dòng)脈和耳中動(dòng)脈出血時(shí)間 兔腹主動(dòng)脈和耳中動(dòng)脈切口模型用4種不同方法處理后,止血時(shí)間結(jié)果見(jiàn)表1。獨(dú)一味總環(huán)烯醚萜苷在大動(dòng)脈、大量出血時(shí)的止血作用更好。

        表1 4組兔腹主動(dòng)脈和耳中動(dòng)脈創(chuàng)傷止血實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab.1 The hemostatic effects on the trauma of rabbit abdom inal aorta and ears artery in 4 groups ±s

        表1 4組兔腹主動(dòng)脈和耳中動(dòng)脈創(chuàng)傷止血實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab.1 The hemostatic effects on the trauma of rabbit abdom inal aorta and ears artery in 4 groups ±s

        與淀粉對(duì)照組比較,*1 P<0.01;與云南白藥組比較,*2 P<0.01,*3 P <0.05Compared with starch group,*1 P < 0.01;Compared with yunnan baiyao powder group,*2 P <0.01,*3 P <0.05

        組別 兔/只兔腹主動(dòng)脈創(chuàng)傷止血時(shí)間/min兔耳中動(dòng)脈創(chuàng)傷止血時(shí)間/s獨(dú)一味水提取物組 8 5.7±3.9*1*2 159.9±48.7*1獨(dú)一位總環(huán)烯醚萜苷組 8 3.2±1.9*1*3 110.0±37.1*1*2云南白藥組 8 8.9±4.7*1 185.6±57.3*1淀粉對(duì)照組8 20.3±6.5 378.2±60.3

        2.3 大鼠肝臟損傷出血時(shí)間 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,總環(huán)烯醚萜苷組平均止血時(shí)間為(93.8±39.5)s,獨(dú)一味水提物組為(101.1±25.9)s,云南白藥組為(74.0±26.3)s,淀粉對(duì)照組為(152.8±47.1)s。肝組織止血實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,獨(dú)一味總環(huán)烯醚萜苷、云南白藥和獨(dú)一味水提物對(duì)肝臟的止血時(shí)間均明顯縮短,與淀粉對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。云南白藥的平均止血時(shí)間明顯短于獨(dú)一味總環(huán)烯醚萜苷。

        3 討論

        獨(dú)一味為藏區(qū)重要的止血、鎮(zhèn)痛良藥,目前將其開(kāi)發(fā)成片劑、膠囊等劑型應(yīng)用廣泛。其主要含包括黃酮類(lèi)、環(huán)烯醚萜類(lèi)、苯乙醇苷類(lèi)、揮發(fā)油及其他類(lèi)[13]。獨(dú)一味水提物及其有效部位總環(huán)烯醚萜苷顯示出很好的止血作用,能夠提高血漿纖維蛋白原含量[8]。據(jù)其他研究結(jié)果顯示,獨(dú)一味還具有促進(jìn)傷口愈合、鎮(zhèn)痛抗炎的作用,因此具有很好的開(kāi)發(fā)價(jià)值。

        研究結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,外用獨(dú)一味總環(huán)烯醚萜苷或水提物,無(wú)論是對(duì)小鼠斷尾、兔耳中動(dòng)脈、腹主動(dòng)脈,還是對(duì)肝組織出血都能明顯縮短出血時(shí)間,但總環(huán)烯醚萜苷組優(yōu)于水提物。由于云南白藥組出血時(shí)間明顯長(zhǎng)于兩個(gè)給藥組,故止血作用很可能是由于獨(dú)一味的成分,而不是粉劑本身。在使用中發(fā)現(xiàn),獨(dú)一味總環(huán)烯醚萜苷具有很強(qiáng)的吸水性,可促進(jìn)血液凝固,且吸水后呈糊狀,黏附性增強(qiáng),能很好黏附在傷口,從而達(dá)到止血目的。但作為外用制劑,其止血機(jī)制是否還與提高血小板聚集率、收縮血管有關(guān)有待進(jìn)一步研究。

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