亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定奶粉中的三聚氰酸

        2011-10-13 08:07:14牛之瑞祝紅昆
        食品科學 2011年6期
        關(guān)鍵詞:三聚串聯(lián)奶粉

        牛之瑞,馮 雷,李 波,祝紅昆,珠 娜,潘 媛

        (云南省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院,云南 昆明 650223)

        超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定奶粉中的三聚氰酸

        牛之瑞,馮 雷,李 波,祝紅昆,珠 娜,潘 媛

        (云南省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院,云南 昆明 650223)

        建立奶粉中的三聚氰酸的超高效液相色譜-四極桿串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)檢測方法。樣品經(jīng)透析袋凈化、反相液相色譜分離后進行質(zhì)譜分析,在多反應監(jiān)測模式(MRM)下進行特征母-子離子對信號采集。根據(jù)保留時間、母離子和兩個特征子離子信息進行定性分析,以離子對m/z42.0進行定量。三聚氰酸的最低檢測限(RSN=3)為100.0 μg/kg。在100.0~2000.0μg/L時峰強度與質(zhì)量濃度的線性關(guān)系良好(r2≥0.9999)。在100.0、500.0、1000.0μg/kg 3個添加水平,三聚氰酸的回收率范圍為87.5%~98.8%,相對標準偏差小于9%。結(jié)果表明,該法簡單、靈敏,適用于奶粉中三聚氰酸的分析確證。

        三聚氰酸;奶粉;超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用

        三聚氰酸(cyanuric acid,CA)又名氰脲酸,是氫氰酸(HOCN)的三聚體,分子式為C3H3N3O3,相對分子質(zhì)量為129.07。三聚氰酸與三聚氰胺結(jié)構(gòu)類似,因含氮量高,有人作為偽蛋白添加到食品中使用,且研究證據(jù)顯示單獨攝入三聚氰胺毒性較低,同時攝入三聚氰酸和三聚氰胺后會導致腎結(jié)石,國外已有報道乳制品中檢出三聚氰酸[1]。目前,國內(nèi)檢測三聚氰酸的方法多為氣質(zhì)聯(lián)用法[2],需要進行衍生化后才能夠上機檢測,操作比較復雜。液相色譜法多采用正相色譜串聯(lián)質(zhì)譜方法檢測三聚氰酸[3]。國外已經(jīng)有一些關(guān)于三聚氰酸的液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法檢測法研究,但一般在預處理階段均采用固相萃取小柱的方法,取得了比較好的效果,但普遍存在成本偏高,操作繁瑣等缺點[4-15]。將奶粉溶解后經(jīng)透析紙透析,用反相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測,取得了較好的檢測結(jié)果,找到了一個操作簡便且成本相對低廉的三聚氰酸檢測方法。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        奶粉 市售。

        三聚氰酸標樣 美國Sigma公司;乙腈(色譜純) 美國Fisher公司;18.2M Ω超純水 德國賽多利斯公司;透析袋 上海Green Bird公司。

        1.2 儀器與設(shè)備

        CPA225D電子天平 德國Sartorius公司;ACQUITY超高效液相色譜、ACQUITY UPLC HILLIC(2.1×100mm,1.7μm)色譜柱 美國Waters公司;API-3200串聯(lián)質(zhì)譜儀、Analyst質(zhì)譜工作站 加拿大AB公司。

        1.3 色譜與質(zhì)譜條件

        1.3.1 色譜

        流動相A為10mmol/L甲酸銨溶液,流動相B為乙腈,流動相梯度見表1。流速:0.3mL/min;進樣量5μL;柱溫:3 0℃。

        表1 三聚氰酸的梯度洗脫程序Table 1 Gradient elution program of cyanuric acid

        1.3.2 串聯(lián)質(zhì)譜

        UPLC-MS/MS接口為電噴霧接口(ESI)負離子模式,離子監(jiān)測模式為多反應監(jiān)測模式(MRM),噴霧電壓(IS)-4500V,噴霧氣(GS1)、輔助氣(GS2)、氣簾氣(CUR)、碰撞氣(CAD)均為高純氮氣,噴霧氣氣壓為60psi,輔助氣氣壓為65psi,氣簾氣氣壓為20psi,碰撞氣氣壓為5psi,輔助噴霧氣溫度為600℃,去簇電壓(DP)為-32.0V,入口電壓(EP)為-8.0V,其他參考條件參見表2。

