李 育，趙靖霞，楊根金，董 昕，李 玲，蘇 笠,張 薇

(第二軍醫(yī)大學藥學院分析測試中心，上海 200433)

頂空氣相色譜法測定吡羅昔康原料藥有機溶劑殘留量

李 育，趙靖霞，楊根金，董 昕，李 玲，蘇 笠,張 薇

(第二軍醫(yī)大學藥學院分析測試中心，上海 200433)

目的建立吡羅昔康原料藥中有機溶劑殘留量的氣相色譜測定法。方法采用頂空氣相色譜，使用HP-INNOWAX毛細管色譜柱(30 m×0．32 mm×0．25 μm)；以高純氮氣為載氣，F(xiàn)ID為檢測器，測定吡羅昔康原料藥中甲醇、乙醇、甲苯及二甲苯4種有機溶劑的殘留量。結(jié)果4種有機溶劑均達到了完全分離，在所考察范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。結(jié)論該方法靈敏度、準確度均達到有機溶劑殘留量的檢測要求，適用于吡羅昔康原料藥中有機溶劑殘留的檢測。

頂空氣相色譜；吡羅昔康；有機溶劑殘留

吡羅昔康(piroxicam)，又名炎痛喜康，是一種非甾體類抗炎藥物，具有明顯的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎作用，為《中國藥典》1995年版[1]新增品種，用于治療類風濕性關(guān)節(jié)炎和急性肌肉骨骼疾患，包括腱鞘炎、肩周炎、扭傷各種勞損和腰痛[2,3]。由于該藥在合成過程中使用了甲醇、乙醇、甲苯和二甲苯等有機溶劑，其溶劑殘留量的檢測方法未見文獻報道。為控制產(chǎn)品質(zhì)量，本文采用頂空氣相色譜法同時測定上述4種有機溶劑的殘留量。研究結(jié)果表明方法簡便、靈敏、準確，是控制該藥中有機溶劑殘留的可靠方法。

1 儀器與試藥

Thermo Trace GC Ultra型氣相色譜儀，配置有FID檢測器、Triplus頂空進樣裝置和Xcalibur色譜處理軟件。甲醇、無水乙醇、甲苯、二甲苯均為分析純，DMA(N,N-二甲基甲酰胺)為Sigma-Aldrich公司色譜純，原料藥吡羅昔康由本研究組自制。

2 色譜條件及頂空條件

色譜柱為HP-INNOWAX毛細管色譜柱(30 m×0.32 mm× 0.25 μm)，進樣口溫度250 ℃，檢測器(FID)溫度250 ℃。柱溫為程序升溫， 40 ℃保持2 min，以2 ℃/min升至70 ℃，再以60 ℃/min升至180 ℃保持3 min。載氣為N2；流速為2 ml/min，分流比10:1。頂空瓶平衡溫度90 ℃，平衡時間30 min，進樣量2 ml。

3 溶液的配制

3.1對照品溶液 精密量取甲醇0.35 ml、乙醇0.6 ml、甲苯0.1 ml、二甲苯0.25 ml，置于100 ml容量瓶中混合，加DMA稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液。精密移取上述儲備溶液1 ml置于10 ml容量瓶中，用DMA稀釋至刻度，搖勻制成對照品溶液。

3.2供試品溶液 取吡羅昔康原料藥約1 g，精密稱定，置于10 ml容量瓶中，加DMA稀釋至刻度，搖勻即得供試品溶液。

4 方法與結(jié)果

4.1線性關(guān)系考察 分別精密量取對照品儲備液0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 ml，分別置于10 ml容量瓶中，加DMA稀釋至刻度，搖勻，配制成不同濃度系列混合對照品溶液。各取5.0 ml置頂空瓶中，自動進樣，以各溶液的濃度X (μg/ml)為橫坐標，測定的峰面積Y為縱坐標，進行線性回歸，結(jié)果見表1。

表1 4種溶劑回歸方程與線性范圍試驗結(jié)果

4.2精密度試驗 取對照品溶液按上述頂空氣相色譜條件，連續(xù)重復取樣6次，甲醇, 乙醇,甲苯和二甲苯溶劑峰面積的RSD(n=6)分別為4.32%, 5.41%, 4.94%, 5.56%。

4.3方法專屬性試驗 取對照品溶液按上述頂空氣相色譜條件測定，結(jié)果見圖1。在色譜圖中，甲醇、乙醇、甲苯、二甲苯分離度良好，DMA溶劑中的雜質(zhì)不干擾其它殘留溶劑的測定。

