李孝文，董 偉，陳小軍，，許朝愛，孫志良，2

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，湖南 長沙410128；2.湖南省獸藥工程技術(shù)研究中心，湖南 長沙410311；3.湖南五指峰生化有限公司，湖南 瀏陽411216）

近年來，國內(nèi)外獸藥工作者開展多方向的新制劑的研究與實踐，其中長效制劑可明顯減少用藥次數(shù)和劑量，有效降低藥物毒副作用的優(yōu)勢是當(dāng)前研究一個熱點［1－2］。環(huán)丙沙星具有脂溶性高、抗菌后效應(yīng)長等多種優(yōu)點被廣泛應(yīng)用于獸醫(yī)臨床［3］。鑒于環(huán)丙沙星半衰期較短的不足［4］，課題組研制了復(fù)方環(huán)丙沙星長效乳劑，為充分發(fā)揮環(huán)丙沙星的藥理作用及獸用長效制劑方面提供試驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 乳酸環(huán)丙沙星（98.3%）、乳酸甲氧芐啶（99.1%），7#白油，Span－80，Tween－80，硬脂酸鋁，營養(yǎng)瓊脂，5%復(fù)方環(huán)丙沙星注射液（實驗室自制）；膠體磨，超凈工作臺，冷凍離心機(jī)，光學(xué)顯微鏡；大腸埃希菌（C83901）、巴氏桿菌（Kober－6）、沙門菌（C77－31）、金黃色葡萄球菌（C56023）、鏈球菌（C55138），均購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

1.2 復(fù)方環(huán)丙沙星乳劑的制備［5－6］采用單因素法篩選水相和油相中表面活性劑及其他輔料的配比，同時確定二者的比例。使油相∶水相（O∶W）容量按1∶1、2∶1、3∶1、3∶2四種方式進(jìn)行乳化：先緩速混合，在慢速攪拌油相的同進(jìn)，緩慢傾入水相混合，然后再通過高速運轉(zhuǎn)的膠體磨充分乳化。

1.3 乳劑性狀的檢測 觀察每個批次復(fù)方環(huán)丙沙星乳劑的顏色和性狀，測定pH值，顯微鏡觀察乳劑顆粒并拍照，用Nikon編輯軟件測定乳劑顆粒直徑大小。37℃貯存10d加速老化法和3 000r／min離心15min加速分層法，考察是否破乳；以內(nèi)口直徑為1.2mm的吸管，25℃條件下吸滿1mL垂直放出0.4mL計時考察黏度，t≤5s為合格。

1.4 體外抑菌試驗［7－8］采用試管二倍稀釋法和平皿菌落計數(shù)法測定乳劑和注射液的MIC和MBC，重復(fù)3次，求平均值。所得試驗數(shù)據(jù)通過SAS 8.1進(jìn)行平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和組間方差分析，以P＜0.01為差異極顯著，P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 乳劑的性狀

2.1.1 物理性狀 復(fù)方環(huán)丙沙星乳劑為淡黃色油乳狀，其pH值為6.3～6.6。乳劑顆粒直徑平均大小7.6μm，符合獸用注射乳劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)［9］。

2.1.2 穩(wěn)定性及黏度結(jié)果 O∶W 按1∶1、2∶1、3∶1、3∶2四種容量比的復(fù)方環(huán)丙沙星乳劑穩(wěn)定性及黏度結(jié)果見表1，結(jié)果表明，O∶W按2∶1容量比的乳劑為最佳配比。

表1 4種復(fù)方環(huán)丙沙星乳劑的穩(wěn)定性及黏度結(jié)果

2.2 體外抑菌試驗結(jié)果 復(fù)方環(huán)丙沙星乳劑和注射液對5種不同細(xì)菌的MIC和MBC試驗結(jié)果。見表2和表3。

表2 復(fù)方環(huán)丙沙星乳劑和注射液對5種不同細(xì)菌的平均MIC值 （μg／mL）

表3 復(fù)方環(huán)丙沙星乳劑和注射液對5種不同細(xì)菌的平均MBC值 （μg／mL）

上述試驗數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計處理表明，復(fù)方環(huán)丙沙星乳劑對5種細(xì)菌的MIC和MBC均極顯著優(yōu)于復(fù)方環(huán)丙沙星注射液（P＜0.01）。

3 討論

3.1 本乳劑制作工藝是借鑒油乳劑滅活疫苗抗原緩釋技術(shù)與抗菌藥物乳劑制備技術(shù)相結(jié)合的制備方法，通過反復(fù)的試驗與摸索，篩選出了針對復(fù)方環(huán)丙沙星乳劑以O(shè)∶W為2∶1的配比方式。篩選O∶W為2∶1的配比方式可以將藥溶液的水相充分包裹達(dá)到油包水結(jié)構(gòu)，不僅能有效的保持乳劑的穩(wěn)定性和通針性，并且相對于O∶W為3∶1的方式還減少了白油的用量，降低了對機(jī)體的刺激。

3.2 復(fù)方環(huán)丙沙星乳劑和復(fù)方環(huán)丙沙星注射液對5種菌都表現(xiàn)了較強的體外抑菌效果。統(tǒng)計顯示：復(fù)方環(huán)丙沙星乳劑對5種細(xì)菌的MIC和MBC極顯著強于復(fù)方環(huán)丙沙星注射液（P＜0.01），說明復(fù)方環(huán)丙沙星通過劑型的改變其體外抑菌效果發(fā)生了顯著的提升?？咕幬镌谟桶膭┬蜖顟B(tài)下形成“藥物團(tuán)”，其表層脂溶性與細(xì)菌具有親和力易與細(xì)菌結(jié)合，隨而增強了對細(xì)菌的作用，顯著提升了抑菌能力，故此乳劑的抑菌效果強于注射液?？咕幬锉徊东@在油相形成的微結(jié)構(gòu)中，使藥物形成一個儲存而緩慢釋放的“抗菌藥物庫”，只要1次注射，就可達(dá)到連續(xù)釋放藥物的目的［6］，從而延長了藥物的半衰期，起到了長效作用。

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