亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        枇杷葉中齊墩果酸的提取工藝

        2011-12-05 09:14:54樊愛萍劉衛(wèi)閔勇李四麗
        食品研究與開發(fā) 2011年4期

        樊愛萍,劉衛(wèi),閔勇,李四麗

        (紅河學(xué)院理學(xué)院化學(xué)系,云南 蒙自 661100)

        枇杷葉中齊墩果酸的提取工藝

        樊愛萍,劉衛(wèi)*,閔勇,李四麗

        (紅河學(xué)院理學(xué)院化學(xué)系,云南 蒙自 661100)

        以微波法進(jìn)行提取,采用最優(yōu)的薄層分離-比色顯色法測定齊墩果酸含量,確定出微波提取的最佳工藝為:乙醇濃度95%、提取功率為630 W、微波時間為70 s、料液比為1:20(g/mL)。微波法與傳統(tǒng)的熱回流法、冷浸取法進(jìn)行比較,得出微波法的提取率為84.8%,熱回流法的提取率為64.1%,冷浸法的提取率為61.3%,即微波法提取率明顯高于其他2種方法,且結(jié)果顯示微波法提取齊墩果酸有效可行。

        枇杷葉;齊墩果酸;微波;提取

        枇杷葉為薔薇科植物枇杷Eriobotryajaponica(Thunb Lindl)的干燥葉,現(xiàn)代藥學(xué)測驗,枇杷葉含有皂苷、苦杏仁苷、烏索酸、齊墩果酸、鞣質(zhì)、VB1、VC等化學(xué)成分[1-2],其中齊墩果酸是一種重要的成分,由于其廣泛的生物學(xué)活性,它具有非常高的藥用價值,如抗腫瘤、保肝作用和降血脂、血糖及抗艾滋病等作用外[1],還具有抗炎、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、抑制血小板聚集和抗氧化等多種藥理作用[3]。由于齊墩果酸結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜,人工合成較困難,從天然產(chǎn)物中提取齊墩果酸是獲得齊墩果酸的主要途徑。從天然產(chǎn)物中提取的齊墩果酸對動物無明顯的毒、副作用,現(xiàn)在歐美國家現(xiàn)以將其加工成保健食品,或者作為天然抗氧化劑應(yīng)用到食品中[4],齊墩果酸具有很大的開發(fā)前景。

        目前大部分研究人員對齊墩果酸的提取大都采用傳統(tǒng)熱回流法、索氏提取法、冷浸提取法[5]等方法,而用微波法進(jìn)行提取的研究鮮見報道。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 原料

        枇杷葉:采自云南蒙自枇杷基地。

        1.1.2 主要實驗儀器設(shè)備和藥品

        微波爐:德國進(jìn)口,SMC;離心機:常州國華電器有限公司;7200型分光光度計:尤尼柯-上海儀器有限公司;TU-1901雙光束紫外可見分光光度計;電熱干燥箱:9030(A)101(A)-0(S)南京沃環(huán);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:RE-52上海比朗;薄層G板;齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)品:上海融禾醫(yī)藥科技有限公司;香草醛;冰醋酸;高氯酸;乙醇;濃硫酸;硅膠層析粉;氯仿;丙酮等。

        1.2 方法

        1.2.1 齊墩果酸測定方法研究

        薄層分離-比色顯色:取1mL供試樣,標(biāo)準(zhǔn)液1mL,分別點于同一硅膠板上,以氯仿-丙酮(4:1)為展開劑展開,取出,揮去溶劑,在對照品部位噴以10%硫酸乙醇溶液,于105℃烘箱中烘7 min~8 min至顯示紫紅色,刮取與對照品相同位置以及等面積的斑點置于離心試管中,同時刮取等面積空白硅膠作為試劑空白。先精確加入新制的5%的香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL,振搖溶解后加入高氯酸0.8 mL,用封口膠封閉,搖勻后置于70℃水浴中加熱15 min,然后流水冷卻,再加乙酸乙酯4 mL,搖勻,離心取上層清液在最大吸收波長處測定。