        表2 三聚氰酸定性離子對、定量離子對、采集時間、碰撞能量和碰撞室出口電壓Table 2 Qualitative ion pair, quantitative ion pair, harvest time,collision energy and collision cell exit voltage of cyanuric acid

        1.4 標準溶液的配制

        準確稱取三聚氰酸標準品0.0100g于10mL容量瓶中,用乙腈-水(1:1)稀釋至刻度,得到1.0mg/mL儲備溶液,于-5℃避光保存。臨用前,用流動相逐級稀釋成所需濃度,添加到陰性樣品中,然后進行樣品前處理。

        1.5 樣品前處理

        稱取2g樣品(精確到0.01g)于10mL離心管中,加入約60℃溫水,立即旋渦混勻,冷卻至室溫,轉(zhuǎn)移至折疊好的透析袋中,用5mL水分兩次洗滌離心管,一并加入到透析袋中,將袋口扎緊,置于50mL燒杯中,加入10mL水透析,用保鮮膜將燒杯口密封,60℃水浴3h,然后室溫放置13h后精確吸取透析液5mL于10mL容量瓶中用乙腈定容,經(jīng)0.45μm濾膜過濾后進樣。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 樣品前處理的優(yōu)化

        三聚氰酸溶于熱水,采用透析的方法,直接用水在60℃條件進行提取,用保鮮膜將燒杯口封嚴,盡量減少水分蒸發(fā)帶來的誤差。如果采用透析液直接進樣,色譜柱對水相十分敏感,出峰時間會發(fā)生漂移,無法達到檢測要求,所以,取5mL提取液用乙腈定容至10mL后進樣?;|(zhì)標準曲線法,可以較好的減少因回收率問題帶來的誤差。

        2.2 MS/MS條件和解離機理

        圖1 三聚氰酸一級質(zhì)譜圖Fig.1 Primary mass spectrum of cyanuric acid

        圖2 三聚氰酸二級質(zhì)譜圖Fig.2 Secondary mass spectrum of cyanuric acid

        歐盟在EC/657指令中規(guī)定,利用質(zhì)譜方法對藥物殘留進行確證,必須滿足4個識別點的要求,同時特征離子的豐度比要和標準物質(zhì)基本一致。采用串聯(lián)質(zhì)譜,一個母離子(圖1)加兩個特征離子(1.5點×2)可滿足確證需要。三聚氰酸二級質(zhì)譜的特征離子對分別為m/z127.9/42.0、127.9/84.8(圖2);加標樣品中殘留物的特征離子豐度與標準物質(zhì)基本一致,標準物質(zhì)定量離子色譜圖見圖3。

        圖3 三聚氰酸標樣(5.0ng/mL)定量離子色譜圖Fig.3 Quantitative ion chromatograph of chloramphenicol standard(5.0 ng/mL)

        2.3 線性范圍、標準曲線和檢出限

        采用基質(zhì)標準曲線,稀釋倍數(shù)為20倍。三聚氰酸在100~2000 μ g/kg(經(jīng)樣品前處理后溶液中的質(zhì)量濃度為5.0~100.0μg/L)內(nèi)線性良好,線性方程為y=67.8x+70.7,相關(guān)系數(shù)為0.9999;根據(jù)信噪比(RSN)=3計算,儀器檢出限為5.0μg/L,樣品檢出限為100μg/kg。

        2.4 回收率和精密度

        三聚氰酸樣品添加實驗選擇100.0、500.0、1000.0 μg/kg,3個添加水平進行加標回收,以離子對m/z127.9/42.0進行定量。由表3可見,三聚氰酸的回收率范圍為87.5%~98.8%,相對標準偏差小于9%。

