謝 捷,劉小景,朱興一,葉海燕,王 平*
(浙江工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院,制藥工程省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,浙江 杭州 310014)
殼聚糖澄清甜葉菊水提液及其澄清機(jī)理探討
謝 捷,劉小景,朱興一,葉海燕,王 平*
(浙江工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院,制藥工程省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,浙江 杭州 310014)
研究殼聚糖絮凝劑在甜葉菊提取液澄清過(guò)程中的作用。分別以甜葉菊水提液的澄清率和甜菊苷的損失率為指標(biāo),考察不同因素對(duì)絮凝效果的影響。通過(guò)正交試驗(yàn)法確定殼聚糖絮凝的較優(yōu)工藝條件為:1%殼聚糖溶液投加量2mL/g甜葉菊干葉、甜葉菊提取液質(zhì)量濃度1g生藥/10mL提取液、pH6.0、溫度45℃,絮凝時(shí)間4h。在該條件下,甜葉菊水提液的澄清率為86.63%,甜菊苷的損失率為6.89%,與膜分離法澄清的效果相近,且無(wú)需特殊設(shè)備。與傳統(tǒng)化學(xué)絮凝法相比,殼聚糖絮凝法能更有效地保留水提液中的有效成分,具有絮凝效果好、易生物降解、對(duì)環(huán)境安全、無(wú)二次污染等優(yōu)點(diǎn)。
甜葉菊;甜菊苷;殼聚糖;絮凝;澄清
甜葉菊(Stevia rebaudianaBertoni)屬菊科多年生草本植物,原產(chǎn)于南美巴拉圭和巴西[1],我國(guó)于1976年引種成功,現(xiàn)已成為世界上最大的甜菊糖生產(chǎn)國(guó)和出口國(guó),主產(chǎn)區(qū)是黑龍江、山東、安徽、江蘇、江西等省市[2]。甜菊糖苷是從甜葉菊葉子中提取的九種四環(huán)二萜糖苷的混合物,占干葉質(zhì)量4%~20%,其主要成分是甜菊苷,其他低含量成分是:甜菊雙糖苷、萊鮑迪苷A、萊鮑迪苷B、萊鮑迪苷C、萊鮑迪苷D、萊鮑迪苷E、萊鮑迪苷F和杜爾可苷A[3-5]。甜菊糖苷具有高甜度、低熱量、易溶解、耐熱、穩(wěn)定、安全、無(wú)毒、非發(fā)酵性等特點(diǎn),其甜度為蔗糖的200~300倍,而熱量?jī)H為蔗糖的1/300,是一種可替代蔗糖的理想天然甜味劑,被譽(yù)為世界第3糖源,對(duì)高血壓、糖尿病、肥胖癥、心臟病、齲齒等病癥有一定的輔助療效,被廣泛應(yīng)用于飲料和食品行業(yè)[6-7]。
目前,甜菊糖苷的制備工藝主要包括水提、除雜、大孔吸附樹脂分離純化和離子交換樹脂脫色[8]。甜葉菊水提液呈深褐色,含有大量膠體顆粒、蛋白質(zhì)、色素和可溶性多糖等雜質(zhì)[9-10],必須在分離純化前對(duì)水提液進(jìn)行除雜預(yù)處理,以提高甜菊糖苷產(chǎn)品的質(zhì)量,并延長(zhǎng)樹脂使用壽命。傳統(tǒng)的化學(xué)絮凝法通常采用鐵鹽或鋁鹽等無(wú)機(jī)低分子作為絮凝劑,以石灰作為助凝劑,進(jìn)行酸堿中和反應(yīng),形成絮凝沉淀[11-12]。該法會(huì)給被處理液帶入大量無(wú)機(jī)離子,不利于人類健康。同時(shí),后續(xù)處理工藝復(fù)雜,甜菊糖苷的損失率也較大,約10%~20%[13]。殼聚糖作為一種新型的有機(jī)高分子絮凝劑,主要通過(guò)電性中和作用和大分子的架橋作用,除去提取液中較大的懸浮顆粒,具有原料來(lái)源廣泛、天然無(wú)毒、可生物降解、用量少、除雜效果好等特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于中藥藥液及制劑的澄清精制[14-15]。
本實(shí)驗(yàn)采用殼聚糖絮凝法澄清甜葉菊水提液,以甜葉菊水提液的澄清率和甜菊苷損失率為指標(biāo)對(duì)絮凝工藝進(jìn)行考察,并與傳統(tǒng)的化學(xué)絮凝劑澄清法進(jìn)行比較,為甜葉菊水提液的除雜預(yù)處理提供一定參考。
1.1 材料與試劑
安徽明光產(chǎn)甜葉菊,60℃烘干,粗粉碎至50目,干燥保存;殼聚糖 山東臨沂生物制品廠;甜菊苷對(duì)照品(純度>98%) 上海融禾醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司;甲醇(色譜純) 美國(guó)Fisher公司;庚烷磺酸鈉、氯化鐵、氧化鈣、冰醋酸、磷酸、氫氧化鈉、鹽酸(均為分析純)。