        1.2.2 完全提取實驗

        準(zhǔn)確稱量1.0000 g枇杷葉粉末于錐形瓶中,按料液比為1:20(g/mL),以95%乙醇在630 W功率下提取3次,再按1:10料液比95%乙醇提取2次,每次提取70 s,合并提取液,定容于100 mL容量瓶中,用薄層分離-比色顯色法測定吸光度。并根據(jù)以下公式計算提取率:

        2 結(jié)果與分析

        2.1 Rf值的確定結(jié)果

        經(jīng)過實驗,用氯仿-丙酮(4:1)展開劑展開后,確定出齊墩果酸的比移值為 0.926、0.933、0.933、0.900,取其平均值為0.930,0.900值偏低的原因可能是點樣不均勻以及展開劑比例不夠精確引起的,故在以后試驗過程中取樣時按比移值0.930進(jìn)行取樣測定。

        2.2 最大吸收波長的確定結(jié)果

        紫外分光光度計掃描齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液結(jié)果,如表1所示。

        表1 紫外分光光度計掃描結(jié)果Table 1 Ultraviolet spectrophotometer scanning results

        由所測吸光度值可知,在波長為538 nm時吸光度值最大,故選擇538 nm為檢測波長。

        2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

        以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),吸光度值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,經(jīng)計算得回歸方程為:A=0.1511C-0.17673,r=0.99638, 在 4 μg/mL~20 μg/mL 范圍內(nèi),線性關(guān)系良好,結(jié)果見圖1。

        圖1 齊墩果酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Oleanolic acid standard curve

        2.4 測定方法的研究

        有文獻(xiàn)報道[6]采用比色法測定木瓜中的齊墩果酸含量,但通過實驗,所得枇杷葉提取液顏色呈深綠色,即枇杷葉中的色素也大量溶出,對其溶液直接進(jìn)行顯色測定,使其測定結(jié)果偏高很多,所以直接用比色法測定并不適用于枇杷葉中齊墩果酸含量的測定。另外,有文獻(xiàn)報道[7]采用薄層分離-分光光度法測定威靈仙的齊墩果酸含量,但通過將枇杷葉提取液用薄層分離后,在比移值范圍內(nèi)取樣、洗脫,在洗脫過程中易造成洗脫不完全,增大測定誤差,使測定結(jié)果偏低,另外用洗脫劑洗脫一方面增加成本,另一方面也使工序更為復(fù)雜,增加測定以及計算難度。

        實驗結(jié)果表明,采用薄層分離-比色顯色法能消除枇杷葉提取液中色素等雜質(zhì)的干擾,且跑版后,不需洗脫劑洗脫,而直接取樣顯色,一方面簡化操作、節(jié)省時間、降低成本,另一方面可減小操作誤差,提高齊墩果酸的顯色靈敏度,使測定結(jié)果更準(zhǔn)確、可靠。故本實驗選取該法為測定方法。

        2.5 微波提取的單因素實驗

        2.5.1 乙醇濃度對枇杷葉中齊墩果酸的影響

        采用75%、80%、85%、90%、95%不同濃度的乙醇-水溶液為提取劑提取齊墩果酸,測定提取液的吸光度值,結(jié)果見圖2。

        圖2 乙醇濃度對提取率的影響Fig.2 Effects of ethyl alcohol density on extraction rate

        圖2表明,齊墩果酸的吸光度值隨乙醇濃度的增大而逐漸增大,但隨著乙醇濃度的增加,色素等雜質(zhì)的溶出也越多,對測定造成很大干擾,且隨著溶劑濃度的增加,其成本會隨之增加。由圖2可知在85%~95%乙醇濃度時,吸光度值趨于平緩,故從提取率及成本考慮,選取85%、90%、95%作為正交試驗濃度因素的3個水平。

        2.5.2 提取功率對枇杷葉中齊墩果酸的影響

        采用 350、420、490、560、630 W 不同微波功率提取齊墩果酸,測定提取液在的吸光度值,結(jié)果見圖3。

        圖3 微波功率對提取率的影響Fig.3 Effects of microwave power on extraction rate

        圖3表明,微波功率過低(320 W),齊墩果酸的提取會不完全,而微波功率過高(>560 W)時,使乙醇沸騰,使提取劑的量減少,且對齊墩果酸的結(jié)構(gòu)造成破壞,所以當(dāng)功率達(dá)560 W后,增加功率會使齊墩果酸的提取率下降。所以本試驗選取490、560、630 W作為正交試驗的微波功率因素的3個水平。