        表3 方法精密度和回收率(n=4)Table 3 Precision and recovery rate of this method (n=4)

        2.5 實際樣品檢測

        圖4 加標奶粉樣品定量離子色譜圖Fig.4 Quantitative ion chromatograph of spiked milk powder sample

        按照本方法對實際樣品進行分析,從圖4可以看出,樣品中的三聚氰酸很好地被分離,無干擾峰,且分析時間很短。

        3 結(jié) 論

        本方法采用透析的方法對奶粉樣品進行處理,超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)聯(lián)用方法檢測奶粉中的三聚氰酸。本方法具有分析速度快、操作簡單、成本低廉、高選擇性和高靈敏度的特點,適合大量樣品的快速分析要求。

        [1] FILIGENZI M S, PUSCHNER B, ASTON L S, et al. Diagnostic determination of melamine and related compounds in kidney tissue by liquid chromatography/tandem mass spectrometry[J]. Agric Food Chem,2008, 56(17): 7593-7599.

        [2] 中國檢驗檢疫科學研究院, 中華人民共和國江蘇出入境檢驗檢疫局.GB/T 22288—2008 植物源產(chǎn)品中三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸的測定[S]. 北京: 中國標準出版社, 2008.

        [3] 欒偉. 寵物食品中三聚氰胺及三聚氰酸的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法分析,[J]. 分析測試學報, 2008, 27(11): 203-206.

        [4] DESMARCHELIER A, CUADRA M G, DELATOUR T, et al. Simultaneous quantitative determination of melanine and cyanuric acid in cow s milk and milk-based infant formula by liquid chromatography-electrospray ionization tandem mass spectrometry[J]. Agric Food Chem, 2009, 57(16): 7186-7193.

        [5] TRAN B N, OKONIEWSKI R, STORM R, et al. Use of methanol for the efficient extraction and analysis of melamine and cyanuric acid residues in dairy products and pet foods[J]. Agric Food Chem, 2010, 58(1):101-107.

        [6] 魏文彬, 張長龍. 反相高效液相色譜法測定乳與乳制品中三聚氰酸[J]. 中國衛(wèi)生檢驗雜志, 2009, 19(3): 481-487.

        [7] 王強, 冼艷萍, 羅海英, 等. 高效液相色譜法檢測雞蛋中三聚氰酸[J].現(xiàn)代食品科技, 2009, 25(6): 711-713.

        [8] TANG H W, NG K M, CHUI S Y, et al. Analysis of melamine cyanurate in urine using matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry[J]. Anal Chem, 2009, 81(2): 3676-3682.

        [9] 王光輝, 熊少祥. 有機質(zhì)譜解析[M]. 北京: 化學工業(yè)出版社, 2005:118-128.

        [10] 盛龍生, 湯堅. 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在食品和藥品分析中的應用[M]. 北京: 化學工業(yè)出版社. 2008: 51-55.

        [11] 董穎超, 齊濤, 李俊, 等. GC-MS法檢測包裝材料中的三聚氰酸殘留[J]. 質(zhì)譜學報, 2009, 30(11): 244-246.

        [12] 李鋒格, 姚偉琴, 田延河, 等. 混合型固相萃取柱凈化-氣相色譜-質(zhì)譜法測定嬰幼兒配方奶粉中的三聚氰酸[J]. 色譜, 2010, 28(3): 319-322.

        [13] 李鋒格, 姚偉琴, 蘇敏, 等. 氣相色譜-質(zhì)譜法快速測定牛奶中的三聚氰胺和三聚氰酸[J]. 色譜, 2009, 27(2): 233-236.

        [14] TANG H P, LAI S S, LAI A Y, et al. Improved method for the determination of cyanuric acid in animal feed by GC-MS[J]. Chromatographia,2009, 70(9/10): 1405-1410.

        [15] HE Lili, LIU Yang, LIN Mengshi, et al. A new approach to measure melamine, cyanuric acid, and melamine cyanurate using surface enhanced Raman spectroscopy coupled with gold nanosubstrates[J]. Sens& Instrumen Food Qual, 2008, 2(1): 66-71.