1.2 儀器與設(shè)備
Agilent-1100型高效液相色譜儀 美國(guó)安捷倫公司;HX-200高速中藥粉碎機(jī) 浙江省永康市溪岸五金藥具廠;HHS電熱恒溫水浴鍋 上海博迅實(shí)業(yè)有限公司;電子分析天平 上海棱譜儀器儀表有限公司;SP-752PC紫外-可見分光光度計(jì) 上海笛柏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;DELTA320 pH計(jì) 上海樹信儀器儀表有限公司;DHG-9240A鼓風(fēng)干燥箱 上海一恒科技有限公司;RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞萊生化儀器廠;SHB-AⅢ循環(huán)水式多用真空泵 河南太康科教器材廠。
1.3 方法
1.3.1 色譜條件
色譜柱:XTerra PR18柱(150mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相配比為甲醇-0.03%庚烷磺酸鈉緩沖液(磷酸調(diào)pH3.8)(75:25,V/V);流速:1.0mL/min;柱溫:30℃;進(jìn)樣量:10μL,檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm。
1.3.2 對(duì)照品溶液的制備
精密稱取對(duì)照品10mg,置10mL容量瓶中,用流動(dòng)相溶液溶解并稀釋至刻度,搖勻。經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾,制成1mg/mL的溶液,作為對(duì)照品溶液。
1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
精密吸取甜菊苷對(duì)照品溶液2、4、6、8、10、12、14、16μL注入高效液相色譜儀中,按上述色譜條件測(cè)定峰面積,以峰面積(A)為縱坐標(biāo),甜菊苷含量(C/μg)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程為A=407.39C-8.3851(R2=0.9998)。甜菊苷含量在1.86~14.88μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。
1.3.4 提取液的制備
取適量甜葉菊粗粉,按料液比1:10(g/mL)加水,70℃浸提1h,過(guò)濾后重復(fù)提取2次,合并濾液,將其體積減壓濃縮一半使提取液質(zhì)量濃度為1g生藥/10mL提取液,得深褐色液體,即為甜葉菊提取液。
1.3.5 殼聚糖溶液的制備
準(zhǔn)確稱取1.0g殼聚糖,用100mL 1%醋酸溶液溶解,得到1%殼聚糖醋酸溶液。為了防止殼聚糖在稀酸溶液中水解而影響澄清效果,殼聚糖充分溶脹后,需立即使用。
1.3.6 甜葉菊提取液的絮凝澄清
1.3.6.1 殼聚糖絮凝法
量取甜葉菊水提液100mL,加入殼聚糖溶液,攪拌5min,調(diào)節(jié)pH值至規(guī)定值,水浴靜置一定時(shí)間,減壓抽濾,濾液冷卻后定容至100mL,即為殼聚糖絮凝法處理后的樣品溶液。
1.3.6.2 化學(xué)絮凝法[16]
量取甜葉菊水提液100mL,加入絮凝劑和助凝劑,調(diào)節(jié)pH10.0,攪拌10min,置于65℃水浴中靜置40min,減壓抽濾,濾液冷卻后定容至100mL,即為化學(xué)絮凝法處理后的樣品溶液。
1.3.7 提取液澄清率的測(cè)定[9-10]
以蒸餾水做參比,測(cè)定甜葉菊提取液在670nm處的吸光度A0及樣品溶液在上述波長(zhǎng)處的吸光度A1,澄清率B(%)按下式計(jì)算:
1.3.8 甜菊苷損失率的測(cè)定
量取提取液和絮凝后的樣品溶液各1.0mL,置10mL容量瓶中,加蒸餾水稀釋至刻度,搖勻,HPLC法測(cè)定甜菊苷的含量,損失率P(%)按下式計(jì)算:
式中:P為損失率;C0、C1分別為提取液和樣品溶液中甜菊苷的含量。
1.3.9 單因素試驗(yàn)
分別以殼聚糖的投加量、提取液質(zhì)量濃度、提取液pH值、體系溫度及絮凝時(shí)間作單因素試驗(yàn),考察各單因素對(duì)絮凝效果的影響。
