潘壽文 方建強(qiáng)

母犬發(fā)情和適時(shí)配種的技術(shù)鑒定

潘壽文 方建強(qiáng)

一、外陰部檢查

外陰水腫、增大、流出血性分泌物，陰門(mén)周圍及尾毛濕潤(rùn)、粘結(jié)；發(fā)情期腫脹明顯，觸摸陰部和陰門(mén)時(shí)擺向一側(cè)，后驅(qū)升高，此期后期水腫有所減退；發(fā)情結(jié)束1周～2周復(fù)原，表現(xiàn)為陰門(mén)小，有皺褶，具有良好的緊張度。

二、陰道檢查

陰道檢查法對(duì)于確定母犬的發(fā)情具有一定的說(shuō)服力。此法一般在站立保定下進(jìn)行，需要大小適度的犬用開(kāi)膣器及專用的光源。首先用軟紙將陰門(mén)周圍擦干凈，然后用左手的大拇指和食指把陰門(mén)口輕輕的翻開(kāi)，以保證開(kāi)膣器的前端直接與陰道黏膜接觸。右手持已消毒完好與體溫接近的開(kāi)膣器，澆上一些生理鹽水以保證潤(rùn)滑，緩緩地插入陰道。起初開(kāi)膣器的方向朝上，然后水平向前推，達(dá)到一定深度后，在專用光源的幫助下，觀察陰道黏膜顏色及分泌物等。檢查結(jié)果與判定：判定母犬發(fā)情期的不同時(shí)期主要根據(jù)陰道黏膜的顏色變化、黏膜的腫脹情況及分泌物的多少。判定標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1。

表1 母犬不同發(fā)情周期時(shí)間內(nèi)陰道黏膜顏色等的變化情況

三、陰道細(xì)胞學(xué)檢查

陰道上皮的組織學(xué)構(gòu)建受雌激素的影響很大， 間情期陰道黏膜由2層～3層非角質(zhì)化的扁平上皮覆蓋。在雌激素的影響下細(xì)胞層增生且表層細(xì)胞角質(zhì)化，最大程度的細(xì)胞增生可以達(dá)到20層。角質(zhì)化的過(guò)程發(fā)生在發(fā)情期。從發(fā)情后期開(kāi)始陰道上皮逐漸退化。陰道細(xì)胞學(xué)檢查的目的即在此基礎(chǔ)上達(dá)到認(rèn)識(shí)發(fā)情周期的時(shí)間、確定排卵時(shí)間及了解卵巢功能狀況等。陰道細(xì)胞學(xué)檢查可在做陰道檢查的同時(shí)用無(wú)菌的棉拭子在陰道深處輕輕擦拭一下以采得陰道黏膜上皮(陰道前庭處的陰道黏膜上皮受雌激素的影響不大，故要在陰道深處采樣)，然后在載玻片上輕輕的滾一下用帕尼科方法染色。但此法比較復(fù)雜，需要較多時(shí)間。目前德國(guó)漢諾威獸醫(yī)大學(xué)繁殖醫(yī)學(xué)院使用的是一種工廠化生產(chǎn)的專用染色劑，染色時(shí)非常方便，且效果非常好但其詳細(xì)成分不清。陰道黏膜上皮亦可用姬姆薩方法染色。陰道細(xì)胞染色的判定標(biāo)準(zhǔn)主要是根據(jù)細(xì)胞的大小、形狀、細(xì)胞核與細(xì)胞漿成分的比例及核內(nèi)物質(zhì)的存在與否。見(jiàn)表2。