        2.5.3 提取時間對枇杷葉中齊墩果酸的影響

        采用 50、60、70、80、90 s不同提取時間提取齊墩果酸,測定提取液的吸光度值,結(jié)果見圖4。

        圖4 微波輻射時間對提取率的影響Fig.4 Effects of microwave irradiation time on extraction rate

        由圖4可以看出,吸光度值隨提取時間的增大而增大,在80 s時吸光度值達(dá)最大,之后隨提取時間的增加吸光度值反而降低,這可能是因為隨著時間的延長,微波提取溫度會隨之增加,長時間受熱會造成齊墩果酸分解,故本實驗選取70、80、90 s作為正交試驗的提取時間因素的3個水平。

        2.5.4 料液比對枇杷葉中齊墩果酸的影響

        采用 1:10、1:15、1:20、1:25、1:30(g/mL)不同料液比提取齊墩果酸,測定提取液在的吸光度值,結(jié)果見圖5。

        圖5 微波處理液料比對提取率的影響Fig.5 Effects of microwave dealing solvent to material on extraction rate

        由圖5得知,當(dāng)料液比低于1:10時枇杷葉粉末不能被完全浸泡,達(dá)不到提取效果,當(dāng)在1:20時吸光度值達(dá)到最大,隨著料液比的增加,吸光度值下降,可能是因為較高的料液比使得微波在一定能量下加熱更多的溶液,達(dá)不到提取溫度,所需時間延長,吸光度值下降,所以本實驗選取 1:15、1:20、1:25 作為正交試驗的料液比因素的3個水平。

        2.6 正交試驗設(shè)計優(yōu)選微波提取工藝

        通過單因素試驗,考察乙醇濃度、提取功率、提取時間、乙醇用量4個因素,按L9(34)安排正交試驗,見表 2、3。

        表2 正交試驗因素水平表Table 2 Orthogonal design of separation

        表3 正交試驗結(jié)果Table 3 Orthogonal design and results of separation

        從表3中方差結(jié)果分析可以得出,4個單因素對齊墩果酸的影響大小順序為乙醇濃度>料液比>提取時間>提取功率,且枇杷葉中提取齊墩果酸的最佳提取條件為A3B3C1D2,即乙醇濃度為95%,提取功率為630 W,提取時間為 70 s,料液比為 1:20。

        2.7 提取方法的比較

        經(jīng)過實驗得到熱回流以及冷浸取中1 g枇杷葉提取得到的齊墩果酸的吸光度值,以及與微波法比較的結(jié)果見表4。

        表4 對比實驗結(jié)果Table 4 The result of comparative experiments

        從3種提取方法的比較結(jié)果得出,在提取時間、料液比及提取率上微波法明顯優(yōu)于其他2種方法。微波能有效節(jié)約提取時間以及很好的控制提取溫度,保護(hù)活性物質(zhì)的功能成分不被破壞,所以本實驗采用微波進(jìn)行提取,并通過單因素試驗以及正交試驗設(shè)計優(yōu)選出最佳提取工藝條件。

        2.8 完全提取結(jié)果

        經(jīng)過5次提取后,枇杷葉中的齊墩果酸幾乎被完全提取,由公式(1)計算得到枇杷葉中齊墩果酸的含量為 901.208 μg/g。

        3 結(jié)論

        通過對齊墩果酸測定方法研究以及微波提取單因素試驗和正交優(yōu)選微波提取工藝的試驗,得出以下結(jié)論:

        1)經(jīng)過3種測定方法的研究比較得出,薄層分離-比色顯色法應(yīng)用于測定枇杷葉中的齊墩果酸,結(jié)果更可靠、更有針對性。

        2)由單因素試驗以及正交試驗設(shè)計優(yōu)化得出微波提取枇杷葉中齊墩果酸的最佳工藝路線為:乙醇濃度95%、提取功率為630 W、微波時間為70 s、料液比為1:20。

        3)經(jīng)實驗得出微波法的提取率為84.8%,熱回流法的提取率為64.1%,冷浸法的提取率為61.3%,且從3種提取方法的條件比較得知,微波法在提取時間、料液比上微波法明顯優(yōu)于其他兩種方法,能更大程度的節(jié)約時間,降低能耗以及成本,更適用于工業(yè)化生產(chǎn)工藝。