1.3.10 殼聚糖絮凝法工藝優(yōu)化正交試驗(yàn)
根據(jù)單因素試驗(yàn)的結(jié)果,選定殼聚糖投加量、提取液質(zhì)量濃度、提取液pH值和體系溫度4個(gè)因素進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn),以甜葉菊水提液的澄清率和甜菊苷損失率為指標(biāo),考察上述4個(gè)因素對(duì)澄清效果的綜合影響。試驗(yàn)因素水平見表1。
表1 殼聚糖絮凝法澄清甜葉菊水提液正交試驗(yàn)因素水平表Table 1 Factors and their coded levels in orthogonal array design
2.1 殼聚糖絮凝法單因素試驗(yàn)
2.1.1 殼聚糖投加量對(duì)澄清效果的影響
取甜葉菊水提液600mL,平均分成6份,分別按0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8mL/g(殼聚糖溶液體積/甜葉菊干葉質(zhì)量)的投加量加入殼聚糖溶液,調(diào)節(jié)pH6.0,攪拌5min,于45℃水浴中靜置4h后,減壓抽濾,測(cè)定提取液和樣品溶液的吸光度和甜菊苷含量,并計(jì)算澄清率和甜菊苷的損失率。結(jié)果如圖1所示。
圖1 殼聚糖投加量對(duì)澄清效果的影響Fig.1 Effect of chitosan dosage on clarification rate and stevioside loss rate
由圖1可知,隨殼聚糖投加量的增加,溶液的澄清率逐漸提高,但甜菊苷的損失率也不斷增加。當(dāng)殼聚糖投加量超過(guò)2.0mL/g時(shí),溶液的澄清率開始下降,繼續(xù)增加殼聚糖投加量至2.8mL/g時(shí),溶液的澄清率下降至45.08%,此時(shí),甜菊苷的損失率增加至14.08%。殼聚糖用量較少時(shí),不足以和膠體顆粒、蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)等雜質(zhì)分子發(fā)生吸附架橋和電中和作用,不能充分使雜質(zhì)絮凝沉淀;隨著殼聚糖加入量的增加,吸附架橋和電中和作用加強(qiáng),提高了溶液的澄清率,同時(shí),少量甜菊苷也被絮凝沉淀,使甜菊苷的損失率緩慢增加。加入過(guò)量的殼聚糖后,溶液的澄清率反而降低,這是因?yàn)檫^(guò)量的絮凝劑會(huì)使膠體顆粒表面發(fā)生二次吸附,使膠粒表面覆蓋一層絮凝劑分子,而使其產(chǎn)生再穩(wěn)定現(xiàn)象,溶液濁度升高,同時(shí),過(guò)量的絮凝劑會(huì)增加甜菊苷的絮凝損失。因此,綜合考慮提取液的澄清率和甜菊苷的損失率,選擇殼聚糖投加量以2.0mL/g為宜。
2.1.2 甜葉菊提取液質(zhì)量濃度對(duì)澄清效果的影響
取甜葉菊水提液600mL,平均分成6份,其中一份稀釋至1/12(甜葉菊提取液質(zhì)量濃度,g/mL),一份不變,其余4份則分別濃縮至1/8、1/6、1/4、1/2(g/mL)。按2.0mL/g的投加量分別加入殼聚糖溶液,調(diào)pH6.0,攪拌5min,于45℃水浴中放置4h,減壓抽濾,測(cè)定提取液和樣品溶液的吸光度和甜菊苷含量,并計(jì)算澄清率和甜菊苷損失率。結(jié)果如圖2所示。
圖2 甜葉菊提取液質(zhì)量濃度對(duì)澄清效果的影響Fig.2 Effect of concentration of water extract from Stevia rebaudiana Bertoni leaves on clarification rate and stevioside loss rate
由圖2可知,隨甜葉菊水提液質(zhì)量濃度的提高,澄清率變化不大,而甜菊苷的損失有明顯增加。提取液質(zhì)量濃度較高時(shí),甜菊苷易被所形成的沉淀吸附、包裹,當(dāng)提取液質(zhì)量濃度超過(guò)1/10(g/mL)時(shí),損失率增加明顯。因此,甜葉菊水提液質(zhì)量濃度以1/10(g/mL)為宜。
2.1.3 體系pH值對(duì)絮凝效果的影響
圖3 體系pH值對(duì)絮凝效果的影響Fig.3 Effect of flocculation pH on clarification rate and stevioside loss rate