        Determination of Cyanuric Acid in Milk Powder by UPLC-MS/MS

        NIU Zhi-rui,F(xiàn)ENG Lei,LI Bo,ZHU Hong-kun,ZHU Na,PAN Yuan
        (Yunnan Institute of Product Quality Supervision and Inspection, Kumming 650223, China)

        An ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS) method was developed for the determination of cyanuric acid residues in milk powder. Samples were thoroughly suspended in 60 ℃water and dialyzed against deionized water for 3 h in 60 ℃ water bath before analysis on reversed-phase high performance liquid chromatography-quadrupole tandem mass spectrometry. Mass spectral acquisition was applied with a multiple reactionmonitoring (MRM) mode. Qualitative analysis was achieved on the basis of the retention time and information about parent ions and two daughter ions. Quantitative determination was carried out on the basis of the characteristic ion ofm/z42.0. The linear range for cyanuric acid was between 5μg/L and100μg/L with a correlation coefficients (r2) of larger than 0.9999. The average recovery rate for cyanuric acid ranged between 87.5% and 98.8% in milk powder samples spiked at the levels of 100.0, 500.0 μg/kg and 1000.0μg/kg. The relative standard deviation (RSD) was less than 9%. The detection limit of this method was 100.0μg/kg.Therefore, this method is simple and suitable for routine analysis of milk powder.

        cyanuric acid;milk powder;UPLC-MS/MS

        TS207.3

        A

        1002-6630(2011)06-0173-03

        2010-04-20

        牛之瑞(1982—),男,助理工程師,碩士,研究方向為農(nóng)、獸藥殘留檢測。E-mail:bull.nzr@163.com

        猜你喜歡
        三聚串聯(lián)奶粉
        綜合創(chuàng)新實驗:異三聚茚的合成,表征與應用
        用提問來串聯(lián)吧
        用提問來串聯(lián)吧
        奶粉危機
        妹妹的奶粉錢
        你家奶粉只能沖著喝?這些媽媽們把奶粉做成了這個樣子!
        媽媽寶寶(2017年2期)2017-02-21 01:21:06
        三聚環(huán)保
        審批由“串聯(lián)”改“并聯(lián)”好在哪里?
        我曾經(jīng)去北京串聯(lián)
        三聚磷酸二氫鋁/載硫硅藻土催化合成阿司匹林
        合成化學(2015年2期)2016-01-17 09:03:05
        日韩精品不卡一区二区三区| 国产在线视频一区二区三区| 精品国产高清a毛片无毒不卡| 国产呦系列视频网站在线观看| 亚洲av熟女少妇一区二区三区 | 少妇高潮av久久久久久| 中文字幕人妻熟女人妻洋洋 | 亚洲熟妇色xxxxx欧美老妇| 精品人妻久久av中文字幕| 国产乱理伦在线观看美腿丝袜| 青草内射中出高潮| 日韩免费一区二区三区在线 | 国产成人av三级在线观看韩国| 伊人大杳焦在线| 少妇白浆高潮无码免费区| 亚洲国产精品无码久久九九大片健| 青草草视频在线观看华人免费| 狠狠色丁香婷婷久久综合| 久久久久国产一区二区三区| 亚洲香蕉毛片久久网站老妇人 | 无码精品人妻一区二区三区人妻斩| 色伊人国产高清在线| 精品国产日产av在线| 人妻中文字幕乱人伦在线| 处破痛哭a√18成年片免费| 视频二区精品中文字幕| 亚洲成人精品久久久国产精品| 免费看av在线网站网址| 日本免费人成视频播放| 国产成人自拍视频在线观看网站| 偷拍综合在线视频二区| 人妻在线日韩免费视频| 国产品精品久久久久中文| 五月婷婷开心五月激情| 韩国三级中文字幕hd| 亚洲毛片在线播放| 国产精品成年人毛片毛片| 精品露脸国产偷人在视频| 国产成人av一区二区三区在线| 如何看色黄视频中文字幕| 亚洲av日韩一卡二卡|