        4)經(jīng)過實驗得出蒙自枇杷葉中齊墩果酸的含量為901.208 μg/g。

        [1]林玉霖,林文津,林力強.枇杷葉的研究現(xiàn)狀與開發(fā)前景[J].中藥材,2006,29(10):1111-1114

        [2]國家醫(yī)藥管理局中草藥情報中心站.植物藥有效成分手冊[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1986:800

        [3]湯華成,張東杰,趙蕾.功能性食品因子齊墩果酸研究進(jìn)展[J].食品科技,2007(9):16-18

        [4]Pan X J,Niu G G,Liu H Z.Comparison of microwave assisted extraction and conventional extraction techniques for the extraction ofanshinones from Salviae miltiorrhize bunge[J].Biochem Eng J,2002(12):71277

        [5]唐麗琴,劉圣,李矗,等.高效液相色譜法測定枇杷葉提取物中齊墩果酸與熊果酸的含量[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2004,24(12):726-726

        [6]董海麗,縱偉.薄層分離-分光光度法測定木瓜中的齊墩果酸[J].安徽農(nóng)業(yè)通報,2007(15):26-28

        [7]熊慧林,鄭茂鑫.薄層掃描法測定威靈仙中齊墩果酸的含量[J].中國中藥雜志,2007,32(2):357-359

        Study on Extraction of Oleanolic Acid from Eriobotrya Japonica

        FAN Ai-ping,LIU Wei*,MIN Yong,LI Si-li
        (School of Science Honghe University,Mengzi 661100,Yunnan,China)

        Microwave extraction method,using the best thin-layer separation-Colorimetric Determination of Color oleanolic acid content,identify the optimum microwave extraction as follows:95%ethanol concentration,extraction power of 630 W,microwave time 70 s,solid-liquid ratio of 1:20.Microwave method and conventional thermal reflux method,the cold soak comparison emulated obtained by microwave method of extraction rate of 84.8%,heat reflux extraction rate was 64.1%,the cold soak method of extraction rate was 61.3%,or microwave extraction was significantly higher than the other two methods,and the results showed that microwave extraction of oleanolic acid to be effective.

        eriobotrya japonica(Thumb.)Lindl;oleanolic acid;microwave;extraction

        紅河學(xué)院碩士專項基金(XSS07011)

        樊愛萍(1977—),女(漢),講師,碩士,主要從事天然產(chǎn)物開發(fā)研究。

        *通信作者:劉衛(wèi),教授,主要從事有機化學(xué)及天然產(chǎn)物研究。

        2010-08-09

        国产精品女同一区二区久| 三级在线看中文字幕完整版| 精品丝袜人妻久久久久久| 红杏性无码免费专区| 开心五月激情五月天天五月五月天 | 免费的黄网站精品久久| 成人一区二区人妻少妇| 国产又爽又黄又刺激的视频| 日韩AV不卡一区二区三区无码| 视频一区视频二区亚洲免费观看| 国产精品日韩av一区二区| 成人做受黄大片| 又爽又黄禁片视频1000免费| 国产 在线播放无码不卡| 国产片在线一区二区三区| 国产精品三级av及在线观看| а中文在线天堂| 亚洲福利第一页在线观看| 久久精品国产亚洲av成人文字| 中文无码一区二区不卡av| 在线亚洲综合| 国产精品美女自在线观看| 最新欧美精品一区二区三区| 真实单亲乱l仑对白视频| 国产未成女年一区二区| 国产91在线播放九色快色| 人妻 偷拍 无码 中文字幕| 中文字幕无码精品亚洲资源网久久| 久久精品国产亚洲AV高清wy| 开心久久婷婷综合中文字幕| 国产亚洲日韩在线一区二区三区| 2021国产精品视频| 饥渴少妇一区二区三区| 秋霞在线视频| 人人妻人人澡av天堂香蕉| 国产大陆av一区二区三区| 男女边摸边吃奶边做视频韩国| 中文字幕一区二区三区人妻少妇 | 极品人妻少妇一区二区| 男女交射视频免费观看网站| 国产精品爽黄69天堂a|