取甜葉菊水提液600mL,平均分成6份,按2mL/g的投加量加入殼聚糖溶液,調(diào)pH值至3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0,攪拌5min,于45℃水浴中放置4h,減壓抽濾,測(cè)定提取液和樣品溶液的吸光度和甜菊苷含量,并計(jì)算澄清率和甜菊苷損失率。結(jié)果如圖3所示。
由圖3可知,當(dāng)提取液pH值小于6.0時(shí),澄清率隨pH值的增大而提高,甜菊苷的損失隨pH值的增大而減少。這是因?yàn)闅ぞ厶欠肿由嫌写罅康陌被?,在弱酸?pH6)條件下,氨基顯示陽(yáng)離子性質(zhì),與提取液中帶負(fù)電荷的膠體顆粒、鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)、色素結(jié)合而沉降。酸性越強(qiáng),殼聚糖氨基所帶的正電荷越多,絮凝能力越強(qiáng),另一方面,也會(huì)導(dǎo)致減弱甚至逆轉(zhuǎn)膠體顆粒、鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)、色素表面的負(fù)電性,使其與殼聚糖的結(jié)合能力減弱甚至相互排斥,因此,隨pH值從6.0下降至3.0,澄清率下降,并伴隨著甜菊苷損失的明顯增加。當(dāng)提取液pH值大于6.0時(shí),隨著pH值的增大,氨基顯示非離子性質(zhì),殼聚糖的電中和作用受到抑制,削弱了絮凝作用,故澄清率下降。因此,提取液pH6.0為宜。
2.1.4 體系溫度對(duì)絮凝效果的影響
取甜葉菊水提液600mL,平均分成6份,按2mL/g加入殼聚糖溶液,調(diào)pH6.0,攪拌5min,分別于25、35、45、55、65、75℃恒溫水浴中放置4h,減壓抽濾,測(cè)定提取液和樣品溶液的吸光度和甜菊苷含量,計(jì)算澄清率和損失率。結(jié)果如圖4所示。
圖4 體系溫度對(duì)澄清效果的影響Fig.4 Effect of flocculation temperature on clarification rate and stevioside loss rate
由圖4可知,當(dāng)水浴溫度低于35℃時(shí),隨溫度的提高,溶液中的大分子雜質(zhì)與殼聚糖分子相互碰撞的幾率增大,加速了絮凝沉淀的過(guò)程,有利于提取液的澄清。溫度升高也使甜菊苷的水溶性增強(qiáng),幫助吸附在絮凝體上的甜菊苷重新返回溶液,減少其損失。當(dāng)溫度過(guò)高時(shí)(>65℃),易使殼聚糖分子發(fā)生老化,影響澄清效果。因此,體系溫度選擇35~65℃為宜。
2.1.5 絮凝時(shí)間對(duì)絮凝效果的影響
取甜葉菊水提液600mL,平均分成6份,按2mL/g的投加量加入殼聚糖溶液,調(diào)pH6.0,攪拌5min,于45℃水浴中分別放置1、2、3、4、5、6h,減壓抽濾,測(cè)定提取液和樣品溶液的吸光度和甜菊苷含量,計(jì)算澄清率和損失率。結(jié)果如圖5所示。
圖5 絮凝時(shí)間對(duì)澄清效果的影響Fig.5 Effect of flocculation time on clarification rate and stevioside loss rate
由圖5可知,隨絮凝時(shí)間的延長(zhǎng),殼聚糖與膠體顆粒、蛋白質(zhì)等大分子雜質(zhì)形成的絮凝沉淀越多且結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,澄清效果好,被吸附的甜菊苷略有增加;當(dāng)絮凝時(shí)間超過(guò)4h,澄清率達(dá)到最高并穩(wěn)定在85%以上,溶液中甜菊苷的含量基本保持不變。因此,選擇絮凝4h為宜。
2.2 殼聚糖絮凝法澄清甜葉菊水提液正交試驗(yàn)
表2 殼聚糖絮凝法澄清甜葉菊水提液正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 2 Orthogonal array design and corresponding experimental results
表3 澄清率正交試驗(yàn)結(jié)果方差分析Table 3 Analysis of variance of clarification rate
