張大華 王波 姜世金* （山東省濰坊市寒亭區(qū)畜牧局 261100 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院 泰安）

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仔豬豬瘟免疫程序的探討

張大華①王波②姜世金②*（①山東省濰坊市寒亭區(qū)畜牧局 261100 ②山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院 泰安）

本文采用IDEXX公司阻斷ELISA實驗方法，在同一豬場相同的飼養(yǎng)條件下，對3種常用豬瘟免疫程序免疫后不同時間的豬瘟免疫抗體阻斷率進行了研究。結(jié)果表明：對仔豬進行超前免疫(0、60)的免疫效果比其他免疫程序的免疫效果好。不同疫苗免疫的仔豬豬瘟抗體檢測結(jié)果表明，仔豬平均抗體阻斷率差異極顯著(P＜0.01)，因而制定適宜的免疫程序，應(yīng)該根據(jù)豬瘟疫苗免疫效果而定。

豬瘟 免疫程序 阻斷ELISA 超前免疫

豬瘟(；也稱Hog cholera HC)是由豬瘟病毒(CSFV)引起的一種豬的急性、烈性傳染病[1,2]，被國際獸疫局(OIE)列為必須上報的傳染病。一直以來我國采用豬瘟疫苗免疫對豬瘟進行預(yù)防和控制，在降低豬瘟的感染率和發(fā)病率方面取得了很好的效果，但是近年來在實際生產(chǎn)中豬瘟仍時有發(fā)生，特別是仔豬的非典型豬瘟更為常見。除了豬瘟病毒本身的在免疫壓力下發(fā)生變異外[3], 豬瘟疫苗的實際免疫效果是很重要的一個因素[4]。因此對現(xiàn)有豬瘟免疫程序的研究與改進，是提高仔豬成活率的重要條件。目前，用于豬瘟疫苗免疫效果評估的方法很多，選擇科學(xué)合理的檢測方法是科學(xué)評估的首要問題。據(jù)臺灣有關(guān)報道，豬瘟抗體檢測在ELISA與中和抗體檢測間具有高度相關(guān)性。因而本研究采用阻斷ELISA試驗方法檢測不同豬瘟免疫程序?qū)ψ胸i的免疫效果，以確定最佳的免疫程序。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗用豬 選擇年齡、胎次、飼養(yǎng)狀況、環(huán)境條件相近的種母豬（母豬于配種前2個星期注射豬瘟活疫苗4頭份），所產(chǎn)仔豬用于免疫程序試驗，仔豬20日齡斷乳，在正常條件下飼養(yǎng)管理。

1.1.2 試驗疫苗 選用國內(nèi)某生物制品該生產(chǎn)的豬瘟活疫苗，每瓶50頭份。

1.1.3 試驗試劑 豬瘟病毒抗體檢測試劑盒(阻斷ELISA）由美國IDEXX公司生產(chǎn)。

1.2 試驗方法

1.2.1 三種免疫程序 選擇鄰近分娩的健康母豬9頭，隨機分成A、B、C 3個組，每組3頭母豬。免疫程序：A組3頭母豬所生仔豬乳前首免1頭份、35日齡二免2頭份和60日齡三免4頭份的免疫豬瘟疫苗；B組3頭母豬所生仔豬乳前首免1頭份、60日齡二免4頭份；C組3頭母豬所生仔豬35日齡首免2頭份、60日齡二免4頭份的免疫程序。試驗期間，弱仔豬、死豬及時淘汰。

1.2.2 采血及血清制備 9頭母豬于分娩當(dāng)天耳靜脈采血2~4ml。A、B 2組仔豬于免疫后每隔7d、C組每隔14d前腔靜脈采血2~3ml，直至仔豬77日齡。出欄前140d左右最后`次采血。將采集的血液注入已編號干燥無菌試管內(nèi)，靜置自然凝集析出血清，取血清注入離心管內(nèi)，-20℃冷凍待檢。