圖1對照品溶液色譜圖

1-甲醇，2-乙醇，3-甲苯，4、5、6、7-二甲苯(為鄰二甲苯、間二甲苯、對二甲苯和乙苯的混合物)，8- DMA

4.4最低檢測限試驗 取對照品溶液不同比例稀釋后按上述頂空氣相色譜條件測定，依據(jù)信噪比3:1測得甲醇、乙醇、甲苯、二甲苯最低檢測限分別為：2.77，4.73，0.87，2.15 μg/ml。

4.5回收率試驗 精密稱取吡羅昔康原料藥0．5 g，共3份，分別精密加入對照品儲備液1 ml，置10 ml量瓶中，加DMA溶解并稀釋至刻度，搖勻，按上述頂空氣相色譜條件測定，計算得甲醇, 乙醇, 甲苯, 二甲苯的回收率(n=3)分別100.7%,101.3%, 96.3%, 93.6%,RSD分別為0.43%, 1.31%, 0.99%, 0.17%。

4.6樣品測定 分別取批號為011225、020108、020124的供試品溶液, 按上述頂空氣相色譜條件測定(圖2)。結(jié)果顯示，3批樣品中均未檢出殘留溶劑。表明3批原料藥有機溶劑殘留量均符合中國藥典的規(guī)定。

圖2吡羅昔康原料藥色譜圖

5 討論

考察了DMF(N,N -二甲基甲酰胺)和DMA作2種基質(zhì)溶劑， DMF與二甲苯色譜峰有干擾， 而DMA和4種殘留溶劑分離度能達到要求，并且在響應的位置上沒有雜質(zhì)峰干擾，故選擇DMA作為溶劑。通過實驗選擇了對色譜峰的穩(wěn)定性，分離度，響應值最佳的頂空平衡溫度90 ℃及平衡時間30 min。

二甲苯為一混合溶劑，為鄰二甲苯、間二甲苯、對二甲苯和乙苯的混合物，在色譜圖中顯示4個色譜峰，與藥典描述相一致。

頂空氣相色譜法具有操作簡便，污染少，重現(xiàn)性良好[4]等優(yōu)點。筆者采用頂空氣相色譜法測定了4種殘留溶劑，科學驗證了本法本儀器在準確度，精密度，線性及范圍，專屬性，最低檢測限上均能達到藥典規(guī)定的要求。甲醇、乙醇、甲苯以及二甲苯等4種有機溶劑均為生產(chǎn)過程中引入的對人體有害的有機溶劑，本法的建立進一步地為吡羅昔康的質(zhì)量控制和安全使用提供了科學依據(jù)，具有十分重要的意義。

[1] 《中國藥典》2005年版.二部[S]. 2005: 247.

[2] 曹 玲，唐樹榮，萬 嶸. HPLC法測定吡羅昔康注射液的含量[J]. 藥物分析雜志，2001, 21(1): 47.

[3] 郭 萌，高愛軍. 吡羅昔康片中吡羅昔康的含量測定及含量均勻度檢查[J].中華實用中西醫(yī)雜志, 2007, 20(10): 919.

[4] 李英華,呂秀陽,呂麗麗,等. 頂空氣相色譜法在藥物分析中的應用[J]. 藥物分析雜志, 2005, 25(11): 1404.

2009-09-18

[修回日期] 2009-11-26

Determinationofresidualbyheadspacegaschromatographyorganicsolventsinpiroxicam

LI Yu, ZHAO Jing-xia, YANG Gen-jin，DONG Xin, LI Ling, SU Li，ZHANG Wei

(Center of Pharmaceutical Analysis, College of Pharmacy, Second Military Medical University, Shanghai 200433，China)

ObjectiveTo establish a headspace capillary gas chromatgraphy for determination the residual organic solvents in piroxicam.MethodsThe residual solvents in piroxicam which are methanol , ethanol, toluene and dimethybenzene were determined by headspace GC on HP-INNOWax column(30 m×0．32 mm×0．25 μm)，with FID detector，high purity nitrogen as the carry gas.ResultsFour residual organic solvents consisting of methanol, ethanol, toluene and dimethybenzene in piroxicam were completely separated and the samples coincided with the requirements.ConclusionThe method is sensitive and accurate. It is suitable to the determination of residual organic solvents in piroxicam.

headspace gas chromatgraphy；piroxicam；residual organic solvents

李 育(1984-)，女，學士.Tel：(021)81871337.

張 薇.Tel：(021)81871336，E-mail：smmuzhangwei@gmail.com.

R917

A

1006-0111(2011)01-0031-02