表4 損失率正交試驗(yàn)結(jié)果方差分析Table 4 Analysis of variance of stevioside loss rate
由表2~4可知,影響提取液澄清率和甜菊苷損失率的4因素的重要程度均依次為殼聚糖投加量(A)>提取液pH值(C)>提取液質(zhì)量濃度(B)>體系溫度(D)。從澄清率角度分析,殼聚糖投加量是影響澄清率的顯著因素,最優(yōu)組合是A2B1C2D3;從損失率角度分析,殼聚糖投加量為極顯著因素,pH值是顯著因素,最優(yōu)組合為A1B3C3D3。絮凝除雜是甜菊苷分離純化前的重要工序,綜合考慮澄清率和損失率,較優(yōu)的工藝組合為A2B2C2D3,即殼聚糖投加量2mL/g、提取液質(zhì)量濃度1/10(g/mL)、pH6.0、溫度45℃、絮凝時(shí)間4h。
2.3 殼聚糖絮凝法和膜分離法的比較
表5 殼聚糖絮凝法與膜分離法的比較Table 5 Comparison between chitosan flocculation and membrane separation
Reis[17]等和Silva等[10]采用膜分離法澄清甜葉菊提取液,提取液的澄清率可達(dá)到90%以上,甜菊苷損失率低于10%。前者冷水浸提后直接用膜分離法澄清;后者冷水浸提后,經(jīng)分子篩除雜預(yù)處理,再用膜分離法澄清。趙永良等[18]采用膜分離法處理浸提的甜葉菊提取液,提取液澄清率81.13%,損失率11.04%。分析原因可能是當(dāng)提取液雜質(zhì)較多時(shí),膜容易污染,影響膜的流通量和分離效果。而殼聚糖絮凝法用于熱水浸提液的澄清也能達(dá)到相近效果,兩者都不會(huì)引入無(wú)機(jī)離子。此外,膜分離法通常需要特殊的設(shè)備,單獨(dú)一次膜分離很難達(dá)到理想的效果。如Zhang等[19]通過(guò)微濾、超濾、納濾3次膜處理來(lái)澄清甜葉菊提取液,而殼聚糖絮凝法無(wú)需特殊的儀器,操作簡(jiǎn)便。
2.4 殼聚糖絮凝法和傳統(tǒng)絮凝法的比較
按照優(yōu)化的殼聚糖絮凝法和傳統(tǒng)化學(xué)絮凝法工藝條件對(duì)甜葉菊水提液進(jìn)行預(yù)處理,其中化學(xué)絮凝法選取了澄清效果較好的絮凝劑與助凝劑組合FeCl3:CaO(質(zhì)量比,1:2.5)。
殼聚糖絮凝法預(yù)處理試驗(yàn)重復(fù)驗(yàn)證3次,得甜葉菊提取液的平均澄清率為86.63%,甜菊苷的平均損失率為6.89%?;瘜W(xué)絮凝法預(yù)處理結(jié)果如表6所示。
表6 化學(xué)絮凝法澄清試驗(yàn)結(jié)果Table 6 Clarification rates and stevioside loss rates using different amounts of FeCl3:CaO as the floccutant
由表6可知,雖然化學(xué)絮凝劑的絮凝能力較強(qiáng),但同時(shí)對(duì)有效成分的吸附能力也較強(qiáng),造成了甜菊苷的損失率較高。在取得相近澄清效果的條件下為化學(xué)絮凝法85.38%,殼聚糖絮凝法86.63%),兩者甜菊苷的損失率差異明顯(化學(xué)絮凝法26.27%,殼聚糖絮凝法6.89%)。殼聚糖絮凝法能有效的保留溶液中的有效成分,投加量少,安全無(wú)毒,完全可以替代傳統(tǒng)化學(xué)絮凝法。
通過(guò)單因素和正交試驗(yàn)優(yōu)化,得到了殼聚糖絮凝法澄清甜葉菊提取液的較佳工藝條件為殼聚糖投加量2mL/g、提取液質(zhì)量濃度1/10(g/mL)、提取液pH6.0、體系溫度45℃、絮凝時(shí)間4h。在上述條件下,甜葉菊提取液的平均澄清率為86.63%,甜菊苷的平均損失率僅為6.89%。殼聚糖絮凝法和膜分離法的澄清效果相近,且無(wú)需特殊設(shè)備;與傳統(tǒng)化學(xué)絮凝法相比,殼聚糖絮凝法能更有效的保留甜菊苷,應(yīng)用過(guò)程中不會(huì)帶入無(wú)機(jī)離子,具有投加量少,操作簡(jiǎn)單,安全無(wú)毒等優(yōu)點(diǎn),是一種適用于工業(yè)化生產(chǎn)的絮凝工藝。
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Application of Chitosan Flocculation Method in Clarification of Water Extract fromStevia rebaudianaBertoni Leaves and Flocculation Mechanism Analysis