在間情期看到的是基底細(xì)胞或副基底細(xì)胞為主，這些細(xì)胞在發(fā)情前期消失，形成中間細(xì)胞和淺層細(xì)胞。除上皮細(xì)胞之外，在發(fā)情前期還有大量的紅細(xì)胞滲出并能觀察到少量的白細(xì)胞。在發(fā)情前期向發(fā)情期過(guò)渡時(shí)，淺層細(xì)胞增多，且逐漸的角質(zhì)化。在接近排卵時(shí)看到的幾乎都是角質(zhì)化的表層細(xì)胞(80%～90%)，這些細(xì)胞單個(gè)的平位于載玻片上。檢驗(yàn)證明，大約75%的母犬在最大角質(zhì)化程度后的第1天發(fā)生排卵。最大角質(zhì)化程度持續(xù)1天～6天，平均2.6天。在發(fā)情期的后期表層角質(zhì)層細(xì)胞幾天之內(nèi)逐漸脫落，陰道細(xì)胞抹片的角質(zhì)化細(xì)胞相互連接。在這個(gè)再生過(guò)程中陰道黏膜層也出現(xiàn)了白細(xì)胞，在發(fā)情后期的2天～4天內(nèi)陰道抹片上可見(jiàn)到大量的白細(xì)胞，同時(shí)重新出現(xiàn)深層細(xì)胞。在發(fā)情后期的早期做陰道細(xì)胞抹片間或可見(jiàn)到泡沫細(xì)胞(空泡細(xì)胞)及發(fā)情后期細(xì)胞(限制性基底細(xì)胞，其細(xì)胞漿中含有中性粒細(xì)胞)。后一種細(xì)胞為發(fā)情后期的典型特征。但在陰道炎時(shí)也有類似的現(xiàn)象。個(gè)別母犬在陰道黏膜的再生過(guò)程中常伴有大量的炎性細(xì)胞的產(chǎn)生，引起膿性細(xì)胞的排出，此點(diǎn)要與子宮疾病區(qū)別開(kāi)來(lái)。發(fā)情周期中陰道細(xì)胞抹片不同細(xì)胞的分布情況，見(jiàn)表3。

表2 陰道深層上皮細(xì)胞與表層細(xì)胞的形態(tài)學(xué)區(qū)別

表3 母犬發(fā)情周期過(guò)程中陰道細(xì)胞抹片不同細(xì)胞的分布情況（%）

表4發(fā)情周期中血液中孕酮的變化

四、用腹腔鏡觀察子宮和卵巢的變化

有資料表明：觀察母犬子宮的血管變化可以確定母犬的排卵時(shí)間。

事實(shí)上，使用腹腔鏡觀察卵巢上卵泡的發(fā)育情況，就可以準(zhǔn)確地判定排卵時(shí)間，即卵泡的一部分突出于卵巢表面1.5毫米左右，其頂端透明，這預(yù)示著母犬即將排卵，此時(shí)是配種的最適時(shí)間。如果在卵巢上看到的“卵泡”是中間塌陷，顏色為肉紅色，這表明排卵已經(jīng)發(fā)生，當(dāng)時(shí)的“卵泡”已發(fā)育成黃體。

五、孕酮測(cè)定

到目前為止，確定母犬排卵時(shí)間的范圍最可靠的方法是測(cè)定孕酮。因?yàn)樵型诎l(fā)情前期即將結(jié)束時(shí)開(kāi)始升高，一般在達(dá)到5ng/ml時(shí)即可排卵。臨床實(shí)踐中通常這樣處理：母犬動(dòng)情之后(開(kāi)始進(jìn)入了發(fā)情前期)可每2天進(jìn)行一次陰道黏膜及陰道細(xì)胞學(xué)檢查，只要陰道細(xì)胞角質(zhì)化達(dá)到了50%，即可采血進(jìn)行孕酮測(cè)定，孕酮量達(dá)到4ng/ml～5ng/ml時(shí)，即可對(duì)母犬配種。發(fā)情周期中孕酮濃度的變化，見(jiàn)表4。

六、口腔液鏡檢法

將發(fā)情母犬的口腔液置于載玻片上自然烘干，在顯微鏡下觀察唾液結(jié)晶體的變化，當(dāng)被檢結(jié)果出現(xiàn)典型的羊齒狀或松針狀，主梗粗而硬，分支密而長(zhǎng)時(shí)，為母犬最佳配種時(shí)期；但出現(xiàn)的羊齒或松針狀不典型，主梗有彎曲，分支少而短則為可配期，可能受孕，但產(chǎn)仔不多，可滯1天～2天后再鏡檢；若出現(xiàn)氣泡狀，則不能受孕。

七、B超等方法

B型超聲診斷技術(shù)亦可用于母犬的排卵鑒定，但對(duì)B超儀器的質(zhì)量要求及操作人員的技術(shù)要求均很高。在德國(guó)，這種方法已經(jīng)作為一種排卵時(shí)間確定的重要輔助手段，但國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)有成功的報(bào)道。

（作者單位：公安部南京警犬研究所，210012）

（編輯：李 冰）