1.2.3 抗體檢測 按照IDEXX公司生產(chǎn)的豬瘟病毒抗體檢測試劑盒說明操作，對采集的血清進行抗體檢測。

2 結(jié)果

2.1 母豬豬瘟抗體阻斷率檢測結(jié)果

A、B和C 3組母豬豬瘟抗體阻斷率檢測結(jié)果見表1。

表1 A、B、C 3組母豬豬瘟抗體阻斷率檢測結(jié)果

2.2 仔豬豬瘟抗體平均阻斷率檢測結(jié)果

A組、B組、C組仔豬豬瘟抗體平均阻斷率檢測結(jié)果見表2。

表2 A組、B組、C組不同日齡仔豬豬瘟抗體平均阻斷率檢測結(jié)果

2.3 仔豬豬瘟抗體平均阻斷率比較結(jié)果

3組仔豬豬瘟抗體平均阻斷率比較結(jié)果見圖1。

圖1 A、B和C組仔豬豬瘟抗體平均阻斷率比較

3 分析與討論

由于豬瘟母源抗體的干擾，傳統(tǒng)的免疫程序(20、60日齡)已經(jīng)不適應(yīng)現(xiàn)在規(guī)模化豬場的免疫，尤其豬瘟流行區(qū)[5-7]，因而，本試驗設(shè)計3組免疫程序，分別是A組、B組和C組。A組仔豬超前免疫后，7日齡抗體平均阻斷率達到76%，35日齡時的抗體平均阻斷率為下降為56%；2次免疫后，56日齡時的抗體平均阻斷率持續(xù)下降；60日齡3次免疫后，140日齡的抗體平均阻斷率上升為54%。A組仔豬在35日齡實施2次免疫，免疫后抗體平均阻斷率都持續(xù)下降，沒有達到免疫效果，原因可能與35日齡仔豬抗體平均阻斷率較高而受到干擾所致。

B組仔豬超前免疫后，7日齡抗體平均阻斷率達到76%，56日齡時的抗體平均阻斷率下降為45%；60日齡2次免疫后，140日齡的抗體平均阻斷率上升為66%，效果明顯高于A組。B組仔豬超前免疫后至56日齡時的抗體平均阻斷率為45%，顯示仔豬超前免疫后，至多達到2個月的保護，這與何存利[6]等報道超前1次免疫后，應(yīng)在70日齡進行第2次免疫，才能確保育肥豬出欄相似。B組僅通過兩次免疫，仔豬平均抗體阻斷率比免疫3次的A組仔豬高，該免疫程序優(yōu)于A組。

C組仔豬采取推遲首免的做法，35日齡實施首免，首免后抗體平均阻斷率持續(xù)下降；60日齡2次免疫后，70日齡抗體平均阻斷率仍持續(xù)下降，至140日齡的抗體平均阻斷率僅為40%。仔豬在整個生長期內(nèi)抗體平均阻斷率都較低，免疫效果差于A組和B組。因此，在3種免疫程序中，B組免疫次數(shù)少，抗體水平高，免疫效果最好。

[1] 殷震, 劉景華. 動物病毒學(xué)[M]. 第2版. 北京: 科學(xué)出版社, 1997, 652～664.

[2] 朱善德, 余曉華, 盧黎明等. 兩種不同豬瘟疫苗免疫抗體消長規(guī)律研究試驗[J]. 上海畜牧獸醫(yī)通訊, 2008, (1): 50-51.

[3] 李紅衛(wèi), 涂大春, 金擴世等. 豬瘟病毒石門株與兔化弱毒株gp55基因的克隆與序列分析[J]. 病毒學(xué)報, 1998, 14(3): 257- 261.

[4] 蔡葵蒸, 張明林, 靳國琴等. 豬瘟流行區(qū)仔豬免疫程序的研究[J]. 中國獸醫(yī)科技, 2002, 32(4): 23-24.

[5] 何存利, 陳祝三, 謝琴等. 豬瘟乳前免疫及其抗體檢測[J]. 中國畜禽傳染病, 1998, 20(3): 143.

[6] 朱建國, 袁泉水. 集約化養(yǎng)豬場豬瘟免疫程序的研究[J]. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報, 1999, 1(21): 40-43.

[7] 李明義, 白志娟, 趙雪麗等. 豬瘟抗體消長規(guī)律動態(tài)研究[J]. 中國動物檢疫, 2004, 21(8): 24-26.

（2011–04–17）

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