XIE Jie,LIU Xiao-jing,ZHU Xing-yi,YE Hai-yan,WANG Ping*
(Zhejiang Key Laboratory of Pharmaceutical Engineering, College of Pharmaceutical Science, Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310014, China)
The effect of chitosan flocculation on clarifying water extract fromStevia rebaudianaBertoni leaves, prepared by twice repeated water extraction at a solid/liquid ratio of 1:10 (g/mL) followed by pooling and then rotary evaporation concentration of two extracts, was studied. Clarification rate and stevioside loss rate were investigated with respect to different factors. Using orthogonal array design method, the optimal process conditions for chitosan flocculation were determined as follows: ratio between 1% acetic acid solution of chitosan and driedStevia rebaudianaBertoni leaves 2:1 (mL/g), 1-fold concentration of pooled extracts fromStevia rebaudianaBertoni leaves, pH 6.0, flocculation temperature 45 ℃, and flocculation time 4 h. Under these conditions, a clarification rate of 86.63% and a stevioside loss rate of 6.89% were achieved. Chitosan flocculation without the need for special equipment had similar effectiveness to that of membrane separation in clarifying water extract fromStevia rebaudianaBertoni leaves. Compared with the conventional chemical flocculation, chitosan flocculation could more effectively retain effective ingredients in the water extract and had the advantages of effective flocculation, ready biodegradation, environmental safety and non-secondary contamination.
Stevia rebaudianaBertoni;stevioside;chitosan;flocculation;clarification
TS202.3
A
1002-6630(2011)20-0001-06
2010-10-28
浙江省重點(diǎn)國(guó)際合作項(xiàng)目(2009C14001)
謝捷(1978—),女,講師,博士研究生,研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物。E-mail:xiejie97@sohu.com
*通信作者:王平(1969—),女,教授,博士,研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物。E-mail:pharmlab@zjut.edu.cn